DB65∕T 2934-2009 无公害食品 阿魏菇菌种生产技术规程(新疆维吾尔自治区)

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1、ICS65.020.20B05备案号:D65至五~4新疆维1==1示自Jr:::I区地方标准DB65/T2934皿2009无企害食品阿魏菇菌种生产技术规程Pollution-FreeagricultureproductsRulesofstrainsculturalofPleurotusferulaeLanzi2009-02-10发布2009-03-10实施新疆维吾敢自治区殷量技术监督揭发布DB65/T2934-2009自IJ1=1本标准依据GB/Tl2366.6-1990((综合标准化工作导则农业产品综合标准化一般要求》和GB/T1.1-2000

2、((标准化工作导则第l部分:标准的结构和编写规则》而编写。本标准由阿勒泰地区质量技术监督局提出。本标准由新疆维吾尔自治区农业厅归口。本标准起草单位:阿勒泰地区青河县农业局、青河县阿魏菇协会，阿勒泰地区农业技术推广中心。本标准主要起草人:管建华、严玉国、胡龙江、李进、程箴华。DB65/T2934-2009无公害食品阿魏菇菌种生产技术规程1范围本标准规定了无公害食品阿魏菇菌种分级、母种培育、原种制作、栽培种制作等要求。本标准适用于无公害食品阿魏菇菌种生产。2规范性引用文件F列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后

3、所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T12728食用菌术语NY/T528食用菌菌种生产技术规程GB5749生活饮用水标准3阿魏菇菌种分级分为母种、原种、栽培种三级。4母种培育4.1PDA综合培养基配方在PDA标准配方马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml的基础上，再增加蛋白陈10g、阿魏根10g、酵母膏4g、磷酸二氢饵2g、硫酸镇O.毡，制成PDA综合培养基。4.2培养基制作将马铃薯洗净

4、去皮，切成lOmm的方块。称取200g放入铝锅中，加7.K1000ml后，再加入阿魏根，煮沸20min~30min后，用4层纱布过滤取滤液，将虑液lilJ入锅中再加入琼脂，用小火力口热不断搅拌，至琼脂完全融化后，再加入葡萄糖和其他营养物质，搅拌至完全融化，倒入量桶补足水分至1000mlo4.3装试管将制作好的培养基，乘热用漏斗分装试管，装入试管长度的四分之一。培养基液体不得沾附管口壁。塞上硅胶塞，将试管每7支用线绳扎成把。4.4高压灭菌-/将扎成把的试管垂直放在医用高压灭菌锅内，盖上锅盖拧紧螺丝，关闭放气阀后升温，在压力表指针达到0.05MPa时

5、打开放气阀，放净锅内空气，使压力表针回到零位，再关闭放气阀，继续加热至压力0.15MPa，开始计算灭菌时间，30min可彻底灭菌。4.5市1Jf'F斜面培养基DB65/T2934-2009高压灭菌后，当温度降到90"C以下(压力表指针为"0"时)，打开锅盖让蒸汽溢出，乘热将试管培养基摆成斜面，先在桌面上放一个截面积1.5cmX2cm的木条，长度100cm，再把试管逐支斜靠在木条上，使培养基斜面长度约为试管长度的2/3。试管上用干布覆盖，减少试管内的冷凝水。培养基冷凝固定后即为斜面培养基，在无菌条件f，可直接进行接种，也可放置在冰箱冷藏室内备用。4

6、.6野生阿魏菇组织分离用75%酒精棉球擦拭选好的野生阿魏菇体表面进行消毒。在灭过菌的接种箱内或超净工作台上用无菌操作方法把菇体从中间掰开，并从剖面上切取黄豆大小组织块，切取菌块的部位以菌柄上方的细织为佳，并迅速移至培养基斜面上。4.7组织培养分离接种后的试管放在22"C~25"C的恒温箱内培养lOd左右，待分离块上长出菌丝体后，认真进行鉴别和筛选，选择夭势好、发菌快、无污染的试管即为原始母种。4.8母种种植试验4.8.1为保证生产的安全，在用于原种批量生产之前，应先对分离的母种做一次小规模的栽培出菇试验，以观察形状，测定产量，符合生产要求后再批量

7、投入生产。4.8.2母种须贴上标签，注明品种名称、采集时间、分离时间、典型形状、相关指标和分离人等。4.9母种扩繁为满足生产需要，母种必须进行扩繁，以增加数量。母种扩繁必须在消过毒的接种箱内或超净工作台上进行无菌操作。4.9.1母种转接转接前，用75%的酒精棉球擦手和试管口，接种针要在酒精灯火焰上反复灭菌。用己灭菌的接种针伸入到试管中，将斜面菌丝体连同培养基横竖切成30个小方块，再用接种铲挑取小方块移入待接试管的斜面中部。抽出接种铲，将试管口移到酒精灯上烧一下，塞上硅胶塞。4.9.2培养转接好的试管，贴上标签注明日期和编号，放入24"C~25"C

8、的人工气候箱内进行培养，3d后检查菌丝生长情况，剔出未萌发和污染的试管，其余生长正常的试管继续培养，培养到菌丝体民;满斜面，一般12d~