GB13092-1991饲料中霉菌的检验方法.pdf

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1、免费标准下载网(www.freebz.net)中华人民共和国国家标准饲料中霉菌检验方法GB13092一91MethodfordeterminationofMoldsinfeeds，主肠内容与适用范围本标准规定了饲料中霉菌的检验方法。本标准适用于饲料中霉菌的检验。2原理根据霉菌生理特性，选择适宜于霉菌生长而不适宜于细菌生长的培养基，采用平皿计数方法，测定霉菌数。3设备及材料3.1天平:感量1g,最大秤量1000g,3.2显微镜:150OX。3.3温箱:25一28士1'C。3.4冰箱:普通冰箱。3.5高压灭菌器:2.5kg.3.6干燥箱:50^-250士I'Ca17水浴锅:45

2、-77士10C。I8振荡器:往复式。3.9微型混合器:2900r/min,3.10电炉。3.11酒精灯。112接种棒:镍铬丝。3.13温度计:100士I'C。114载玻片。115盖玻片。3.16乳钵。117试管架。118玻璃三角瓶:250,500mI。119试管:15X150mmo3.20平皿:直径9Cm,3.21吸管:1,10mL,3.22玻珠:直径5mm.国家技术监督局1991一07一16批准1992一04一01实施免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)GB13092一913.23广口瓶:100,50

3、0ML,3.24金属勺、刀等。3.25橡皮乳头。4培养基和稀释液41高盐察氏培养基。42稀释液。43试验室常用消毒药品。5检验程序霉菌检验程序如下:6操作步骤6.1采样采样时必须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好灭菌容器和采样工具，如灭菌牛皮纸袋或广口瓶，金属勺和刀，在卫生学调查基础上，采取有代表性的样品，样品采集后应尽快检验，免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)GB13092一91否则应将样品放在低温干燥处。根据饲料仓库、饲料垛的大小和类型，分层定点采样，一般可分三层五点或分层随机采样

4、，不同点的样品，充分混合后，取500g左右送检，小量存贮的饲料可使用金属小勺采取上、中、下各部位的样品混合。海运进口饲料采样:每一船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品，每层从五点取样混合，如船仓盛饲料超过10000t,则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。6.2以无菌操作称取样品25g(或25mL)，放入含有225mL灭菌稀释液的玻塞三角瓶中，置振荡器上，振摇30min，即为1:10的稀释液。6.3用灭菌吸管吸取1:10稀释液10mL，注入带玻璃珠的试管中，置微型混合器上混合3min，或注入试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次，使霉菌抱子分散开。6

5、.4取1mL1:10稀释液，注入含有9mL灭菌稀释液试管中，另换一支吸管吹吸5次，此液为1:100稀释液。6.5按上述操作顺序作1。倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸管，根据对样品污染情况的估计，选择三个合适稀释度，分别在作10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度作两个平皿，然后将凉至45℃左右的高盐察氏培养基注入平皿中，充分混合，待琼脂授固后，倒置于25--28士I'C温箱中，培养3d后开始观察，应培养观察一周。6.6计算方法通常选择菌落数在30^-100个之间的平皿进行计数，同稀释度的2个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克(或每毫升)检

6、样中所含霉菌数。6.7报告每克(或每毫升)饲料中含霉菌数以个/9(个/mL)表示。免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)GB13092一91附录A培养墓和稀释液制备(补充件)除特殊规定外，本标准所用化学试剂为分析纯或化学纯;生物制剂为细菌培养用;水为蒸馏水。A1高盐察氏培养基Al.1成分硝酸钠(GB636)2g磷酸二氢钾(GB1274)1g硫酸镁(MgS04-7H20,GB671)0.5g氯化钾(GB646)0.5g硫酸亚铁(GB664)0.01g氯化钠(GB1266)60g蔗糖(HG3-1001)30g

7、琼脂20g蒸馏水1000mLA1.2制法加热溶解，分装后，115℃高压灭菌30min。必要时，可酌量增加琼脂。A2稀释液A2.1成分氯化钠(GB1266)蒸馏水，。0080.m5LgA2.2制法加热溶解，分装后，121℃高压灭菌30min,附加说明:本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出。本标准由中国兽药监察所负责起草。本标准主要起草人李公品、杨玮云。免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载