小白菊内酯增强阿霉素和地塞米松对Jurkat白血病细胞增殖抑制及凋亡的研究.pdf

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1、LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2014VOL．25NO．6时珍国医国药2014年第25卷第6期小白菊内酯增强阿霉素和地塞米松对Jurkat白血病细胞增殖抑制及凋亡的研究王晓桃，刘玲，刘健，唐爱林，聂宇薇，何玉婵(桂林医学院附属医院，广西桂林541001)摘要：目的探讨小白菊内酯(PI’L)增强阿霉素(Adr)和地塞米松(Dex)抗Jurkat细胞的白血病效应及可能机制。方法以Jurkat细胞株为研究对象，MTY法测定各药物对Jurkat细胞增殖抑制的影响，计算48h的半数抑制浓度(IC)；用流式细胞仪检测

2、药物作用后Jurkat细胞的凋亡率；应用免疫组化法检测药物作用后Jurkat细胞NF—KBp65蛋白的变化。结果PTL、Adr、Dex呈浓度依赖性地抑制Jurkat细胞增殖，48h的IC。分别为8．11，O．53，324．35txmol／L。2、4、8、16i~mol／LL联合5001xmol／LDex、0．25Ixmol／LAdr时较单用等剂量的Dex、ADM处理Jurkat细胞48h后的抑制率明显增高，两两比较差异均有统计学意义(P均小于0．05)。单用Dex、Adr、PTL及PrL联合Dex及Adr作用Jurkat细胞24h的凋亡率分别为(64．13

3、±4．62)％、(68．18±4．11)％、(25．18-4-3．O7)％、(77．05±4．35)％、(81．68±4．56)％，实验组的细胞凋亡率高于对照组(5．25±1．4)％(P均为0．00)，L联合Dex及Adr组的凋亡率明显高于单用Dex及Adr组(P均小于0．O5)。单药L、Dex及PI’L联合Adr、Dex作用Jurkat细胞24h后的NF—KBp65的阳性积分明显低于对照组(P均为O．00)，而Adr单药组则明显高于对照组(P=0．00)，L联合组均明显低于单用组(P均低于0．05)。结论PrI’L可通过抑制NF—KBp65信号通路，增强

4、Adr、Dex抑制Jurkat白血病细胞增殖，促进其凋亡。关键词：急性T白血病淋巴细胞；细胞增殖；细胞凋亡；小白菊内酯；核因子KB／p65DOI标识：doi：10．3969／j．issn．1008-0805．2014．06．025中图分类号：R285．5文献标识码：A文章编号：1008-0805(2014)06—1347-03成人急性T淋巴细胞白血病(AdultacuteTlymphoblastic瑞芬思生物科技有限公司)RPMI—Medium1640干粉、胎牛血清leukemia，T—ALL)是常见的成人急性白血病之一，生物学特征多(FBS)(杭州四季青

5、公司)；四甲基偶氮唑蓝(MTY)、DMSO溶液样，临床异质性很大。化疗是T—ALL最主要、也是最基本的治(北京SABC公司产品)；AnnexinV／PI(碘化丙锭)试剂盒(德国疗策略。国际上不同研究组报道的系统治疗方案，虽然完全缓解Bender公司)；鼠抗人单克隆抗体(浓缩型)NF—KBp65(北京中(completerecovery，CR)率达70％～90％，3—5年无病生存率山公司)，二抗快捷性酶标为羊抗鼠／兔IgG聚合物(福建迈新生40％～50％⋯，但多数患者终将复发，长期生存率较低，治疗反应物技术开发有限公司)，荧光抗体(美国SantaCruz公司

6、)。24孔、不令人满意。其原因之一是由于白血病细胞对常规化疗药物不96孔培养板(美国Coming公司)。6AnnexinVFITC／PI细胞凋敏感，为解决这一问题，开发新的中药制剂以增强化疗药物的敏亡测定试剂盒(购自江苏碧云天生物技术公司)；自动酶标读数感性，解决成人T—ALL的耐药是当前研究的一大趋势。小白菊仪(国产DG一3022)；FluorChemTM8900凝胶成像系统(美国Al·内酯(parthenolide，胛L)是植物药野甘菊的主要活性成分，近来phaInnotech公司)；流式细胞仪(美国BD公司)。研究发现PTL具有较强的抗肿瘤活性，可诱

7、导结肠癌、肝癌、多1．2细胞传代培养人T—ALL细胞株Jurkat从外室引进后，常发性骨髓瘤、急性髓细胞白血病等肿瘤细胞凋亡，并对其他抗癌规离心弃上清，复苏后的细胞在含体积分数10％的加热灭活的药物具有增敏效应，但在T—ALL中是否有抗白血病效应、能胎牛血清(10％FBS)及100M／ml青霉素、100g／ml链霉素的否增强化疗药物的效果及作用机制尚不清楚。本研究以人T—RPMI1640的培养基中，置于37℃、饱和湿度、体积分数为5％的ALL细胞株Jurkat为研究对象，探讨PTL及联合普通化疗药物阿CO孵箱中培养，每3天更换培养基并传代1次。本实验用的细

8、霉素(Adriamycin，Adr)和地塞米松(Dexametha