DB32∕T 3356-2018 南京椴组培育苗技术规程.pdf

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1、ICS65.020.40B61备案号:58093-2018DB32江苏省地方标准DB32/T3356—2018南京椴组培育苗技术规程TechnicalregulationforpropagationofTiliamiqueliana2018-2-10发布2018-3-10实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T3356—2018前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由江苏省中国科学院植物研究所提出并归口。本标准起草单位:江苏省中国科学院植物研究所。本标准主要起草人:汤诗杰、束晓春、李乃伟、王欢利

2、、王仲伟。IDB32/T3356—2018南京椴组培育苗技术规程1范围本标准规定了南京椴组织培养技术中外植体选择与处理、腋芽诱导、继代增殖、生根培养、炼苗、移栽和移栽后管理的技术要求。本标准适用于南京椴的组织培养快速繁殖。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB6001育苗技术规程3外植体选择与处理3.1外植体母株选择选择生长健壮且无病虫害的母株。宜选择1年生苗龄的实生容器苗,不宜选

3、择其他苗龄,忌用地栽苗。3.2外植体母株管理于3月份,将腋芽尚未萌发的南京椴容器苗,移至玻璃温室培养。使用培养架将容器苗底部隔离地面50cm。每隔10d,喷洒多菌灵1次,使用40%多菌灵可湿性粉剂500~800倍液。切忌将容器苗地表放置,以免根系扎入带菌土壤中生长。3.3外植体选择外植体母株枝条未木质化之前,剪下枝条,去除叶片,保留1cm长叶柄,作为外植体。主干基部保留3-4个饱满的腋芽。在8月初、9月初与10月初,可重复3次外植体取样。3.4外植体消毒先用毛刷对枝条表面刷洗,并通过清水冲洗干净。再用84消毒液(稀释

4、50倍),在摇床上振荡消毒15min-20min,并通过流水冲洗20min-30min。于无菌操作台上,用75%乙醇消毒50s-60s,然后立即倒入0.1%的升汞消毒10min,最后无菌水洗涤4次,每次振荡3min-5min。3.5外植体分段将消毒后的枝条,切割成0.6cm长的茎段,每段带1个腋芽。4腋芽诱导1DB32/T3356—2018将茎段接种于诱导培养基中进行初代诱导,培养温度为25℃,首先在黑暗中培养24小时,然后光照培养20d:光照时间为10-16小时/天,光照强度为2000lx,所述初代诱导培养基为WP

5、M培养基,添加的激素水平为:6-BA0.2mg/L+KT0.1mg/L+IBA0.04mg/L+GA30.2mg/L,诱导培养基PH为5.8。5继代增殖初代培养20d后,将10cm高的初代苗切割为1cm茎段,每茎段带1腋芽,切除叶片,接入继代增殖培养基,进行不定芽诱导,继代培养20d,培养温度为25℃,光照时间为10-16小时/天,光照强度为2000lx,继代增殖培养基为WPM培养基,并添加反式玉米素0.2mg/L+KT0.5mg/L+IBA0.1mg/L,培养基PH为5.8。6生根培养继代培养40d后,南京椴无根试

6、管苗进行切分,每株均有2个不定芽,接入生根培养基中进行生根培养20d,培养温度为25℃,光照时间为10-16小时/天,光照强度为2000Lx,生根培养基1/2MS培养基,并添加IBA3.0mg/L+NAA1.0mg/L,培养基PH为5.8。7炼苗培养当生根苗的不定根长至4cm左右,生根数在4-8根时,将组培瓶从培养室取出,不打开瓶盖,在温室或荫棚驯化3d,环境遮光度为60%。驯化后打开瓶盖,继续驯化2d后从瓶中取出组培苗,洗净根部培养基后用40%多菌灵可湿性粉剂(500~800)倍液浸泡20min。8移栽8.1栽培基

7、质选择基质成分为重量比1:3:2的黄心土、珍珠岩和草炭土。8.2栽培容器选择采用50孔穴盘,圆形口、尖底的5cm×11cm穴盘。旧穴盘需消毒后才可使用。8.3移栽方法组培苗上方使用带孔PVC膜覆盖保湿,放在通风阴凉处培养20d-30d,培养到第15d将PVC膜移除,换用折光率75%的遮阳网。9移栽后管理9.1光照管理初始光照强度宜在5000lx左右,15d后将光照提高至15000lx。9.2温度管理移栽苗培养温度为18℃~28℃,以25℃恒温为最佳。2DB32/T3356—20189.3水分管理移栽苗初始培养湿度范围

8、为70%~85%,培养30d后,将湿度控制在50%~75%。9.4消毒与施肥管理每隔10d喷1次多菌灵1000倍液。每隔15d喷施可溶性完全肥料(N:P:K=3:1:1)1000倍液1次。3DB32/T3356—2018AA附录A(规范性附录)WPM培养基母液成分组成名称成分含量(mg/L)单位母液加入药品(g)①0.5L1.0L1.5L2.0

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