武育粳3号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究

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硕士学位论文武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究吴昊指导教师王才林研究员专业名称作物研究方向水稻遗传育种答辩日期二一三年六月 TheImprovementofWuyujing3intheResistancetoStripeDiseaseandEatingQualityByWuHaoAThesisSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInpartialFulfillmentoftheRequirementsforMaster'sDegreeSupervisedByProf.WangCailiniDepartmentofCropScienceNanjingAgriculturalUniversityNanjing210095, 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名：年((月日学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用、学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。请在以上方框内打“々”)学位论文作者(需亲笔)签名：▲年月日导师(需亲笔)签名年月( 目录目录翻：：賦跳水稻条纹叶枯病的研究进展水稻条纹叶枯病的概述水稻条纹叶枯病的发病症状水稻条纹叶枯病病理学研究现状水稻条纹叶枯病的防治水稻条纹叶枯病抗性的评价标准水稻条纹叶枯病抗性的遗传研究水稻蒸煮食味品质育研究邊雇水稻蒸煮食味品质的概述、稻米品质评价体系‘影响稻米蒸煮食味品质的因素稻米蒸煮食味品质的遗传研究进展分子标记辅助选择研究进展分子标记的概念及特点分子标记的种类分子标记辅助选择技术及其优越性‘分子标记辅助选择技术在水稻品种改良上的应用分子标记辅助选择技术对条纹叶枯病抗性的改良：分子标记辅助选择技术对食味品质的改良多个性状基因的聚合本研究的目的及意义；材料与方法供试材料受体亲本供体亲本 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究抗性改良系技术路线分子标记辅助选择的提取扩增电泳及结果观察改良系条纹叶枯病的田间抗性鉴定方法改良系农艺性状的比较方法改良系品质性状的比较方法改良系食味品质的评比鉴定方法主要仪器结果与分析条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的转育条纹叶枯病的抗性鉴定改良系的农艺性状分析改良系产量及穗部相关农艺性状较改良系播抽天数和株高的分析改良系产量的多点鉴定综合农艺性状的聚类分析改良系的品质性状分析碾磨品质和外观品质的分析蒸煮品质和食味品质的分析综合品质性状的聚类分析食味品质感官评价鉴定结果全文讨论与总结全文讨论分子标记辅助选择的优势及其影响因素抗虫育种与抗病育种的选择黑条矮缩病对条纹叶枯病的影响粳稻食味品质的影响因素及其评价方法全文总结雜 摘要武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究摘要稻条纹叶枯病(是发生在东亚温带和亚热带地区的严重影响水稻生产的病毒病。该病的传毒媒介为灰飞而生产上利用栽培措施、化学防治等措施对根治灰飞氣存在一定的困难。所以,选育抗病品种是控制水稻条纹叶枯病最经济、有效的方法。另一方面,稻米胚孔中的直链淀粉含量是影响食味品质的主要因素之一,但是通过传统育种方法不能高效、准确的对其进行筛选。因此,通过分子标记辅助选择技术选育抗条纹叶枯病和轩粒低直链淀粉含量的水稻品种具有多方面的优势和利用价值。,武育粳号是江苏“老秀才”品种,它是江苏武进稻麦育种场利用“上中丹号扬粳号中丹号”复合杂交育成的迟熟中粳稻品种,年通过江苏省审定。从年至年累计栽种面积在万亩以上,是江苏省沿海地区南部、沿江和江南偏北地区的主栽品种。但由于近年来江苏省条纹叶枯病的爆发,造成感病品种武育粳号的减产甚至绝收,限制了其进一步的推广应用。即便如此,由于其高产、稳产、等特点,仍受到农民的普遍欢迎。同时,虽然武育粳号本身具备较好的食味品质,但和近年来育成的以优良食味品质著称的南粳”、“南粳”和“南粳”等品种相比,其食味品质仍有差距,已不能满足现如今人们对稻米食味品质的更高要求。而且进一步提高武育粳号的食味品质能显著择升增强其市场竞争力,提高销售价格,从而提高农民收益。因此改良武育粳号的条纹叶枯病抗性及食味品质,对重新发挥该品种在生产、应用中的价值具有重要的意义。本研究以武育粳号为母本,关东作父本配制组合。通过杂交、回交等手段,借助与胜乳突变基因奶：啊共分离的功能标记以及与条纹七枯病抗性基因连锁的分子标记对两个基因同时选择,并结合田间抗性鉴定和农艺性状的选择,获得了个条纹叶枯病和食味品质改良的新品系。通过品系间的比较实验,对这些改良系的农艺性状、品质性状等进行考察分析,并从中筛选出综合性状与武育粳号相似甚至较优的品系。主要研究结果如下： 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究通过分子标记辅助选择并结合田间选择,筛选出个武育粳号改良系,分子标记检测的结果表明,这个改良系均含有条纹叶枯病抗性基因伽夕和含有暗胚乳突变基因奶的纯合基因型。通过田间抗性调查结果表明,个改良系条纹叶枯病的发病率均显著低于感病对照武育粳号,明显提高了改良系的条纹叶枯病抗性。对个改良系的农艺性状、品质性状、产量等进行品系比较试验的结果表明：改良系大多的性状与对照武育粳号较为相似,部分性状,如直链淀粉含量等显著低于对照。对个改良系的感官评价鉴定结果表明,其各评价指标(气味、外观、味道、口感、综合评价)均优于对照武育粳号,其中、、、、、、在各指标中均达到了显著或极显著水平。综合考虑,最终选出、、三个综合表现较好的改良系。关键词：水稻；条纹叶枯病；品质性状；、,分子标记辅助选择 ABSTRACTTHEIMPROVEMENTOFWUYUJING3INTHERESISTANCETOSTRIPEDISEASEANDEATINGQUALITYABSTRACTRicestripedisease(RSD)isaviraldiseasewhichseriouslyafectsthericeproductionoccurredintemperateandsubtropicalregionsinEastAsia.Thisviraldiseaseistransmittedbythesmallbrownplanthopper(LaodelphaxstriatellusFallen).Butitisnotafundermentalsolutionbycultivationmeasuresandchemicalcontrolmethodsonproduction.Sotheimprovementoftheresistanceofthecultivarsisconsideredtobethemosteconomicalandeffectivemethodofcontrollingthericestripedisease.Ontheotherhand,”,,“”,” 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究”,,,、、、、、, 文献综述—文献综述水稻条纹叶枯病的研究进展水稻条纹叶枯病的概述水稻条纹叶枯病(是一种严重影响水稻生产的病毒病,主要发生在东亚温带和亚热带地区,如中国、日本、朝鲜、乌克兰等国家。灰飞風为其主要的传毒媒介。条纹叶枯病最早发生于日本关东的枥木、群马等地区。在年之后的五年间,日本遭受该病危害的水稻田共计万公顷。年以后,水稻条纹叶枯病在日本全境水稻种植区大范围流行,成为危害其水稻生产的主要病害之一,。我国最早发生于年江苏的南部地区〗。之后几十年,水稻条纹叶枯病已扩及中国全境个省、市、自治区的广大稻区,其中江苏、山东、河南、北京、云地梗稻田发病更为普遍,严重的稻区甚至颗粒无在河南,年发生面积超万公顷；在浙江,年发病面积达万公顷。根据年的调查,并结合相关资料,我国水稻条纹叶枯病可划分为暴发区(江苏和河南)、常发区(云南、辽宁、北京、河北、天津、上海、山东)和偶发区(福建、浙江、四川、安徽、台湾、广东、广西、江西、湖北)。年代中后期、年代,在江苏南部、中部等地区曾一度流行’。年以后,该病在江苏逐年加重,并上升为当前水稻生产中的主要的病害。年至年,江苏全省发病面积均在万公顷以上,其中,年的发病面积达到全省水稻种植区的为万公顷至年己连续年在江苏全省范围内流行,严重危害江苏梗稻的生产,给农民造成严重的经济损失。水稻条纹叶枯病的发病症状水稻条纹叶枯病在苗期发病时,心叶基部出现褪绿黄、白色斑,后逐步扩散成与叶脉平行的黄色条纹,条纹间仍保持绿色。