血脂四项测定.ppt

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1、2021/8/181血脂四项的测定临床生物化学与分子生物学教研室临床生物化学及检验2021/8/182血浆中所含脂类统称为血脂，血脂含量可以反映体内脂类代谢的情况。检测血脂时，常在饭后12-14小时采血。我国血脂异常防治建议和美国国家胆固醇教育计划成人治疗计划Ⅲ（NCEP-ATPⅢ）都要求临床常规血脂测定中应至少测定TC、TG、HDL-C及LDL-C这四项。有条件的实验室可测定apoAI、apoB及Lp(a)。2021/8/183【目的要求】掌握：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的基本原理。熟悉：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的操作过

2、程。了解：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定对动脉粥样硬化、原发性高脂血症等疾病诊断的临床意义。2021/8/184实验原理---总胆固醇测定（胆固醇氧化酶-过氧化物酶法）胆固醇酯+H2O胆固醇+脂肪酸胆固醇+1/202+H2O△4-胆甾烯-3-酮+H2022H202+4-氨基安替比林+酚醌亚胺+4H2O胆固醇酯酶胆固醇氧化酶过氧化物酶样品中游离及脂化的胆固醇，经过上述反应产生醌亚胺，在505nm波长处测定其吸光度值，计算其含量。2021/8/185实验原理---HDL-C测定加入低密度脂蛋白胆固醇的抑制剂，将低密度和极低密度部分隐蔽起来，直接

3、测定高密度部分的胆固醇含量，显色反应原理同总胆固醇，在510nm波长处测定吸光度值，计算其含量。LDL-C能与磷钨酸-镁和聚乙二醇复合剂作用产生沉淀，用分散剂可使沉淀颗粒细小均一，在630nm处测定其吸光度值，计算其含量。实验原理---LDL-C测定2021/8/186实验原理---TG测定（甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法）2H202+EHSPT+4-AAP脂蛋白脂酶甘油激酶过氧化物酶甘油三酯+H2O甘油+脂肪酸甘油+ATP3-磷酸甘油+ADP3-磷酸甘油+O23-磷酸甘油氧化酶磷酸二羟丙酮+H202醌亚胺+4H2O2021/8/187主要试剂总胆固

4、醇测定试剂试剂1：Na2HPO4﹒12H2O、KH2PO4、苯酚、胆酸钠，NaN3；试剂2：MOPSO、NaOH、NaN3、MgCL2﹒6H2O、4-氨基安替比林、EDTA-Na2、BSA、CE、CO、POD、液体活性剂Ⅰ。TG测定试剂试剂1：PIPES、CAPOS、BSA、MgCl2、甘油激酶、3-磷酸甘油氧化酶、过氧化物酶、显色剂Ⅰ、显色剂Ⅱ、NaN3；试剂2：PIPES、CAPOS、BSA、GYK、4-APP、显色剂Ⅱ、NaN3。2021/8/188主要试剂、器材HDL-C测定试剂试剂1：磷酸盐缓冲剂、LDL-C抑制剂、DHBS；试剂2：胆固

5、醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-APP。LDL-C测定试剂试剂：磷钨酸、氢氧化钠。器材：分光光度计、半自动生化分析仪、恒温水浴箱、微量进样器、移液管等。待测标本：血清2021/8/1891、将试剂1与试剂2按1:1比例混匀为工作液。2、按表格加样。加入物（ml）空白管(B)标准管(S)测定管(U)血清--0.02标准液-0.02-蒸馏水0.02--工作液2.02.02.03、比色：混匀各管，置37℃水浴10min，用分光光度计比色，波长505nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。总胆固醇测定步骤2021/8/18101、将试

6、剂1与试剂2按10:1比例混匀为工作液。2、按表格加样。加入物（ml）空白管(B)标准管(S)测定管(U)血清--0.02标准液-0.02-蒸馏水0.02--工作液2.02.02.03、比色：混匀各管，置37℃水浴10min，用分光光度计比色，波长510nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。HDL-C测定步骤2021/8/18111、按表格加样。加入物空白管(B)标准管(S)测定管(U)血清（ul）--50标准液（ul）-50-蒸馏水（ul）50--工作液（ml）3.03.03.02、比色：混匀各管，室温放置3min，用分光光度计

7、比色，波长630nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。LDL-C测定步骤12TG测定步骤2021/8/18加入物（ml）空白管(B)标准管(S)测定管(U)试剂R10.80.80.8血清--0.01标准液-0.01-蒸馏水0.01--充分混匀，37℃水浴5min试剂R20.20.20.2充分混匀，37℃水浴5min1、按表格加样。2、上机，仪器设置：37℃，波长546nm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。2021/8/1813计算：按下列公式计算A测A标×C标C测=指标标准品浓度参考范围线性范围TC4.20mmol/L＜5.17

8、mmol/L0-20.69mmol/LHDL-C2.60mmol/L0.7-2.00mmol/L0.65-2.6mmol/