NY∕T 2891-2016 禾本科草种子生产技术规程 老芒麦和披碱草(农业)

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1、ICS65.100.30B17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T2890一2016稻米中γ-氨基丁酸的测定高效液相色谱法Determinationofγ-aminobutyricacidinrice一HPLC2016-05-23发布2016-10-01实施中华人民共和国农业部发布NY/T2890-2016目。吕本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位:云南省农业科学院且画面矗由单且l技术研究所、农业部农产品质量监督检验测试中心(昆明)。本标准主要起草人:INY/T2890-2016稻米中γ

2、-氨基丁酸的测定高效液相色谱法范围本标准规定了稻米中γ-氨基丁酸含量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于稻米中γ-氨基丁酸含量的测定。本方法检出限为0.10mg/峙,定量限为0.20mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样经乙醇一水溶液提取,经4-二甲基胶基偶氮苯-4-磺酌氯(DABS-Cl)衍生,用高效液相色谱法测定,以保留时间定性,外标法定量。4试剂与材料

3、除非另有规定,使用试剂均为分析纯。水为GB/T6682中规定的一级水。4.1元水乙醇(~H50H):优级纯。4.2乙睛(CH3CN):色谱纯。4.3提取榕液:无水乙醇十水=4十lCV+V),取400mL无水乙醇和100mL7.K混匀。4.4碳酸氢铀榕液:称取0.40g碳酸氢铀,用水、溶解并稀释至10mL,现配现用。4.54-二甲基胶基偶氮苯-4-磺酷氯溶液:称取4-二甲基胶基偶氮苯-4-磺酌氯20.0mg,用乙睛溶解并稀释至10mL,现配现用。4.6三水合乙酸纳溶液:称取3.40g三水合乙酸铀,用水溶解并稀释至500mL,经微孔滤膜(4.10)过滤。4.

4、7γ氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA):CAS号56-12-2.纯度二三99.9%。4.8标准储备榕液:精确称取γ-氨基丁酸标准品10.0mg,用乙睛榕液榕解并定容至10mL.即为1000mg/L的标准储备液,于一180C下,贮存于密闭的棕色玻璃瓶中,保存有效期为3个月。4.9标准使用液:在使用中将标准储备溶液逐级稀释成2.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、50.0mg/L和100.0mg/L或其他浓度的γ-氨基丁酸标准使用液,现配现用。4.10洁、膜:0.45μm,7.K相滤膜。5仪器与设备5.1高效液相色谱仪带紫外

5、检测器或二极管阵列检测器。5.2组织捣碎机:转速1000r/min。5.3分析天平:感量为0.01mg.O.01g。5.4振荡水浴锅。NY/T2890-20165.5超声波清洗器。5.6旋涡混匀器。5.7离心机:最大转速10000r/mino6分析步骤6.1试样制备样品经混匀后,缩分至约50g,经研磨至全部通过孔径0.25mm(60目)筛的试样.混匀,装入密闭容器中,室温下保存。6.2提取称取1.0g样品于50mL30min后,在旋涡混匀器上振荡2min,静置5mm,瓶中,样品残渣再用10mL提取榕液(4.3),待衍生化。6.3衍生化准确吸取1mL0.4

6、0mL4-二甲孔滤膜(4.10)6.4测定6.4.1色谱参色谱柱:检测波长:柱温:30oC进样量:10流动相:乙流速:1.06.4.2色谱分分别将标准峰面积比较定量。7结果计算试样中γ-氨基丁(1)式中:ω一一试样中γ氨基丁酸含量,单位为军儿/...-::>】…51且gJ;ρ样液中γ-氨基丁酸测定质量浓度,单位为毫克每升(mg/L);V二二定容体积,单位为毫升(mL);m一-i式样质量,单位为克(g);测定结果取两次测定的算术平均值,计算结果保留三位有效数字。8精密度在重复性条件下,获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。在再现性条件下

7、,获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。2NY/T2890-2016附录A(资料性附录)γ-氨基丁酸标准溶液色谱图10mg/Ly-氨基丁酸标准、溶液色谱图见图A.1。0.0300.025γ-氨基丁酸0.020>民运0.015国4是主室。010句通R0.0050.000-0.0050.002.004.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.00aJ间(min)图Å.110mg/Lγ-氨基丁酸标准溶液色谱图3

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