条纹叶枯病在不同水稻品种间症状表现不同,糯稻、梗稻和高秆籼稻感染病毒后呈现心叶黄白、柔软、卷曲下垂、枯心等症状：矮秆籼稻不呈枯心状,出现黄、绿相间条纹,分蘖大幅减少,造成病株提早枯死】。条纹叶枯病在分蘖期发病时,先在心叶下一叶基部出现褪绿黄斑,后扩展形成不 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究规则黄白色条斑,但老叶不显病。籼稻品种不枯心,糯稻品种半数表现枯心。病株常枯孕穗或穗小畸形不实。拔节后发病时,在剑叶下部出现黄绿色条纹,各类型稻均不枯心,但抽穗畸形,所以结实很少。圓睡图水条纹叶枯病的田间表现图水￥条纹叶枯病症状水稻条纹叶枯病病理学研究现状水稻条纹叶枯病的病原物水稻条纹病毒(,是引起水稻条纹叶枯病的主要病毒,该病毒为单链的病毒,属柔线病毒属(或称为纤细病毒属)病毒粒子为直径、长度不等的丝状体,多个丝状体能相互缠绕在一起。病毒粒子分散于细胞质、液泡和细胞核内,或呈颗粒状、砂状等不定形集块,即内含体】。水稻条纹病毒作为纤细病毒属的模式种,近年来人们对其作了较为全面的研究,包括病毒的基因组结构、功能、复制、转录、表达策略和病毒分子变异等。粒体由种和单一的外壳蛋白组成,全基因组序列长,目前个不同的组分的编码、表达策略及其功能逐渐被阐明。其中采用负链编码策略,编码病毒的复制酶蛋白,、和则采用双义编码策略。病毒部分基因已经被克隆,如,外壳蛋白)基因、病害特异性蛋白)基因等。和大部分病毒一样,有着广泛的变异。不同地区病株上的分离物在致病性、核苷酸序列等方面存在着一定的差异等根据症状和经 文献综述卵传毒特性的差异报道了两个株系。此外,等根据症状分为卷叶型和展叶形株系以及根据症状与致病性分为黄化型(弱毒型)和白化型(强毒型)株系。等还根据不同分离物在病株内所产生的分子量的差异,将划分为鸿巢、、、、、等株系。病毒分子致病机理的研究对感染水稻条纹病毒病叶的亚细胞结构进行观察,结果表明,不同部位细胞的叶绿体都会受到破坏,并且这种现象及之后褪绿色斑的形成和淀粉粒在病叶叶绿体中的过量积累有一定关系,同时细胞病理上的变化也包括蛋白体的形成和出现。而且,编码的和编码的在病叶中的积累量与褪绿花叶症状的严重度密切相关,已经被证实这两种蛋白都是致病相关蛋白。因此,水稻条纹病毒对寄主的致病性表现在对叶绿素和寄主细胞结构上某种程度的破坏作用,即叶绿素被破坏是引起寄主病叶表现褪绿的主要原因。水稻条纹叶枯病的主要传毒介质‘水稻条纹叶枯病是一种虫传病,它依靠昆虫作为媒介进行传播。介体昆虫有灰飞風、白脊飞風、白带飞風等,其中灰飞風为其主要的传毒媒介。灰飞風的生物学特性灰飞風属于同翅目飞虱科。在我国,南自海南岛,北至黑龙江,东自台湾省和东部沿海各地,西至新疆均有发生,以长江中下游和华北地区发生较多。灰飞虱成虫有长、短两种翅型(图。长翅型体长毫米。前翅半透明,淡灰色,有翅斑。雌虫体黄褐色,雄虫黑褐色。雌虫小盾片中央淡黄色或黄褐色,两侧各有个半月形深黄色斑纹；腹部肥大。雄虫小盾片全为黑色；腹部较细瘦。短翅型成虫体长毫米,翅仅达腹部的其余与长翅型相同。卵：长约毫米,长卵圆形,弯曲。初产时乳白色,后渐变灰黄色,近孵化时一端出现对紫红色眼点。卵粒成簇或成双行排列,卵帽稍露出产卵痕,像一粒粒鱼籽状。若虫共龄。至龄若虫体呈现灰黄或黄褐色,腹部背面有灰色云状斑块。第、腹节背面各有对八字型浅色斑纹。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究暑」：、：、《’爲、、“⑶麵！舊图灰飞的两种形态灰飞風食性广且杂、具有很强的耐饥力和抗寒力。在南方稻区,若虫、成虫或卵过冬常栖息于麦田、绿肥田、田边杂草或再生稻上。灰飞風耐寒畏热,最适温度为°夏季高温对其极为不利。长翅型成虫具趋光性和趋嫩性。卵多产在寄主植物莲杆下部的叶鞘内,少数产在下部叶片中肋的组织内或莲腔中,在水稻抽穗后,也可产于穗轴腔内。成虫和若虫常栖息于稻株下部。长江中下游地区,灰飞風主要发生在初夏的、月份。冬小麦与单、双季稻混栽区,因寄主营养适宜,有利灰飞風的发生。过于偏重氮肥或施肥过迟,使水稻幼苗生长过分嫩绿,会引诱灰飞風成虫产卵,加重虫害。 文献综述灰飞風的传毒机制灰飞風对条纹叶枯病的传播属于持久性传毒,又称循回增殖型传毒。其传播特点是病毒可在虫体内转移、增殖,灰飞虱一旦带毒,便可以终生传毒。一代灰飞風带毒成虫是田间条纹叶枯病的最初来源,在江苏地区以第代灰飞虱发生量最大,最为整齐,也是条纹叶枯病的主要传播世代。病害在水稻大田的扩散主要由二代灰飞虱若虫和成虫进行传播,也可以经卵持久性传播。水稻三叶期至分蘖期是灰飞虱传播病毒的重要时期。此时期的水稻抗病能力弱,一旦感病,则极易发病。而且此时的灰飞風喜欢聚集,这两方面因素导致了病情的加重。灰飞虱侵染水稻时,成虫和若虫栖息于距水面处的莲轩上,用口针刺入植物组织中吸取汁液,破坏了水稻的疏导组织,使其不能正常运输养分。同时,雌虫将卵产于水稻组织内,因而影响植株的正常生长和发育,造成蓬秆细弱,植株矮小,逐渐枯萎死亡。水稻条纹叶枯病的防治■通过栽培措施来控制病害、‘；这种方法主要是通过合理的栽培措施,正确的水肥管理等来达到防治的目的。主要为改善栽培措施,合理使用、、肥,以及使用适量的生长调节剂,通过增强水稻植株的自身的抗逆性来防治条纹叶枯病,而且要适当调整播期,可以在时间上错开灰飞風发生的高峰。通过化学防治来控制介体灰飞虱化学防治是指在病毒侵染水稻植株前后,利用化学药剂杀死传毒媒介、抑制病毒的侵染或增强植株抗逆性的方法来防治条纹叶枯病。目前使用的杀虫剂主要有针对灰飞風若虫的比虫啉,针对灰飞虱成虫的锐劲持等。但使用杀虫剂也存在很多弊端,如成本较高；极易造成环境污染；在杀死灰飞風的同时也会对其天敌造成影响；在灰飞風产生抗药性后杀虫效果会显著下降等。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究运用生物防治手段控制病害生物防治是利用传毒媒介灰飞風的天敌来抑制灰飞風的数量,通过减少传播媒介的方法来防止水稻条纹叶枯病。生物界中存在许多以灰飞虱为食的益虫,如蛛、褐腰赤眼蜂、稻風缀小蜂、黑肩绿盲赌等。但是,该方法只有在这些益虫达到一定的数量的情况下才会起到明显的效果。运用抗病育种来控制病害抗病品种是指对水稻条纹叶枯病具有一定抗性的优良品种。它是在同样的发病条件下,能通过抵抗病毒的侵害、侵染后能耐受病害或发病后能有一定恢复能力的品种。抗病植株可以将抗性基因遗传给后代,在相当长的一段时间内都具有抗病的效果。这种方法是目前针对条纹叶枯病最经济、有效的防治方法。水稻条纹叶枯病抗性的评价标准■、‘▽丨等将发病植株的症状做出了比较详细和全面的描述,他们按病情指数作为标准将品种抗性分为级：抗(,病情指数在之间’中抗,病情指数在之间；感(,病情指数在高感(,病情指数在之间。鉴定单株抗性鉴定标准见表。表稻幼苗表型鉴定症状分级标准症状长势很差,病叶整片或部分萎蔫,叶片卷曲、枯心、枯死长势很差,病叶不萎蔫,下部叶片的黄叶病斑连续、随机分布,上部■叶片有褪绿症状症状与相似,但长势较差长势较弱,病叶略卷曲。病部略黄,呈零星点状或条纹状。发病与健康交界处明显清晰长势略弱,零星点状略黄,发病、健康部有间隔长势很好,病斑随苗的生长而消失将各株系秧苗按表症状描述分级,统计各株系中、、、、和各级的株数,按下面的公式计算各株系病情指数比率(公式中、、、、和分别为各级症状的株数)。 文献综述病情指数被测总苗数除此之外,根据《中华人民共和国农业行业标准水稻品种条纹叶枯病鉴定技术规范》对条纹叶枯病病害的分级调查标准及抗性评价标准的规定：调查病株数目时,级级直接记为病株；级在天后苒次调查确认,若表现出级及更高级别症状,则记为病株,否则记为不发病级记为不发病。根据发病率对其进行抗性评价：发病率为,为免疫(品种；发病率在,为高抗品种；发病率为,为抗病品种；发病率在,为中感(品种,发病率在为感病品种；发病率大于,’为高感品种。’表病害调査分级标准症状、无症状‘级有轻微黄绿色斑驳症状,病叶不卷曲,植株生、长正席,病叶上輝绿扩展相连成不规则黄白色或黄绿色条斑,病叶不着曲或略有卷曲,生长基本正常级病叶严重褪绿,病叶卷曲呈擒转状,少数病叶出现黄化枯姜症状级大部分病叶卷曲呈抢转状,叶片黄化枯死,植株呈假枯心状或整株枯死两种病害调查分级标准对症状的描述基本类似,但在适用性上略有不同。表主要是对水稻幼苗感染条纹病毒后的症状进行描述,同时根据其级别计算病情指数比率；表是对水稻莲、叶进行发病调查,然后计算发病率,并根据结果判断为何种抗性水稻品种。水稻条纹叶枯病抗性的遗传研究水稻条纹叶枯病的抗源蹄选与利用世纪年代,日本水稻育种家开始着手水稻条纹叶枯病抗性基因资源筛选和育种工作,并且发现籼稻品种中存在着丰富的抗性资源,而粳稻相对感病。年,等通过对份不同类型水稻品种抗性研究后认为,大部分粳稻品种 ‘武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究感病,而一些秈稻、爪哇稻和粳型陆稻具有抗病性,并蹄选出、等一批抗性品种。