微生物的培养与应用ppt课件.ppt

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1、课题1微生物的实验室培养了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。一、课题目标：掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。二、课题重点和难点：三、技能目标：课题1微生物的实验室培养一、基础知识微生物:1.特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.2.微生物包括五类病毒细菌放线菌真菌原生动物返回菌落：单个或少数细菌在

2、固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。不同的细菌的菌落特征不同菌落是鉴定菌种的重要依据固体培养基：菌落，菌苔1、定义为人工培养微生物而制备的、提供适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。2、分类天然培养基培养基中化学成分分：合成培养基半合成培养基(二)、培养基液体培养基按物理形态分：固体培养基半固体培养基、常用的固体培养基:琼脂固体培养基.②、微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落.基础培养基按培养基功能分：选择培养基鉴别培养基选择培养基加入青

3、霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:分离杂交瘤细胞3、培养基内所含的基本物质(1)、水(2)、碳源(3)、氮源(4)、无机盐(2)碳源可作为碳源的物质有:含碳无机物:、、含碳有机物：蛋白质脂肪酸返回不同微生物所利用的碳源不同异养型微生物的碳源为自养型微生物的碳源为碳酸盐碳酸氢盐二氧化碳糖类（主要

4、）含碳有机物（有机碳）含碳无机物（无机碳）(3)氮源可作为氮源的物质有:含氮无机物：、、、含氮有机物：蛋白胨牛肉膏尿素返回固氮微生物所利用的氮源是氮气氨气硝酸盐氨盐氮气(1)、pH值如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性(2)、特殊营养物质----?如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素(3)、氧气的含量如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件4、培养基内所需的其他条件练习生长因子无菌技术包括的四大方面1、对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。2、将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具

5、进行灭菌。3、为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。4、实验操作时应避免已经灭菌处理的饿材料用具与周围的物品相接触。返回(三)、无菌技术1、获得纯净培养物的关键:2、无菌技术包括的四大方面3、消毒与灭菌(1)消毒：概念：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。包括芽孢和孢子吗？方法:煮沸消毒法巴氏消毒法:如牛奶的消毒化学药剂消毒:酒精、氯气、石碳酸、煤酚皂溶液等紫外线消毒(不包括芽孢和孢子)防止外来杂菌的入侵（2）灭菌概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外

6、所有的微生物，包括芽孢和孢子。方法：a灼烧灭菌b干热灭菌c高压蒸汽灭菌灼烧灭菌微生物的接种工具(接种环、接种针)或其他金属用具直接在火焰的充分燃烧层灼烧注意适用范围干热灭菌160－170℃；1－2h能耐高温的需要保持干燥的物品(玻璃器皿)高压蒸汽灭菌100kPa121℃15-30min通常用于培养基的灭以手提式灭菌锅最为常用.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）

7、玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。思考:1)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2)消毒和灭菌有何不同？3)为什么消毒牛奶要用巴氏消毒法?4)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。①培养细菌用的培养基与培养皿②玻棒、试管、烧瓶和吸管③实验操作者的双手消毒灭菌条件温和强烈作用范围物体表面或内部一部分,不包括芽孢和孢子物体内外所有微生物,包括芽孢和

8、孢子无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。灭菌灭菌消毒营养成分不被破坏二、实验操作㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方物质牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水重量5g10g5g20g定溶至1000mL2.称量按比例称取各种物质。注意：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。3.溶化：4.灭菌：5.倒平板：㈠制备牛肉膏蛋白胨