菠菜色素地提取和色素分离

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1、实用标准文案菠菜色素的提取和色素分离姓名：于晓庆学号:2009296070精彩文档实用标准文案成绩：精彩文档实用标准文案菠菜色素的提取和色素分离在剂个萝油石用利展第即较当液比开展中剂开展的同不种两在，溶析层行进黄飞橙谱的5剂集外攵紫瓶行形进・口力分时中析脱洗的当适用选中析层柱在隹其一取i，度时光出光滴分将外即紫层性成，层极色素薄的有卜精彩文档实用标准文案精彩文档实用标准文案关键词：波菜色素萃取薄层层析柱层析引言：绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。叶绿素存在两种结构相似的形式即

2、叶绿素a（C55H72O5N4Mg）叶绿素b（C55H70O6N4Mg）其差另U仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。它们都是毗咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。植物中叶绿素a的含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的炫基结构使它易溶于醍、石油醍等一些非极性的溶剂。胡萝卜素（C40H56是具有长链结构的共钝多烯。它有三种异构体，即a-,B-和丫-胡萝卜素，其中B-异构体含量最多，也最重要。在生物体内，B-体受酶催化氧化即形成维生素A。目前（3-胡萝卜素已可进行工业生产，可作为

3、维生素A使用，也可作为食品工业中的色素。叶黄素（C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醍中溶解度较小。精彩文档实用标准文案ch211CHR叶绿素a(R=CH3)叶绿素b(R=CH。CH2CH3CH3CH3CH3CH3B-胡萝卜素（R=H）叶黄素（R=OH）CH2OH维生素A本实验从菠菜中提取上述几各色素，并通过薄层层析和柱层析进行分离。1实验部分1.1材料、仪器设备及试剂精彩文档实用标准文案材料：新鲜菠菜叶片。仪器设备：电子天平（感量0.01

4、g）;研钵；布氏漏斗.；圆底烧瓶；电热煲；滴管；显微载玻片；广口瓶；滤纸；少量脱脂棉；层析柱试剂：95%乙醇，丙酮，硅月^G,中性氧化铝，甲醇，石油醍（60-90C）,丙酮，乙酸乙酯1.1实验流程1.2操作步骤1.2.1.菠菜色素的提取称取20g洗净后用滤纸吸干的新鲜（或冷冻）的菠菜叶，用剪刀剪碎并与20mL甲醇拌匀，在研钵中研磨约5min然后用布氏漏斗抽滤菠菜汁，弃去滤渣。将菠菜汁放回研钵，每次用10mL3:2（体积比）的石油醍-甲醇混合液萃取两次，每次需加以研磨并且抽滤。合并深绿色萃取液，转入分液漏斗，每次用10mL

5、Tk洗涤两次，以除去萃取液中的甲醇。洗涤时精彩文档实用标准文案要轻轻旋荡，以防止产生乳化。弃去水-甲醇层，石油醍层用无水硫酸钠干燥后滤入圆底烧瓶，在水浴上蒸去大部分石油醍至体积约为1mL为止。1.1.1.薄层层析取四块显微载玻片，用硅胶G加0.5%较甲基纤维素调制后制板，晾干后在110c活化1h。展开剂：（a）石油醍-丙酮=8:2（体积比）（b）石油醍-乙酸乙酯=6:4（体积比）取活化后的层析板，点样后，小心放入预先加入选定展开剂的广口瓶内，盖好瓶盖。待展开剂上升至规定高度时，取出层析板，在空气中晾干，用铅笔做出标记。分

6、别用展开剂a和b展开，比较不同展开剂系统的展开效果。观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小次序。注意更换展开剂时，须干燥层析瓶。不允许前一种展开剂进入后一系统1.3.3.柱层析在20x10cm层析柱中，加15cm高的石油醍。另取少量脱脂棉，先在小烧杯用石油醍浸湿，挤压以驱除气泡，然后放在层析柱底部，轻轻精彩文档实用标准文案压紧，塞住底部。将20g层析用的中性氧化铝（150~160目），从玻璃漏斗中缓缓加入，小心打开柱下活塞，保持石油醍高度不变，流下的氧化铝在柱子中堆积。必要时用橡皮锤轻轻在层析

7、柱的周围敲击，使吸附剂装得均匀致密。柱中溶剂面由下端活塞控制，既不能满溢，更不能干涸。装完后，上面再加一片圆形滤纸，打开下端活塞，放出溶剂，直到氧化铝表面溶剂剩下1~2mmi时关上活塞（注意！在任何情况下，氧化铝表面不得露出液面）。将上述菠菜色素的浓缩液，用滴管小心地加到层析柱顶部，加完后，打开下端活塞，让液面下降到柱面以上Imrnfc右，关闭活塞，加数滴石油醍，打开活塞，使液面下降，经几次反复，使色素全部进入柱体。待色素全部进入柱体后，在柱顶小心加约1.5cm高度洗脱剂一石油醍-丙酮溶液9:1（体积比）。打开活塞，让洗

8、脱剂逐滴放出，层析即开始进行，用锥形瓶收集。当第一个有色成分即将滴出时，取另一锥形瓶收集，得橙黄色溶液，它就是胡萝卜素。用石油醍稀释后，作紫外光谱测定。用石油醍-丙酮7:3（体积比）作洗脱剂，分出第二个黄色带，它是叶黄素（1）。再用丁醇-乙醇-水3:1:1（体积比）洗脱叶绿素a（蓝绿色）和叶绿素b（黄绿色）。1.3.