之后利用抗源,培育两个抗性品系,进而衍生出了一大批抗病品种。为了挖掘新抗源,避免遗传脆弱性,日本学者对一些品种进行了遗传分析,发现对条纹叶枯病的抗性来源于籼稻品种。这些抗病品种的育成和推广在一定程度上抑制了水稻条纹叶枯病的流行。年,中国也开始了这方面的研究工作,邢祖顾等在北京双桥进行了多年的条纹叶枯病抗性资源筛选和品种选育。结果表明：相比粳稻,秈稻具有较强的抗性,而粳粳交后代要比籼粳稻和水陆稻杂交的后代抗病性弱；同时也鉴定出一批抗性品种。潘学彪等分析在年后育成的江苏推广的抗条纹叶枯病品种,其抗源分为两部分,一部分是镇稻、镇稻和徐稻号其抗性基因最初来自于巴基斯坦籼稻品种另一部分淮稻号、泗稻号、盐梗号和扬粳抗性基因最初来自于籼稻品种。水稻条纹叶枯病的抗性遗传方式和基因定位、迄今为止,已阐明两类主要的病毒抗性的遗传机制。一类以日本陆稻品种为代表,、抗性由两对显性互补基因和共同控制；另一类以一些籼稻品种为代表,抗性由一对不完全显性基因控制,,。从目前国内外育成的梗稻品种的系谱来看,其抗性基因最初来源于两个釉稻品种和,进一步研究证实了这两个抗性品种的抗性基因均为、随着分子标记技术的发展,借助己经被阐明的水稻条纹叶枯病的抗性遗传方式,定位抗性相关,解析单一位点的抗性效应成为了可能。等,将的抗性基因定位在第染色体上,位于标记与之间的一段仅的区段,与标记紧密连锁,重组值为。并构建了伽力‘基因位点的精细物理图谱,横跨与标记间的区段,由个克隆组成,通过分析表明位于两个重叠克隆大约的区域内。等利用密阳秋光的重组自交系群体检测到在第染色体上标记之间的标记附近存在抗条纹叶枯病的,贡献率达其抗性基因效应来自密阳。丁秀兰等利用皿和的重组自交系群体进行基因定位,在第、、染色体上各检测到了个抗条纹叶枯病的。其中来自抗性亲本的,贡献率高达,并位于标记之间。同时,利用 文献综述回交重组自交系群体,采用强迫饲毒和田间鉴定的方法,发现位于第染色体标记区间的等位基因在不同环境条件下能稳定表达,对抗性基因的表达稳定性做了深入研究。孙黨珍等,利用群体和群体在第染色体上分别检测到个和个与条纹叶枯病抗性有关的利用群体在第染色体上检测到个与条纹叶枯病抗性相关的。等利用群体在第染色体标记区间检测到一个抗性该为控制灰飞風抗性的。等在一个携带稻癌病抗性基因的籼梗交后代中又定位到一个新的抗性基因。该基因与不连锁。等利用群体检测到的抗条纹叶枯病和分别为与第和染色体上郑文静等鉴定了亲本及个杂交后代家系对水稻条纹叶枯病的抗性,在第、、及第染色体上共检测到个分别为、、、和,各的值在之间,贡献率为°卩。比较分析发现,识已经定位的伽他置相近,而识人是另一效的新的抗病位点。、,,■、,),目前,已经定位的稻条纹叶枯病抗性相关的有多个,他们分士于第、、、、、、、、等条染色体(表。有些是增强水稻对条纹叶枯病病毒的抗性,有些是增强对传毒媒介的抗性。然而这些中能实际用于生产的却很少,目前国内外生产上应用的条纹叶枯病抗性品种大多是利用来自籼稻的基因。该基因已经稳定用于生产长达几十年,在长期单一的选择下,水稻条纹病毒会发生变异,产生对其的抗性,从而可能会导致水稻条纹叶枯病的爆发。因此,培育抗水稻条纹叶枯病的品种更不能只单纯依靠一个基因,应该挖掘和利用其它新的有效的抗性基因位点,并将其运用于实际生产中,才能达到长期稳定防治条纹叶枯病的目的。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究表目前已报道的与水稻抗性基因位点连锁的分子标记截至年)染色体基因连锁标记定位群体丁秀兰等孙黛珍等窄叶青号武育粳号孙黛珍等郑文静等等郑文静等热研号李余生等台中台中孙黛珍等孙黛珍等孙黛珍等孙黛珍等郑文静等、、、郑文静等孙黛珍等窄叶青号武育粳号丨‘孙黨珍等丁秀兰等孙黨珍等窄叶青号武育粳号孙黨珍等孙黨珍等孙黨珍等孙黨珍等丁秀兰等孙黛珍等孙黛珍等孙黛珍等孙黨珍等〗吴书俊等￥吴书俊等热研号李余生等郑文静等 文献综述水稻蒸煮食味品质育种研究进展水稻蒸煮食味品质的概述年后,我国粮食的直接消费量随着人民生活水平的提高呈下降趋势,居民粮食消费结构发生了巨大变化。因此,品质改良已成为提升稻米市场竞争力提升的核心。然而,目前我国水稻种植结构仍不合理。据报道,年生产上大面积应用的水稻品种中,主要米质指标达部颁二级优质米标准的早秈稻和一级优质米标准的中、晚稻品种(组合)仅占左右。因此,进一步改善稻米品质,加速稻米优质化进程,是水稻品质育种面临的最紧迫任务之一。稻米品质是受基因型和环境因素共同影响的一个综合性状。因为所有米质研究的都是为了使稻米“好吃”,所以食味品质必然是研究的核心。但目前研究中最薄弱的环节恰恰是对食味品质的研究,主要因为食味品质的评价在具体操作上存在很大的变数,作为评价的主体,人们性别、年龄、工作、饮食习惯等许多因素的不同,都会导致对稻米食味(味道、、口感、回生度等)的评价不同。常常会出现稻米理化旨标接近,而食味品质大不相同的、况。、而蒸煮品质指稻米在蒸煮过程中表现出来的特性,评价指标有蛋白种类和含量、表观直链淀粉含量、糊化温度、胶稠度、米粒伸长性、稻米淀粉粘滞性(谱值、脂肪含量等。食味指人们吃饭时米饭给人的综合感觉,评价指标有气味、外观。味道、口感、回生度、适口性(综合评价)等。二者合称蒸煮食味品质。自世纪年代起,美国、日本、澳大利亚等发达国家就开始对稻米品质进行研究,己在遗传、栽培及环境、生理生化、藏加工等方面取得了巨大的进展。目前正在水稻淀粉酶活性、直链淀粉、蛋白质等物质的分子结构与品质的关系、功能基因的导入与表达、谷蛋白突变体与功能性水稻品种幵发等方面进行更加深入的研究。近年来,我国的优质水稻品种选育得到了很大的发展,育出了一批米质较优的品种,同时对影响稻米品质的遗传和非遗传因素作了较为深入的研究。不过,在现有栽培品种中,完全符合国家优质米标准的品种还很少,同时和常规品种相比,具有优良食味品质的品种在产量、抗性等性状上仍有较大的差距。因此,进行稻米品质的深入研究对促进我国水稻生产的发展、提高稻米在国际上的竞争力具有十分重要的意义。 武育梗号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究稻米品质评价体系稻米品质改善是发展稻米经济的基础,是稻米作为商品在消费过程中所必需具备的特性。稻米品质的形成是品种的遗传特性和环境条件综合作用的结果。其评价指标主要有：加工品质、外观品质、蒸煮食味品质和营养品质。加工品质稻米加工品质指稻谷在；砻谷出糖、碾米出精等加工过程中所表现的特性。主要指标有出糖率、精米率和整精米率。整精米率是稻米品质中较为重要的一个指标,整精米率越高,相对碎米的产生就较少,同样数量的稻米能碾出较多的整精米,因而具有较高的商品价值。整精米率主要受稻米品种遗传基因的控制,同时环境因素、加工设备和储藏条件等都影响着整精米率的高低。外观品质稻米的外观品质包括长宽比、垩白率、垩白度和透明度等指标。其中对于聖白度‘‘的评价是主要指标。垩白是稻米胚乳中组织疏松而形成的白色不透明的部分,包括腹白、心白和背白。一般认为垩白是由于胚乳淀粉体及蛋白质颗粒积累不够密实所导致的。关于里白度的测量目前还没有客观、准确的方法,只能通过目测来估算,在不同研究者的成果之间缺乏统一的衡量标准。垩白度受环境影响大,特别是易受灌衆期间温度的影响。稻米的垩白虽然与食味没有直接关系,但它影响米的外观,还容易使稻谷在碾磨过程中产生碎米,因而特别受到育种工作者的重视。蒸煮食味品质主要包括直链淀粉含量、胶稠度和糊化温度等。其中直链淀粉含量是最重要的指标之一。直链淀粉含量大于时,为高含量稻米,在时,为中等含量稻米,在时,为低含量福米,小于时,为极低含量稻米。直链淀粉含量高,米饭蒸煮后粘性小,质地硬,食味差；含量过低,则米饭豁而腻,弹性较差。因此,人们大多偏爱中等直链淀粉含量的稻米。胶稠度是指米胶的长度,分为软(、中(、硬(。一般胶稠度为软中型的食味较好(中华人民共和国农业部标准,优质稻谷,。糊化(指淀粉与水共热 文献综述后,在一定条件下变成半透明状胶体的现象。淀粉乳受热后,在一定温度范围内,定粉粒开头破坏,晶体结构消失,体积膨大,粘度急剧上升,呈粘稠的糊状,即成为非结晶性的淀粉。各种淀粉的糊化温度随原料种类、淀粉粒大小等的不同而异。常用碱消值或碱解值的大小来衡量。碱消值是将粳米放入氧氧化钾溶液中,于一定温度消解一定时间后管产米粒消解的程度。碱消值通常与糊化温度有如下对应关系：碱消值级(糊化温度〉°为高,级(°°为中,级(°为低。(中华人民共和国国家标准,米质测定方法,影响稻米蒸煮食味品质的因素蛋白质稻米中的蛋白质含量约为可分为部分,即作为藏物质的蛋白体、细胞膜等胚乳组织的构造成分,和不完全属于前二者的中间物质】。并主要以球型和无规则晶体型两种蛋白体形式存在,根据其溶解性的不同分为种类型：谷蛋白(,轉蛋白(,白蛋白(和醇溶性蛋白(。通常认为米蒸煮食味品质和蛋白质含量呈负相关关系,具有较低蛋白质含量的稻米蒸煮食味品质较优。丨‘淀粉淀粉是稻米胚乳的主要成分,在含水量的糖米中约为,精米中占,因此、莫惠栋等众多学者认为淀粉的组成和结构决定了稻米的食用品质。