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1、分类分类号Q75学校代码10129UDC606学号08210034无芒雀麦种质资源遗传多样性分析GeneticdiversityanalysisofBromusinermisaccessions申请人：宋旭红学科门类：理学学科专业：生物化学与分子生物学研究方向：种质资源多样性与抗性分子生物学指导教师：韩冰教授田青松副研究员论文提交日期：二〇一一年五月摘要ISSR(Inter-simpleSequenceRepeatPolymorphicDNA)是一种新型的以微卫星重复序列作为引物检测物种多态性的DNA分子标记技术，具有重复性好，多态性丰富，共显性的特点。
2、无芒雀麦(Bromusinermis)为长寿根茎型多年生草本植物禾本科草类，又称无芒草，禾萱草。具有营养价值高、产量大、适口性好、利用季节长、耐寒耐旱、耐放牧、适应性强、根茎发达、再生性强、根部蔓生地下茎、易结成草皮，是建立人工草场和环保固沙的主要草种。本研究利用ISSR分子标记技术分析69份无芒雀麦种质资源的遗传多样性，旨在为无芒雀麦遗传资源的鉴定，优良品质资源的发掘、改良以及在杂种优势育种上的应用提供参考。主要结果如下：1.通过对模板DNA浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物浓度、退火温度等因素的研究，建立了适合无芒雀麦基因组DNA的ISSR技术扩增体
3、系：25μL体系中含10×PCRBuffer3μL，MgCl24μL，dNTPs（各2.5mmol/L）2μL，模板DNA10-30ng，TaqDNA聚合酶1.0μL，引物（10nmol/L）1μL。2.从62条引物中筛选出19条多态性高、条带清晰、分布均匀的引物用于材料分析，共扩增出可统计条带109条，每个引物产生1到10个位点，其中104条多态性条带，多态性位点占95.41%。3.用POPGENE32分析软件对无芒雀麦遗传多样性进行统计分析，结果表名：69份无芒雀麦材料总的Nei's基因多样性指数为0.2550，Shannon信息指数为0.3969。
4、4.利用SimQual软件计算供试材料的Jaccard遗传相似系数(GS)，69份材料之间的遗传相似系数分布在0.2857~0.8421之间。5.用SLT_NTsys2.1e软件对69份无芒雀麦进行UPGMA聚类分析和主成分分析，结果显示69份无芒雀麦遗传关系复杂，最终把69份无芒雀麦种质划分成九个遗传类群。关键词：分子标记；ISSR；无芒雀麦；遗传多样性GeneticdiversityanalysisofBromusinermisaccessionsAbstractISSR(Inter-simpleSequenceRepeatDNA),withhigh
5、repetitivenessefficiency,abundantpolymorphismandcodominance,isanewtypeofDNAmolecularmarkerswithmicro-satelliterepeatsequencesasprimerstodetectthepolymorphismsofaspecies.Bromusinermisbelongstograssfamily,andisaherbaceousperennial.Ithasmanycharacteristics,suchashighnutritivevalue,h
6、ighproductivity,goodpalatability,longseasonofutilization,tolerancetocold,droughtandgrazing,powerfulwideadaptation,developsrhizomes,andeaslyformsaforagesod.Itisthemajorgrassspeceisuseinestablishingartificialrangeland,environmentalprotectionandstabilizingsandylands.Inthisthesis,ISS
7、Rwereusedtoquantitythegeneticdiversityamong69Bromusinermisisaccessions.Thepurposeistoprovideinformationforidentificationofgeneticresources,includingthosewhichhavehighyieldandqualityandselectingpopulationstomutimizehybridvigor.Themainresultsareasfollows:1.TheingredientsofISSRreact
8、ionsystemsuchasTaqDNAPolymerase,dNTP,DNA
