实验 二 细菌单染色、革兰氏染色及形态观察课件.ppt

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1、实验二细菌单染色、革兰氏染色及形态观察一、实验目的掌握显微镜油镜的使用掌握细菌的单染色技术和革兰氏染色技术二、实验原理菌体透明不易观察--------单染色菌体鉴别--------------------革蓝氏染D=λ/2nsin(α/2)：可见光的波长（平均0.55m)油镜，NA=1.25，NA=n×sinα高倍镜，40倍NA=0.65α空气：NA=1×sin60=0.87水：NA=1.33×sin60=1.15油：NA=1.52×sin60=1.32分辨力=λ/2NA可见光的平均光波长度0.55μm高倍镜：0.55/2×

2、0.65=0.42μm油镜：0.55/2×1.25=0.22μm三、实验材料：细菌菌株：大肠杆菌、八叠球菌、枯草芽孢杆菌染色剂：结晶紫、复红、碘液、乙醇仪器器皿：显微镜、香波油、二甲苯、擦净纸、酒精灯、接种针、吹风机、洗瓶、四、实验内容单染色------镜检观察----形态描（枯草）革蓝氏染色----镜检观察------结果（大肠、八叠、枯草）五、实验报告：1、报告革兰氏染色结果2、绘出三种菌的个体形态图干净载玻片单染色1min涂片-----干燥（吹干固定）水洗、干燥油镜镜检单染色革蓝氏染色草酸胺结晶紫液进行初染；1min水洗再

3、用碘液进行媒染；1min—水洗继而用95%乙醇脱色；30s水洗最后用碱性复红复染1min水洗干燥涂片-----干燥（吹干固定）干燥油镜镜检结晶紫1min水洗碘液1min水洗95%乙醇脱色水洗复红复染水洗实验报告大肠及杆菌八叠球菌八叠球菌枯草大肠清理油镜头擦镜纸------去油擦镜纸+二甲苯-------去油擦镜纸-----------去二甲苯