稻米中的淀粉主要是由直链淀粉、支链淀粉,和分子量介于支链淀粉和直链淀粉之间、分支较少、链长较长的中间级分组成直链淀粉是葡萄糖基以,糖苷键连接的多糖链,分子中有个左右葡萄糖基,分子量,聚合度,空间构象卷曲成螺旋形,每一回转为个葡萄糖基。支链淀粉分子中除有,糖昔键的糖链外,还有糖苦键连接的分支,分子中含个葡萄糖基,分子量大于聚合度,各分支也都是卷曲成螺旋形。直链淀粉和支链淀粉的比例以及支链淀粉的空间结构对稻米蒸煮及食味品质的影响很大,。通常认为,直链淀粉含量是决定米饭质地的主要因素之一,与硬度呈负相关关系。■‘ 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究直链淀粉含量低的稻米品种,其米饭质地较软。但是直链淀粉含量相近的品种可能会出现米饭质地相差很大的情况。这是因为米饭的质地还与不同的淀粉链长分布有关,一般淀粉的长链不管是来自直链淀粉、支链淀粉还是中间型越长、越多,米饭质地越硬、越干丨,。月旨类稻米中的脂类含量受品种、环境温度、加工条件等因素的影响,不同来源的稻米淀粉中脂类的含量相差较大。丁文平等、等研究发现,直链淀粉含量越低,淀粉中脂类的质量分数也越低。脂肪主要供给热能,其主要成分是脂肪酸。不饱和脂肪酸在大米中含量较高,因此,具有较快的氧化速度,会加速稻谷和大米的陈化,降低稻米品质,使其丧失发芽率。尽管稻米中脂类含量较低,但多为优质不饱和脂肪酸,是稻米中重要的营养成分,同时对于食味品质也有一定的影响。同时,脂类含量越高的稻米,米饭光泽越好稻米蒸煮食味品质的遗传研究进展低直链淀粉含量基因的鉴定曰本在年开始利用物理、化学等方法对水稻种子进行处理,以此来有目的、大批量地蹄选胚乳突变体,从而得到了多个直链淀粉含量较低的突变体。而且还发现,一些直链淀粉含量较低的突变体其外观也发生了明显变化,呈半透明或不透明状。同时,综合目前已报道的低直链淀粉含量水稻突变体,可将其基因分为与『等位和非等位两大类。其中,、、奶￡°〃等属于与奶等位的低直链淀粉含量基因,糯稻中主要是奶籼稻中主要是,粳稻中主要是而、等属于与『非等位的基因,。以甲基亚硝基脲(对越光的受精卵进行处理而获得的低直链淀粉含量突变体“”,直链淀粉含量为,用其分别与越光和糯稻品种杂交,发现与越光杂交的种子中高直链淀粉含量与低直链淀粉含量的性状分离比均为而与糯稻杂交的中只出现低直链淀粉含量及糯性籽粒,表明的低直链淀粉含量由个奶等位基因控制,并命名为 文献综述低直链淀粉含量基因的定位与克隆随着分子生物技术的发展,一些与品质性状相关的基因或已被定位或克隆。包劲松等利用籼梗杂交群体对影响淀粉特性的个遗传因子进行了定位,分布在第、、、、、、、染色体上,每个性状所定位的在到个不等。其中在第染色体上的基因、汰基因是主效,其他都是微效基因。何平等在第染色体基因检测到一个控制直链淀粉含量的主效同时在第染色体上检测到个微效。等釆用方法克隆了越光突变体中的低直链淀粉基因’获得了个接近全长的发现在编码区发生了两个碱基的替换,进而造成其直链淀粉含量下降。迄今已报道了个低直链淀粉含量的水稻突变基因(表表目前己报道的低直链淀粉含量的突变基因截至年)突变体名称直链淀粉含量基因名称染色体突变方式自然突变。,厂■！云南软米野生稻自然突变：甲基磺酸乙醋；甲基亚确基脲；：乙稀亚胺分子标记辅助选择研究进展分子标记的概念及特点在遗传学的发展中,先后出现了形态标记、细胞标记、生化标记和分子标记。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究前种标记是对基因的间接反映,有一定的缺陷,如标记数目有限、多态性差,易受环境条件影响等。而分子标记是在水平上检测生物间的差异并直接反应其遗传变异。它是以蛋白质、核酸的分子突变为基础,检测生物的遗传结构和变异相对于其他三类分子标记,分子标记具有准确性高、数量丰富、多态性高、共显性好、检测简便、对表型无影响等特点。分子标记的种类分子标记根据其原理的不同可分为类。第一类是基于技术的分子标记,如随机扩增多态性)、简单重复序列)等；第二类是基于限制酶切和技术的标记,如,酶切扩增多态性序列)、扩增片段长度多态性)等；第三类是基于芯片技术的分子标记,如,单核苷酸多态性)。”表主要分子标记的类特点标记名称限制性酶切随机特异限制性酶切杂交扩增扩增扩增产物核心技术电泳分子杂交,电泳、电泳、探针引物特定序列重复序列探针特异来源探针随机引物设计引物序列等…引物检测某因难个整个单低拷贝区重复序列单拷贝区整个基因组巾组区域基因组基因组基因组丰富度中等很闻闻中等尚局遗传特性共显性显性共显性显性共显性显性显性高中中高很高高要求多态性水平中较高高中非常高中重演性高中高高高高放射性与同位通常用不用不用不用不用不用系用与开发成本高 文献综述分子标记辅助选择技术及其优越性分子标记辅助选择技术是将上述分子标记应用于作物育种或改良的一种手段其基本原理是利用与目标基因紧密连锁或共分离的分子标记对个体进行目标基因以及全基因组筛选,从而减少连锁累赘,得到期望的个体,达到提高育种效率的目的,。是传统育种技术和现代生物技术相结合的产物,在作物改良中有着重要的作用。的优越性可体现在以下几个方面：(可以在植物发育的任何阶段进行选择,对目标性状的选择不受基因表达和环境的影响；(纯合体和杂合体可利用共显性标记区分,能快速准确地在分离世代鉴定植株的基因型；(可有效的对利用表型鉴定比较困难的性状进行基因型鉴定；(可聚合多个有利基因提高育种效率；(克服不良性状连锁,有利于导入远缘优良基因。分子标记辅助选择技术在水稻品种改良上的应用分子标记辅助选择技术对纹叶枯病抗性的改良、‘‘广潘学彪等为了改良武育梗号的条绫叶枯病抗性,在连续回交和自交过程中,‘以紧密连锁的双侧分子标记对其进行选择,在短期内育成抗条纹叶枯病的“武陵粳号”,大幅度提高了其条纹叶枯病抗性水平。陈锋等利用与紧密连锁的分子标记进行辅助选择,结合条纹叶枯病田间抗性鉴定及农艺性状分析通过回交改良,获得携带的圣稻回交稳定品系、、等个。李波等利用与抗病基因、连锁的分子标记对武育粳号、武运粳号和武运梗号进行辅助选择,改良受体亲本的抗性,并选育对条纹叶枯病具有抗性的新品种。路名瑞等。以抗病品种关东为供体亲本,武运賴号为轮回受体亲本,釆用连续回交并结合分子标记辅助选择的方法,将抗条紋叶枯病基因转移到武运梗号中,育成抗条纹叶枯病的武运梗号改良系。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究分子标记辅助选择技术对食味品质的改良刘巧泉等经过回交转育并结合分子标记辅助技术向特青品种导入基因,在保持原有亲本主要农艺性状的前提下选育了个优质品系。改良品系胚乳中基因表达量较改良前明显下降,直链淀粉含量大幅减少。周蛇锋等以具有中等直链淀粉含量的保持系宜香为基因供体,协青早为基因受体,通过杂交、回交和自交,并在分离早世代结合特异性分子标记对直链淀粉含量进行检测和蹄选,最终选育出具中等直链淀粉含量的籼型三系不育系浙农。许勇等以分子标记辅助选择对协优的父、母本的基因进行改良。利用改良后的亲本进行配组,其后代杂交稻米的值降到中等偏低水平。■夏明元等。利用奶基因的标记对舟的杂交后代进行单株选择,在获得的个基因纯合的株系中选出了个产量较高且直链淀粉含量适中的品系。李浩杰等利用与基因紧密连锁的分子标记对的杂交后代进行目标基因型选择同时进行背景选择,回交代就选出具有中等直链粉含量且综合性状与轮回亲本相似的个体,明显提高了育种效率。、‘’多个性状基因的聚合基因聚合是将分散在不同品种中的有用基因聚合到同一基因组中,这些基因可以控制相同的性状也可控制不同的性状。在抗病育种中,针对同一性状进行不同生理小种垂直抗性基因的聚合,以达到延长品种使用寿命的目的。还有一种情况是同时转入针对不同病害的抗性基因,以达到一个品种能抵抗多种病害的目的。基因聚合突破了回交育种改良个别性状的局限,使品种在多个性状上同时得到改良,产生更具有实用价值的育种材料。桑茂鹏等通过有性杂交和田间选育,利用分子标记辅助选择技术,聚合抗白叶枯病基因和香味基因,获得了双基因纯合、高抗白叶枯病且具有浓郁香味的株系。何光明等通过回交转育和生物学鉴定,并结合分子标记辅助选择技术,将抗衰老基因、抗白叶枯病基因和抗稻瘟病基因聚合在植株中,获得了抗衰老、抗白叶枯病和抗稻瘟病病的杂交育种中间材料,可用于杂交稻育种。陈圣等利用分子标记辅助选择技术将高抗水稻白叶枯病的基因、广谱高 文献综述抗稻瘟病的基因、抗水稻螺虫和稻纵卷叶螟的价基因聚合到同一株系中,获得了与种基因抗性水平相当的纯合株系。姚姝等利用与水稻抗条纹叶枯病基因“共分离的标记以及暗胚乳突变基因共分离的标记对“武运梗号关东”杂交后代进行辅助选择,结合田间选育及抗性鉴定,成功选育到目标基因纯合、综合农艺性状优良的水稻新品系“宁”。本研究的目的及意义在江苏,由于武育粳号的高产、稳产等特点,而受到农民的普遍欢迎,但是由于近年来条纹叶枯病的爆发,造成感病品种武育粳号的减产甚至绝收,限制了其进一步推广应用。同时,随着生活水平的提高,武育粳号所具有的食味品质,已不能满足现如今人们对食味品质的更高要求,因此,进一步提高武育梗号的条纹叶枯病抗性和食味品质对该品种在市场上的推广、应用具有十分重要的意义。