DB65∕T 4120-2018 绵羊冷冻胚胎(新疆维吾尔自治区)

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1、ICS65.020.30B43DB65新疆维吾尔自治区地方标准DB65/T4120-2018绵羊冷冻胚胎Frozenembryosofsheep2018-04-30发布2018-05-30实施新疆维吾尔自治区质量技术监督局发布DB65/T4120-2018目IJ昌本标准参照GB/T1.1-2009((标准化工作导则第1部分:标准的结构和编写》的要求制定。本标准由新疆维吾尔自治区畜牧总站提出。本标准由新疆维吾尔自治区畜牧厅归口。本标准起草单位:新疆维吾尔自治区畜牧总站、新疆畜牧科学院生物技术研究所(新疆畜牧科学院中国.澳大利亚绵羊育

2、种研究中心)、新疆华牛天俊种畜繁育工程有限公司。本标准起草人:耿娟、汪立芹、卢全晨、吴阳升、林嘉鹏、卫新瑛、韩冰、张玲、程黎明、贾旭升、邓强、史洪才、黄俊成、黎霞。DB65/T4120-2018绵羊冷冻胚胎1范围本标准规定了绵羊冷冻胚胎的生产要求、抽样、试验方法、判定规则以及包装、标识、贮存和运输的技术要求。本标准适用于绵羊的冷冻胚胎产品。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单〉适用于本文件。GB/T2828.2-

3、2008计数抽样检验程序第2部分:按极限质量CLQ)检索的孤立批检验抽样方案GB/T2828.11-2008计数抽样检验程序第11部分:小总体声称质量水平的评定程序GB/T5458液氮生物容器GB/T16306声称质量水平复检与复验的评定程序3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1;令;东胚胎frozenembryo0经过超低温冷冻处理的、能够在液氮中C-196C)长期保存的胚胎。3.2存活率survivalrate胚胎解冻后，存活胚胎占总胚胎的百分率，见公式CA.l)。3.3复腔率blastocystrecoveryrat

4、e胚胎解冻后，经培养一段时间，恢复囊胚腔的胚胎数占总囊胚数的百分率，见公式CA.2)。4生产要求4.1种母羊DB65/T412。一2018应具有种用价值，体质健康，无遗传病，不允许有己发布的单位防疫法中所明确的二类疫病中的任何1种疫病。4.2新鲜胚胎分级评定用形态学方法，根据各级胚胎发育阶段、轮廓形态、卵裂球均匀、变形细胞比例等对胚胎质量进行鉴定见表1，将胚胎依次分为下列4个等级:a)A级:胚龄与胚胎发育阶段符合，透明带完整无缺陷、厚薄均匀、轮廓清晰、色泽明亮，细胞密度大，卵裂球均匀、边缘整齐、没有游离细胞或很少，变性细胞比例为1

5、0%;b)B级:胚龄与胚胎发育阶段符合，透明带完整无缺陷、厚薄均匀、轮廓清晰、色泽稍暗，细胞密度小，卵裂球较均匀、边缘整齐、有少部分游离细胞，变性细胞比例20%'"'-'30%;c)C级:透明带完整或有缺陷、轮廓不清晰，色泽过暗或过淡，细胞密度小，边缘不整齐，有水泡，游离细胞占70%以上，细胞变性率为40%'"'-'50%;d)D级:透明带完整或有缺陷，胚龄与胚胎发育阶段不相符，未受精，发育停滞，卵裂球少而散，为不可用胚胎。表1绵羊胚胎发育阶段划分表发育阶段胚龄形态描述桑棍胚5d四6d可观察到卵裂球，卵裂球间的界线不清晰，无法确定

6、卵裂球的数量，卵裂球逐渐紧缩，占据胚胎体积的80%-----90%致密桑梧5.5d-7d桑堪胚的细胞团继续紧缩，完全分不清卵裂球的界线，细胞团边缘光滑，体积减少，紧缩胚的细胞团仅占据胚胎体积的60%-----70%早期胚囊6d-7d细胞团体积逐渐变大，在细胞团内部出现一个微小的、发亮的、充满液体的囊胚腔，但无法分清内细胞团和滋养层细胞，细胞团占据胚胎体积的70%-----80%囊胚6d-7d囊胚腔增大明显，内细胞团和外周的滋养层细胞分离，细胞团充满卵周间隙扩张囊胚6d-7.5d胚胎体积增至1.2倍-----1.5倍，囊胚腔充分扩张

7、，透明带变薄孵化囊胚6.5d-7.5d扩张囊胚进一步发育，细胞团逐渐从透明带中脱离出来4.3冻胚外观细管无裂痕，无扭折，两端封口严密，书写或印刷的标记清晰，包括供体号、胚胎数量、胚胎发育时期、胚胎级别、生产冷冻日期等信息。4.4解冻后的胚胎指标解冻后的胚胎外观应符合4.3的规定，并符合下列条件:a)胚胎冷冻前后的质量均应达到B级(含B级)以上为合格:b)形态完整，细胞紧凑的比例不高于80%;c)数量、等级与冷冻载体上标记的一致:d)冷冻胚胎解冻后，放入37oC'"'-'38.6oC二氧化碳培养箱培养1h后，胚胎存活率不低于80%;

8、e)冷冻胚胎解冻后，放入37oC'"'-'38.6oC二氧化碳培养箱培养12h后，囊胚腔复腔率不低于70%。5抽样与判定5.1抽样检验方案2D865/T4120-20185.1.1生产抽样检验的判定对抽取样本的检验，按照GB/T2828.2-200