克雷伯氏菌ASP-15抗菌蛋白抑菌活性的初步研究-论文.pdf

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1、第5卷第8期黑龙江科学V0I．5No．82014年8月HEILONGJIANGSCIENCEAugust2014克雷伯氏菌ASP一15抗菌蛋白抑菌活性的初步研究甄涛，殷博，董桂军，王向平。，安琦，陈静宇(1．黑龙江省科学院微生物研究所，哈尔滨150010；2．黑龙江省农垦总局土壤肥料总站，哈尔滨150036；3．北大荒农业股份有限公司江滨分公司，哈尔滨150010)摘要：为了研究克雷伯氏菌ASP-15抗菌蛋白的抑菌活性及生物稳定性。采用硫酸铵分级沉淀方法获得20-40饱和度的抗菌粗蛋白。采用茵丝生长速率法检

2、测其对7种植物病原真菌的抑菌活性，采用牛津杯法测定其生物稳定性。结果表明，抗菌蛋白粗提物对7种植物病原真菌菌丝生长均表现出不同强度的抑制作用，其中对尖孢镰刀菌的抑制作用最弱，对其他6种病原菌抑制作用均表现出较强的抑菌能力，抑制率为80％以上。抗菌蛋白在pH4．0—10．0抑菌活性稳定，活性均能保持在90％以上，对紫外线照射不敏感。结论：抗菌蛋白具有较强的酸碱、紫外线和酶的稳定性以及广谱的抑菌活性。关键词：克雷伯氏菌；抗菌蛋白；抑菌活性；稳定性中图分类号：$852．61文献标志码：A文章编号：1674-864

3、6(2014)08--0006-02StudyontheinhibitionactivityofantifungalcrudeproteinproducedbyKlebsiellaASP一15ZHENTao，YINBo，DONGGui—inn，WANGXiang—ping3，ANQi，CHENJing-yu(1．InstituteofMicrobiology，HeilongfiangAcademyofSciences，Harbin150010，China；2．SoilandrStationofHeilong

4、jiangLandReclamationBureau，Harbin150036，China；3．JiangbinBranchofHeilong]iangAgricultureCo．，Ltd．。Harbin150010，China)Abstract：Objective：tostudytheklebsiellaASP-15baeteriostaticactivityofantimierobialproteinsandbiologicalstability．Method：ammoniumsulfatefracti

5、onalprecipitationfor20～40saturationantibacterialcrudeprotein．Usingmyceliumgrowthratemethodtodetectthebacteriostaticactivityof7kindsofplantpathogenicfungi，Oxfordcupmethodisusedtodeterminethebiologicalstability．Result：theantibacterialproteincrudeextractsof7k

6、indsofplantpathogenicfungalmyceliashowedinhibitoryeffectofdifferentintensity，theinhibitoryeffectoffusariumoxysporumtheweakest，theother6kindsofpathogenicbacteriainhibitionshowedstrongantibacterialability．inhibitionrateofover8O％．AntimicrobialproteinswithinpH

7、4．0—10．0bacteriostaticactivityisstable，activitycouldremainabove90％，isnotsensitivetoUVirradiation．Conclusion：theantibacterialproteinwithstrongacidandalkali．UVandthestabilityofenzymeandthebroadspectrumofantibacterialactivity．Keywords：klebsiella；antifungalpro

8、tein；antagonisticactivity；stabihy目前，我国对生防菌功能性代谢产物的研究有了较大本文对ASP-15对抗菌蛋白的理化性质及对病原菌的拮突破，新的生防菌功能性代谢产物不断被发现并应用。我抗作用进行初步研究，为生物防治、克隆抗菌蛋白基因、转国农用生防菌功能性代谢产物事业在较短的时间内取得了基因工程奠定了理论基础。迅速的发展，已成为我国作物保护工作中的一项重要措施。1材料与方法克雷伯氏菌A