本研究以武育粳号为母本,以具有条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因奶的日本粳稻品种关东父本配制组合。通过杂交、回交等手段,借助与条纹叶枯病抗性基因连锁的分子标记和与暗胚乳突变基因共分离的功能、一标记对两个基因同时选择,以期改良受体亲本武育梗号条纹叶枯病的抗性和食味品‘质。 武育梗号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究‘‘ 材料与方法材料与方法供试材料受体亲本武育梗号(江苏武进稻麦育种场选育而成的迟熟中粳稻品种,年通过江苏省农作物品种审定委员会审定。由于该品种不抗条纹叶枯病且稻米外观品质差,限制了其进一步推广应用。中丹号—‘武育梗号中丹号扬粳号图武育梗号系谱、‘供体亲本、：关东中粳稻品种,由日本关东地区茨城县作物研究所育成,年在农林水产省登录,登录名为农林号。该品种高抗条纹叶枯病,食味品质优良,由于受地域、气候等环境因素制约,引种到江苏种植后,产量水平较低。其抗性基因来源于巴基斯坦品种。诱变暗胚乳突变越光鸿一关东农林号一二青空一天承图关东系谱注：加下划线的品种均含有抗条纹叶枯病基因 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究抗性改良系以关东为条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因『的供体,武育粳号为受体,通过连续回交、自交并结合分子标记辅助选择获得具有和纯合基因型且外观农艺性状与轮回亲本武育梗号基本一致的个株系。技术路线年夏(南京)武运梗号(？)关东年冬(海南)武运梗号年夏(南京)武运梗号分子标记辅助选择)年冬(海南)武运梗号分子标记辅助选择)‘‘年夏(南京)分子标记辅助选择)年冬(海南)分子标记辅助选择)年夏(南京)田间蹄选结合标记辅助选择获得个改良株系,由于当年高温,部分改良系和武育粳号结实差,在结实率高的个小区中选择个单株)丄年夏(南京)田间蹄选,选择个抗性优良的小区)年夏抗性、产量的品系比较试验)图武育粳号抗性和食味品质改良过程 材料与方法年正季在江苏省南京配制杂交組合“武育粳号关东”。同年冬季在海南种植,并以武育粳号为母本与回交,并于年夏在南京正季种植。从开始,利用与伽基因和基因紧密连锁的分子标记进行检测,从中选出携带这两种基因且与武育粳号较相似的单株做父本,与武育粳号进行连续回交,至代植株农艺性状与轮回亲本基本一致后开始连续自交并结合分子标记辅助选择,于年夏蹄选出基因纯合的株系,并于年夏进行抗性、产量的品系比较试验。具体技术路线如图。分子标记辅助选择的提取在水稻分蘖盛期,取新鲜嫩叶作为提取的材料。参照等提出的方法并进行了部分改动。、将约的水稻叶片折叠放于离心管中,放置于盛有液氮的容器、中冷冻后用磨样棒磨成粉末状；、‘■、加入经°预热的提取缓冲溶液,充分混勻后置于°°’‘水浴锅(或烘箱)中,每隔取出上下颠倒混匀一次；、水浴完毕后,在每个离心管中加入氯仿异戊醇(混合溶液,上下颠倒充分混勻；、将离心管放入离心机进行离心。离心、取上清液转移入离心管中；、向离心管中加入预先在下预冷的异丙醇,混勻后放入冰箱中,静置、取出离心管,进行离心。,离心、去除上清液,沉淀用的酒精洗漆次；、将离心管放入离心机进行离心。,离心、去除洗漆液,沉淀风干后溶于的灭菌双蒸水中,于保存备用。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究扩增对水稻条纹叶枯病抗性基因伽进行检测所使用的标记为,引物由上海英骏生物技术有限公司合成。其正向引物序列为’,反向引物序列为’。本实验反应参照等的方法,做了部分改动,为反应体系：模板弓物(禾口酶牡标记扩增程序如下：°下预变性、°变性。迫火°延伸循环步骤为次；。延伸；°延伸。对优良食味暗胚乳突变基因进行检测所使用的标记：正向外引物序列『《为,反向外引物序列奶：为’’,正向内引物序列奶胃为’’,反向内引物序列奶：叫为’’,反应体系同上,奶扩增程序如下：°下预变性‘°变性°退火°延伸循环(步骤为次； 材料与方法°延伸°延伸。电泳及结果观察洗净凝胶床和梳子,将凝胶床水平放置,插好梳子；称好所需浓度的琼脂糖,放入锥形瓶中,加入所需量的,放入微波炉中加热,中途需数次暂停加热,并摇晃锥形瓶,直至溶液澄清；溶液冷却至不烫手时加入少量,摇匀后倒入凝胶床,插上梳子,放置拔出梳子,在梳孔中点入样品,然后把胶放入电泳槽中,将电压调至,电泳时间为间；停止电泳,取出胶,在凝胶成像系统中拍照、观察。改良系条纹叶枯病的田间抗性鉴定方法年正季,在南京和盐都两个试点,釆间自然接种的方法对个改良系(编号为进行抗性鉴定。为保、证虫源衷足,育秧选择在小麦田边,‘并注意水肥管理,秧田期和移栽后不喷洒任何杀虫剂,以便使秧苗充分发病。感病对照为武育粳号。按病害发生的严重程度,根据“水稻条纹叶枯病抗性的评价标准”一节中介绍的方法进行各株系病情指数比率的计算。记录数据,级直接记为发病,、级记为不发病,并在天后再次调查确认,计算小区发病率。根据发病率进行抗性评价：免疫(,发病率为高抗(,发病率小于抗病(,发病率为中感(,发病率为感病(,发病率为；高感,发病率大于。改良系农艺性状的比较方法年正季在江苏省农业科学院溧水白马植物科学基地、泰州试验站对个改良系(编号为进行比较试验,以武育粳号为对照。其中溧水试点,重复次,每重复小区种植行,每行穴,每隔个小区设置一次对照(包括头、尾,共三个对照小区；泰州试点,同样重复次,每隔个小区设置一次对照,共两个对照小区。秧田期和移栽后注意防止灰飞虱。‘‘‘ 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究成熟后,从各试点每个株系重复小区中间的位置开始取样,连续取个单株,调查株高、穗数、穗长、穗颈长、每穗实粒数、每穗总粒数、结实率、千粒重、单株产量等农艺性状。取样后按小区收获种子,并测定每个小区的实际产量和含水量,并按粳稻标准水分对各株系进行产量折算。并采用软件对实验数据进行方差分析和多重比较,分析试点间及改良系与对照间的差异。以穗数、单株重、千粒重、结实率、每穗实粒数、抽穗天数、株高、穗长、穗颈长等农艺性状和产量为变量,采用最近邻居法(的聚类方法,以平方距离为区间度量标准,对个改良系和亲本武育粳号进行系统聚类分析进行相似性分类。改良系品质性状的比较方法对南京溧水和泰州姜堰两个试点的每个重复株系和对照进行糙米率、精米率、整精米率、长宽比、垩白粒率、垩白度、化温度、胶稠度、直链淀粉含量等品质相关,性状进行考察。、‘对各品质性状的考察标准及数据记录参照《稻谷》、《优质稻谷》、《粮油检验大米粘稠度的测定》、《米质测定方法》、《稻谷粘度测定快速粘度仪法》等国家标准、农业部标准和行业标准。同样对考察数据釆用软件对实验数据进行方差分析和多重比较,分析试点间及改良系与对照间的差异。以糙米率、精米率、整精米率、长宽比、垩白粒率、垩白度、糊化温度、胶稠度、直链淀粉含量为变量,采用最近邻居法(的聚类方法,以平方距离为区间度量标准,对个改良系和亲本武育粳号进行系统聚类分析和相似性分类。改良系食味品质的评比鉴定方法食味品质的评比鉴定方法釆用感官评价标准,参照梁乃亭等的样品的制备方法,米饭品尝顺序参照戴金平等。并按照《优质稻谷》附录《食味品质的实验方法》中提供的方法进行评定打分。品尝时设置武育粳号为对照,以此对品尝结果进行取舍和矫正。每次品尝份品种和份对照武育粳号。每次安排两次品尝,中间用温水漱口。品评时,趁热鉴 材料与方法定是否有香味或清香；然后对米饭外观情况进行观察；接着同构咀嚼鉴定样品的味道。口感；最后依据米饭的色香味及适口性总体情况给予综合评分。评分项目包括气味、外观、味道、口感、综合评分等指标分为极差、很差、较差、略差、对照、略好、较好、很好、极好个等级,分别记做、、、、、、、、分。采用直接法对品尝指标打分,利用统计分析软件计算统计参数,并进行食味指标的相关分析。主要仪器表分子检测及农艺性状和品质性状考察所需仪器仪器‘：实验室纯水处理系统南京前沿仪器设备有限公司型电热恒温水槽上海精宏实验设备有限公司型台式恒温振荡器荣华实验设备有限公司台式冷冻离心机德国海蒂诗公司、型电子天平、德国赛多利斯公司,微波炉、广东格兰仕有限公司二立式压力蒸汽灾菌器海串安医疗器械厂‘型实验室计上精密科学仪器有限公司微量台式离心机美国赛默飞世尔科技公司全自动雪花制冰机南京基天生物技术有限公司仪德国公司型稳压稳流电泳仪北京君意东方电泳设备有限公司型电泳槽德国赛多利斯公司凝胶成像系统英国公司型冰箱德国西门子公司型微电脑自动数粒仪浙江托普仪器有限公司型砻米机中国水稻研究所实验用精米机日本佐竹公司天平苏州赛恩斯仪器有限公司型旋风式粉碎磨,浙江托普伩器有限公司水浴恒温振荡器江苏金坛市环宇科学仪器厂生物分光光度计英国公司快速粘度分析仪上海恒浜科学仪器有限公司电脑谷物水分计三久技研股份有限公司三角牌电饭褒广州轻出集团有限公司 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究、、、‘‘— 结果与分析结果与分析条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的转育年夏,以高感条纹叶枯病的迟熟中粳水稻品种武育粳号为母本,与高抗条纹叶枯病且含暗胚乳突变基因的中熟粳稻品种关东杂交,获得杂种粒。同年冬季以武育粳号为母本代杂种植株为父本进行第一次回交,获得杂种。年夏,在南京对个单株进行条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的分子检测,其中个单株具有条纹叶枯病抗性基因个单株具有暗胚乳基因表。分别对结果进行卡平方(测验,符合理论比例。选择其中的个单株作父本分别与武育粳号进行第次回交,获得杂种。年冬,对个株系(每个系苗)的个单株进行条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的分子检测。个株系符合筛选目标的单株分别为株、株、株、株,共株,占总检测单株比例的。在个单株中,其中个株具有条纹叶枯病抗性基因、个单株具有￥胚乳基因表。分另丨对结果进行测验,符合理论比例。在十竿棟重选择综合农艺性状与武育粳号类似的个单株做父本,分别与武育粳号进行第次回交,获得杂种。年夏,对个株系(每个小区株)个单株进行条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的分子检测。个株系符合筛选目的的单株均为株,共株,占总检测单株比例的。在个单株中,其中个单株具有条纹叶枯病抗性基因个单株具有暗胚乳基因表。分别对结果进行测验,符合理论比例。在同时具有条纹叶枯病抗性基因和杂合暗胚乳基因的个单株中选择类似武育粳号的单株个到海南加代。表群体基因型检测结果、基因型群体 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究年冬,对个株系(每个小区株)个单株进行条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的分子检测,符合筛选目的的单株共株,占总检测单株比例的。在个单株中,个单株具有条纹叶枯病抗性基因、个单株具有暗胚乳基因表。分别对结果进行测验,符合理论比例。将个株系中收获同时具有纯合暗胚乳基因、条纹叶枯病抗性基因的单株个。年夏,在南京对个株系(每个小区株)进行条纹叶枯病抗性的田间鉴定,对其中抗性较好(发病率小于、农艺性状稳定的个优良株系进行条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的分子检测,这些株系每个单株均含有条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因奶。由于当年高温,部分改良系和对照武育粳号结实较差,所以在个结实略好的小区收获个结实好的单株继续种植。年夏,对个株系(每个小区株)进行条纹叶枯病和黑条矮缩病对照武育粳号发病重,高于的田间抗性鉴定,选择个农艺性状好的发病较轻(条纹发病率,黑条发病率低于的株系小区进行收获。并对这个改良系进行多年品种比较试验,对其抗性、主要农艺性状、品质性状进行测定,选出、综合抗性、产量和品质性状筛选出最优的株系。、表、、体基因型检测结果、‘基因型群体表各群体单株检测结果携带目的基因株数群体株系数检测株数理论比例、；； 结果与分析表各群体遗传分离比例的适合性测验显性组观察次数隐性组观察次数(群体理八信实际值(七」,、、图部分单株基因的分子检测注：；：关东：武育粳号、部分单株、：——图群体中部分单株汐基因的分子检测注：：；：关东武育粳号；：部分单株： 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究丨囑■■尊響,吁；；、,‘鶴缓■哪播纖三图部分单株基因的分子检测注：；关东：武育粳号；部分单株：：—图群体中部分单株基因的分子检测、注：；：关东武育粳号；部分单株、,：条纹叶枯病的抗性鉴定调查结果如表。溧水试点条纹叶枯病的发病率在,对照武育粳号的发病率为在盐都试点条纹叶枯病的发病率在,对照条纹叶枯病发病率为,均到达极显著水平。从两个试点来看,盐都试点的发病率普遍高于溧水试点,可能是由于在介体昆虫灰飞虱的虫量基数和带毒率等方面在两个试点间的差异而造成的。不过从图可以看出,各改良系之间发病趋势是相同的,即在南京试验点发病率高的株系在泰州发病率也高,在南京试验点发病率低的株系在泰州发病率同样也低。其中、、、在两试点间抗性表现均较好,低于 结果与分析表个改良系及武育粳号条纹叶枯病发病率的比较条纹叶枯病发病率株系武育粳号和分别表示在和水平上与武育粳号存在显著差异。■、‘、‘‘‘‘口南京‘「■盐都■■靈■■丨丨■丨武育粳号图个改良系在两个试点条纹叶枯病的发病率 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究改良系的农艺性状分析改良系产量及穗部相关农艺性状的比较调查溧水、姜堰两地个改良系及亲本对照武育粳号的产量性状(穗数、单株产量、千粒重、结实率、千粒重、每穗实粒数)及穗部农艺性状(穗长、穗颈长)并通过数据分析软件进行方差分析。由表可以看出,在试点间,除穗长外,各性状在试点间的差异均达到了极显著性水平,即环境因素对穗数等性状的影响较大。在株系间,性状均达到了极显著水平。表个改良系与武育粳号产量及穗部性状的方差分析值)变异来源自由度穗颈长单株产量千粒重结实率每穗实粒数拭点株系外试点株系表个改良系与武育粳号产量及穗部性状的比较穗颈长单株产量千粒重结实率每穗实粒数武育粳号和分别表示在和水平上与武育粳号存在显著差异。 结果与分析根据表在个改良系中,、在穗长、千粒重、结实率三个性状上与对照存在显著或极显著差异；、在穗长、穗颈长、结实率上与对照存在显著或极显著差异；在穗长,在穗数、单株产量上与对照有显著或极显著差异,、、这三个改良系与武育粳号农艺性状接近。综合来看,各改良系均有不同的性状相较于对照表现出显著或极显著水平,但千粒重较低。改良系播抽天数和株高的分析表个改良系与武育粳号播抽天数和株高的方差分析变异来源自由度播抽天数尸。°试点株系试点株系、表个改良株系和武育粳号在两地播抽天数和、高的比较；‘播抽天数株系平均值平均值武育粳号和分别表示在和水平上与武育粳号存在显著差异。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究从表中看出,个改良系和对照武育粳号在试点和株系上均存在显著或极显著的差异。根据表,泰州试点改良系的播抽天数普遍长于溧水试点,而株高普遍高于溧水试点。多重比较结果表明,播抽天数最长,与对照有显著差异,其余个改良系与对照差异不显著；而各改良系株高均高于武育粳号,其中改良系、、、、、、、差异极显著。改良系产量的多点鉴定成熟后对溧水和泰州的两个试点个改良系和对照武育粳号进行小区测产,并对结果进行显著性分析。由表知,改良系在溧水试点的平均产量介于公斤亩公斤亩之间,对照武育粳号的平均产量为公斤亩；改良系在泰州试点的平均产量介于公斤亩公斤亩之间,对照的产量为公斤亩。两地间小区平均产量差异性达到极显著水平,泰州试点小区产量明显高于溧水试点小区；在株系间,、达到显著水平,产量高于对照,其余改良系差异不显著,但平均产量也普遍高于对照,增幅明显。表个改良系与武肓粳号产量的方差分析、变异来源自由度平方和““试点株系试点株系 结果与分析表个改良株系和武育粳号产量的比较产量(吨公顷)株系武育粳号和分别表示在和水平上与武育粳号存在显著差异。综合农艺性状的聚类分析以部分农艺性状和产量为变量,以平方距离为度量标准,对个改良系及对照武育粳号进行系统聚类分析。其树状分析图如下,可知个改良系大致可分为类,、和武育粳号分为一类,说明、与对照武育粳号综合性状较为相似；第二类为、、其与对照存在一定程度上的差异；第三类由、、、、组成,这些株系的综合性状与对照差异较大。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究‘應」‘‘」图个改良株系和武育粳号农艺性状的聚类分析改良系的品质性状分析碾磨品质和外观品质的分析对个改良系和对照武育粳号的碾磨品质和外观品质进行方差分析,从表中可以看出,试点间糙米率、整精米率、长宽比、垩白粒率、垩白度均达到了显著或极显著水平,精米率与对照差异不显著；株系间垩白粒率达到了极显著水平,垩白度达到了显著水平,其余性状在株系间差异不显著。由表知,改良系与对照相比,在糙米率、精米率、整精米率、长宽比上差异不显著；改良系、、、、、、、、在垩白粒率上均低于对照,且差异极显著,、、 结果与分析、、在垩白度上同样低于对照,达到了显著或极显著水平。表个改良系与武育粳号碼磨品质和外观品质的方差分析变异来源自由度‘糙米率精米率整精米率““长宽比““垩白粒率垩白度试点株系；表个改良株系及武育粳号的碾磨品质和外观品质的比较出糙率精米率整精米率长宽比至白粒率“至白度料武育粳号和分别表示在和水平上与武育粳号存在显著差异。蒸煮品质和食味品质的分析根据软件对胶稠度、碱消值、直链淀粉含量进行分析的结果可知,在深水、泰州两试点间,三个性状的值均大于水平上的值,达到了极显著水平,说明环境因素是蒸煮品质和食味品质有显著性差异的主要影响因素；在各改良系间,胶稠度和碱消值均无显著差异,而直链淀粉含量达到了极显著差异,明显低于对照武育粳号,说明本研究成功的根据暗胚乳突变基因对各世代进行了分子选择,显著的降低了改良系的直链淀粉的含量。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究表个改良系与武育粳号蒸煮品质和食味品质方差分析变异来源自由度胶稠度碱消值直链淀粉含量°试点株系表个改良株系及武育粳号的蒸煮品质和食味品质的比较胶稠度(碱消值直链淀粉含量(％武育粳号和分别表示在和水平上与武育粳号存在显著差异。综合品质性状的聚类分析对个改良系和对照武育粳号进行聚类分析,以碾磨品质、外观品质、蒸煮品质和食味品质作为变量,采用平方距离为区间度量标准,进行系统聚类。从图可以看出,各改良系与对照武育粳号均有不同程度的差异,不能与其归为一类。这是由于本研究对武育粳号进行了品质性状的改良,使改良系的垩白粒率、垩白度、直链淀粉含量等品质性状与对照有较大程度差异,而糙米率、精米率、长宽比、胶稠度等性状与对照相似造成的,符合预期结果。在个改良系中,可分为类,对照武育粳号单独为一类；、、、、、为一类；、各为一类；、为一类。 结果与分析■———丨‘：咖—”’丨”■丨‘…丨丨‘—：‘：；：贿譲“图个改良株系和武育粳号品质性状的聚类分析食味品质感官评价鉴定结果稻米实际食味品尝指标分值的次数分布结果(图表显示,个品尝指标评分值均接近正态分布,说明本次评分基本达到了检测其食味品质的目的。其中气味的变幅最小,综合评分的变幅最大；个指标评分各有正、负值,而平均值都为正值且高于对照武育粳号,说明个改良系的食味品质均优于对照。 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究如一■气味舰‘‘“‘“口感疒人…；综合评份图个食味品尝指标的频率分布图 结果与分析表食味评分指标的描述性统计参数评分指标平均值标准差最小值最大值极差外观味道口感综合评分食味品质综合值的计算是将气味、外观、口感、味道和综合评分个指标按照：：的比例相加,计算出每份材料的食味品尝综合值。根据表可知,各株系的个食味品尝指标均高于对照武育粳号,其中在外观、味道、口感、综合评价这个指标中均有不少株系达到了极显著水平。在外观评价上,达到了极显著水平；在味道评价上,、、、达到了极显著水平；、、在口感评价上达到了极显著水平；在综合评价上,、、、达到了极显著水平。而在食味品质综合值上,、、、、、均达到了极显著水平。、、表个改良系食味品尝指标打分统计表株系外观￠综合评价食眛品质合值武育梗号和分别表示在和水平上与武育粳号存在显著差异。‘““ 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究、— 全文讨论与总结全文讨论与总结全文讨论分子标记辅助选择的优势及其影响因素相对于传统育种,分子标记辅助选择在缩短育种时间,加速育种进程等各方面有着很大的优势。传统育种一般只针对于表型的选择,对于条纹叶枯病抗病性来说,在发病年份,某些株系发病率较低,会被认为是具有一定抗病性的株系。而是否发病与病情程度,不仅与株系的抗性有关,还受到当年灰飞虱的带毒率,虫量大小及黑条矮缩病的发病率的影响。所以即使选取这类株系作为抗病株系繁育,所得到的子代也可能是感病类型。分子标记辅助选择是从基因层面上进行的选择,是利用与目的基因紧密结合的分子标记进行筛选,以达到确定株系是否抗病及抗病性强弱的目的。而且这种筛选从幼苗期就可以进行,从而减少了工作量,提高了工作效率。本研究以关赛作为条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的供体,与武育粳号制杂交组合,产生含有目的基因的代。然后用武育粳号作为轮回亲本配制回交组合,’同时以分子标记辅助选择筛选含有目的基因的单株(前景选择),再结合对后代的表型选择,如对农艺性状和品质性状的考察,目的是尽可能快速和完全的回复轮回亲本基因组(背景选择),筛选出综合性状与武育粳号相似甚至综合性状优于武育粳号的改良系。在辅助选择的过程中,有很多的因素影响着其选择效率。譬如标记与连锁基因的连锁强度,标记与基因连锁的愈紧密,其选择的可靠性就愈高。本研究使用条纹叶枯病抗性基因标记如,和暗胚乳功能标记均与目的基因紧密连锁,故能达到较好的选择效率和准确率。不过,若只用一个标记对目标基因进行选择,则标记与目标基因连锁必须非常精密才能达到较高的正确率。而且,标记和目标基因间难免会出现一定的重组。因此,为了防止目标基因丢失,通常会采用在目的基因双侧发展标记的方法,这样即使在回交或自交的某代出现发生重组的单株,也不会丢失目标基因。抗虫育种与抗病育种的选择对水稻条纹叶枯病来说,抗虫育种是指选育能直接对病毒的传毒媒介灰飞虱产生抗性的水稻品种,可分为拒虫性、抗生性和耐害性三种机制。抗性的机制可能是产生 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究了影响灰飞虱正常生长发育的成分(蛋白酶抑制剂、外源凝集素等)或利用选育具有抗虫性基因的水稻品种。从植物保护学的角度来说,灰飞虱是传播条纹叶枯病病毒的媒介,病毒不通过灰飞虱等媒介则不能传播,所以要想抗病首先要抗虫。但从育种的角度上来说,抗病育种才是根本的解决途径。这是因为即使通过抗虫育种栽种了大批量的水稻品种,灰飞虱并不会首先取食这种含有抗虫基因或产生杀虫激素的水稻,但当生产上只栽种了这些品种的水稻,灰飞虱仍然会因不得不取食水稻植株而使水稻感染病毒；而且虽然取食了含有抗虫基因的水稻品种的灰飞虱会死亡,但也只是减少了虫口基数,部分减弱了其危害,被食用植株仍然会得病,这样就起不到限制条纹叶枯病传播的作用。如果采用抗病育种,则无论有没有灰飞虱或其是否带毒,均不会造成条纹叶枯病的爆发。因此,抗病基因的发现为抗病育种提供了重要的物质基础。当然,如果在分子育种上同时聚合抗虫基因和抗病基因,这样会大大的增强水稻对条纹叶枯病的抗性。灰飞虱如果取食聚合抗虫、抗病基因的水稻,会使害虫出现活动困难、食量减少、生殖力降低等症状,而且被取食植株也不会发病。因此,为了更加有效的预防条纹叶枯病的发生,有必要对抗虫基因和抗病基因的结合使用进行深入研究,这样可以更加有效的预防条纹叶枯病的发生。黑条矮縮病对条纹叶枯病的影响、、’黑条矮缩病和条纹叶枯病在传播途径上是形同的,都主要以灰飞虱为传播媒介,所以两者病害发生区域几乎相同,但迄今为止还没有一个地区同时爆发水稻条纹叶枯病和黑条矮缩病两种病毒病的报道。目前对黑条矮缩病的抗性遗传和育种研究并未引起高度重视,相关理论比较薄弱,生产上也未发现对黑条矮缩病病毒免疫的水稻品种。而且,近几年江苏省大面积推广条纹叶枯病抗性水稻,基本上抑制了条纹叶枯病的爆发。同时,在本研究中调查了各试点、各重复小区中条纹叶枯病和黑条矮缩病的发病情况,除、外,其余小区黑条矮缩病发病率均高于条纹叶枯病。说明本地区黑条矮缩病有取代条纹叶枯病的趋势,有可能成为未来几年江苏主要水稻病害。而且解释了条纹叶枯病发病率偏低的问题。因此,抗的基因定位需进一步加快,从而为黑条矮缩病抗性水稻的培育创造条件、奠定基础。 全文讨论与总结粳稻食味品质的影响因素及其评价方法本研究中个改良系均含有暗胚乳突变基因’但从食味评比的结果可知其食味品质仍有一些差异。这充分说明除奶外,仍有其他品质相关基因的影响,使各改良系的遗传背景不尽相同,造成具有不同的食味品质。如半糯性基因办、直链淀粉增强基因、胚乳粉质基因和糖质基因等。而食味品质常用的评价方法一般有三种：食味仪测量法、稻米谱特征值分析法和食味品尝法。本研究采用食味品尝的方法。食味品尝就是以品尝人员的感觉为标准的感官评价,可以评定仪器所不能鉴别的咀嚼性能等项目。实际的食味品质与理化特性有所不同,具备相同理化特性的稻米可能会具有不同的食味品质。所以本研究结果较为客观实际。但是不同年龄、性别、地区和饮食习惯的人对食味品质的评价结果往往不同,因此品尝品种过多或品尝频度过高也会影响结果的正确性。不过由于本研究所用材料直链淀粉含量较低,其测量值不在食味仪默认的曲线范围内,所以不能用食味仪测量食味品质。全文总结、、本研究通过对武育粳号进行条纹叶枯病抗性基因和暗胚乳突变基因的分子标记辅助选择,结合田间抗性鉴定和食味品质评比分析,综合农艺性状和品质性状数据分析结果,最终选育出武育粳号抗条纹叶枯病和具有优良食味品质的改良系,主要研究结果如下：根据分子标记辅助选择的结果可知,个改良系均含有条纹叶枯病抗性基因伽和暗胚乳突变基因。田间条纹叶枯病抗性调查结果显示,改良系相较于对照武育粳号,其条纹叶枯病抗性均有较大程度的提高,其中、、、在南京溧水、泰州姜堰两试点间抗性表现较好,发病率低于对其食味品质的感官评价结果表明,其各评价指标(气味、外观、味道、口感、综合评价)均优于对照武育粳号,其中、、、、、、在各指标中均达到了显著或极显著水平对其产量性状及穗部农艺性状的考察结果显示,、、、、、在单株产量、千粒重、结实率等性状上与对照相似,个别性状显著高于对照；对改良系各小区进行测产,改良系的平均产量为公斤亩,对照武育粳号的平均产量为公斤亩,并且各小区产量均高于对照,其中、达到了显著性水平；品质性状数据分析的结果显示：改良系碾磨品质和对照相似,而 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究垩白粒率和垩白度显著低于对照,均表现出显著优于对照的性质；对蒸煮品质和食味品质的分析结果显示,由于改良系含有暗胚乳突变基因,各改良系的直链淀粉含量均显著低于武育粳号,明显提高了其食味品质。综合考虑,通过分子标记辅助“前景”选择技术及回交育种策略及结合改良系的条纹叶枯病抗性、食味品质、产量和综合农艺性状、品质性状,最终选出、、三个综合表现较好的改良系。、、■ 参考文献参考文献王才林江苏省水稻条纹叶枯病抗性育种研究进展江苏农业科学,：,,,朱美凤,肖庆撲,王法明,等江南稻区新发生的几种稻病植物保护学报,：孙炳剑,袁虹霞,刑小萍,等水稻条纹叶祜病暴发原因分析与综合防治技术河南农业科学,：魏太云,王辉,林含新,吴祖建,林奇英,谢联辉我国水稻条纹病毒种群遗传结构初步分析植物病理学报,‘,、：张国鸣,王华弟,戴德江浙江省、水稻条鋒叶枯病发生发展态势与防控对策措施中、；国植保导刊,,：杨荣明,刁春友,朱叶芹江苏省水稻条纹叶枯病上升原因及防治对策植保技术与推广,,：程兆榜,杨荣明,周益军,等江苏稻区水稻条纹叶枯病发生新规律江苏农业科学,,：刘永忠,王兴涛,李华,等水稻条纹叶枯病产量损失与防治指标研究初报中国植保导刊,：‘张家兴水稻条纹叶枯病成灾原因初探西北农林大学学报,,增刊：张景飞,龚林根,瞿燕,等年常熟市、代灰飞虱严重为水稻穗部中国植保导刊,：丁海红水稻条纹叶枯病及传毒媒介灰飞虱综合防治技术研究与应用苏州大学硕士学位论文,吕高强,凌丹,等水稻条纹叶枯病高发原因与综防技术探析中国农村小康科技陈永兵,刘福明稻曲病的识别与防治植物医生,吕佩河中国粮食作物、经济作物、药用植物病虫原色图鉴(上)呼和浩特：远方出版社, 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究林奇田,林含新,吴祖建,等水稻条纹病毒外壳蛋白和病毒病特意蛋白在寄主体内的积累福建农业大学学报,：刘利华,吴祖建,林奇英,等水稻条纹叶枯病细胞病理变化的观察植物病例学报’：,林含新,林奇英,谢联辉水稻条纹病毒分子生物学研究进展中国病毒学,：谢联辉,魏太云,林含新,等水稻条纹病毒的分子生物学福建农业大学学报,,：林奇英,谢联辉,周仲驹,等水稻条纹叶枯病的研究,病毒的分布和损失福建农学院学报,：,、：周仲驹,林奇英,谢联辉水稻条纹叶枯病的研究病叶细胞的病例变化福建农学院学报,：胡淑霞论植物病毒的传毒介体及传播方式生物学杂志,,：梁小波,鲁瑞芳,吴云锋,彭学贤植物病毒昆虫介体传播的研究进展生物工程进展,：江苏省水稻条纹叶枯病协作攻关课题组,江苏省水稻条纹叶枯病协作攻关研究进展江苏农业科学,增刊：,,邢祖颐何家齐,刘志武,等籼粳稻杂交育种的研究抗条纹叶枯病育种,作物学报,,：, 参考文献”,,,潘学彪,梁国华,陈宗祥,等江苏抗水稻条纹叶枯病育种策略江苏农业科学,,：,,,,,,,,丁秀兰江玲,等利用重组自交系体检测水稻条纹叶枯病抗性基因及分析遗’、)■传学报,,：‘‘丁秀兰,江玲等利用回交重组自交群体检测水稻条纹叶枯病抗性位点作物学报,,孙黛珍,江玲水稻抗条纹叶枯病遗传育种研究中国农学通报,,：孙黛珍,江玲,张迎信,等水稻品种抗条纹叶枯病相关的检测作物学报,,,,’,,汪,郑文静,张艳芝,等水稻恢复系抗条纹叶祜病相关的检测分子植物育种,,,程式华,阂绍措中国水稻品种：现状与展簞中国稻米,,：丨 .武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究吴青,稽慈华,汤镇加,等大米食味计的应用和研究粮食与食品工业,：罗秋香粳稻稻米蛋白质与蒸煮食味品质的关系东北农业大学硕士学位论文,舒庆尧稻米蒸煮与食用品质的研究浙江农业大学博士学位论文,黎用朝,李小湘,等影响稻米品质的遗传和环境因素研究进展中国水稻科学,,增刊：王忠,顾蕴洁,等稻米的品质和影响因素分子植物育种,程方民,钟连进,等早釉水稻垩白部位淀粉的蒸煮食味品质特征作物学报,,：蔺万煌,萧浪涛,等稻米垩白的形成及其调控湖南农业人学学报,,：周新桥,邹冬生稻米垩白研究综述作物研究,：张巧凤粳稻食味品质性状的相关性及定位南京农业大学硕士学位论文,张国民,张玉华,宋立泉浅谈在米中的蛋白质对营养价值及食味品质的影响黑龙江农科科学,,：莫惠栋我国稻米品质的改良中国农业科学,厂：杨泽敏,王维金等稻米三种淀粉成分的分离及其蒸煮前后的结构差异电子显微学报,：金征宇碳水化合物化学化学工业出版社,舒庆尧,徐光华,夏英武,等稻米表观直链淀粉含量的研究进展浙江农业学报,：,,,,丁文平,蒲萍萍,丁霄霖大米淀粉理化指标对其凝胶特性的影响无锡轻工业大学学报,：’, 参考文献刘宜柏,吴慧光,孙义伟稻米蛋白质含量的初步研究江西农业大学学报,包清彬,猪谷富雄日本大米食味理化学测定食品科技,,：,‘朱昌兰水稻低直链淀粉含量基因育种利用的研究进展中国农业科学,：包劲松,何平,朱立煌,等利用一个水稻群体定位控制淀粉特性的植物学报,：何平,李仕贵,李晶昭影响稻米品质几个性状的基因座位分析科学通报,,：、、、、,,,,,,,,,,,,,,,,,,, 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究,,,,周宇爝分子标记发展简史现代农业科技,：白玉分子标记技术及其应用安徽农业科学：关强,张月学,等分子标记的研究进展及几种新型分子标记技术黑龙江农业科学,：阮成江,何祯祥,等中国植物遗传连锁图谱构建研究进展西北植物学报,,：贾继分子标记种质资源鉴定和分子标记育种中国农业科学：何风华分子标记及其在植物遗传育种上的应用生物学教学,：白建荣,郭秀荣,等分子标记的类型、特点及在育种中的应用山西农业科学,,：‘‘,张文龙,陈志伟,等分子标记辅助选择技术及其在作物育种上的应用研究种子,刘鹏渊,朱军,标记辅助选择改良数量性状的研究进展遗传,：潘学彪以分子标记辅助选择育成抗条纹叶枯病水稻新品种“武陵粳号”作物学报,,：—陈峰分子标记辅助选择改良圣稻和圣稻的条纹叶枯病抗性中国农业科学,,：李波分子标辅助选择改良粳稻条纹叶枯病抗性扬州大学硕士学位论女,骆名瑞武运粳号条纹叶枯病抗性的定向改良研究南京农业大学硕士学位论文,刘巧泉分子标记辅助选择改良特青及其杂交稻米的蒸煮与食味品质作物学报,： 参考文献周屹峰具中等直链淀粉含量的籼型优质不育系浙农的选育杂交水稻,：■许勇分子标记辅助改良杂交稻协优及其父母本的蒸煮食味品质生物学杂志,夏明元,李进波,张建华,等利用分子标记辅助选择技术选育具有中等直链淀粉含量的早稻品种华中农业大学学报,,：李浩杰,李平,高方远,等标记辅助改良冈直链淀粉含量的研究作物学报,,：苟作旺作物分子标记辅助选择育种研究进展甘肃农业科技,,桑茂鹏,姜明松,李广贤,等利用分子标记辅助选择双基因和稻植株山东农业科学,：何光明,孙传清,付永彩,等水稻抗衰老基因与抗白叶枯病基因；的聚合研究遗传学报,,：陈圣,倪大虎,陆徐忠,等分子标记辅助选择聚合、和历基因生物学杂志,：姚姝,陈涛,等分子标记辅助选择赛合水稻暗胚乳突变基因和抗条纹叶枯病基因伽的中国水稻科学,,：‘、‘‘,,,,梁乃亭,魏玉波稻米食味品尝实验与结果评价方法新疆农业科学,：戴金平,任立涛,陈桂英稻米食味品质的感官评价农业装备技术,,王宝祥灰飞虱传播的氷稻黑条矮缩病和条纹叶枯病抗性定位南京农业大学博士学位论文,朱昌兰,翟虎渠,万建民稻米食味品质的遗传和分子生物学基础研究江西农业大学学报自然科学版,： 武育粳号条纹叶枯病抗性和食味品质的定向改良研究‘ .m;致谢本论文是在导师王才林研究员的悉心指导下完成的,衷心感谢王老师为我的学习和科研所付出的心血和劳动。两年来,王老师渊博的知识,勤奋严谨的工作态度,以及不断开拓进取的精神使我深深受益,将是我终身学习的榜样。借此论文完成之际,向我的导师表示衷心的感谢和崇高的敬意！本人学业的完成也离不开其他老师和同学的关心、指导和帮助。有幸得到了江苏省农业科学院粮食作物研究所赵凌老师、朱镇老师、张亚东老师、周丽慧老师的指导与帮助。感谢陈涛师兄在实验方法以及论文修改过程中的无私帮助和热心指导,感谢赵庆勇师兄在田间劳作中给予的关心和指导；感谢赵春芳博士后、郑佳博士后在我学习、实验和生活中的关心和帮助；感谢姚姝、于新、张颖慧、董少玲、骆名瑞、刘燕清等师兄与师姐(妹)在学习和生活中的关心和帮助；感谢何重、丁丹在我的学习和实验中的支持；感谢王银忙和姚宗梅在田间实验的关心和帮助。‘感谢一贯支持我、鼓励我的父母和亲友！谢所有关心和帮助我的人！、、、、最后,谨向参加论文评阅和答辩的各位家邊以最诚挚的谢意！■厂‘■‘‘■