奶山羊乳房炎灭活疫苗的制备及免疫效果检测

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1、动物医学进展，２０１４，３５（１２）：１８－２２ＰｒｏｇｒｅｓｓｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ奶山羊乳房炎灭活疫苗的制备及免疫效果检测侯伟杰，张立强，高洋，赵玄多，赵燕清，刘方，高晶晖，张淼涛＊，陈德坤＊（西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌７１２１００）摘要：为评估奶山羊乳房炎灭活疫苗的免疫效果，以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料，经甲醛３７℃灭活，按照６∶１（Ｖ／Ｖ）与铝胶盐充分混匀，分别经腹股沟皮下、颈部皮下注射途径，免疫泌乳期奶山羊，免疫剂量均为２ｍＬ，共免疫２次，每次间隔１４ｄ。分别在免疫前及第１次免疫后１０、２４、６０、１

2、８０ｄ采集血样和乳样，ＥＬＩＳＡ测定抗体效价，用快速诊断液检测隐性乳房炎，统计患病奶山羊的数量。结果显示，与对照组相比，两次免疫后血液及乳汁中针对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌的抗体效价含量均显著增加（Ｐ＜０．０５），抗体维持时间长；颈部皮下免疫组免疫后１８０ｄ，腹股沟皮下免疫组免疫后的６０ｄ，隐性乳房炎奶山羊数量均明显下降。结果表明，本研究制备的奶山羊乳房炎疫苗不仅能够刺激机体产生较好的体液免疫应答，而且还对隐性乳房炎有显著的治疗效果。关键词：乳房炎；灭活疫苗；免疫；抗体效价；隐性乳房炎中图分类号：Ｓ８５２．４；Ｓ８５７．２６文献标识码：Ａ文章编

3、号：１００７－５０３８（２０１４）１２－００１８－０５奶山羊乳房炎常发生于泌乳期，在产前及干乳期和乳质量，造成严重的经济损失，还会直接影响奶山［１］有时也发生此病。调查显示，目前我国奶山羊隐性羊的泌乳机能，导致乳腺失去泌乳性能，甚至造成羊乳房炎的检出率较高，陕西为４５．５％，山东为５０．９％，只死亡，是对奶山羊养殖业危害最严重的疫病之一。［２］云南为３５．６％，全国平均为４３％左右，与世界平均传统的抗生素疗法，不仅造成耐药菌株的大量产生，［３］［４－６］水平４５％～５０％相当。乳房炎不仅会降低乳产量同时还带来严重的食品安全隐患。利用疫苗来控收稿日期：２０１４－０３－２８基金项目：陕

4、西省科技统筹创新工程计划项目（２０１３ＫＴＺＢ０２－０２－０２）作者简介：侯伟杰（１９８９－），女，河南焦作人，硕士研究生，主要从事分子病原与免疫学研究。＊通讯作者櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘ＳｔｕｄｙｏｎＳｕｐｅｒａｎｔｉｇｅｎｉｃＴｏｘｉｎＧｅｎｏｔｙｐｉｎｇｏｆＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓＩｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍＣｏｗＭｉｌｋ１，ＴＡＮＧＴｉｎｇ－ｔｉｎｇ１，ＢＡＯＱｉｎｇ－ｈａｎ１，ＧＵＯＨａｉ－ｙｏｎｇ１，ＣＵＩＪｉｎｇ－ｃｈｕｎ２ＳＵＮＹｉｎｇ（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃ

5、ｅ，ＪｉｌｉｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｉｐｉｎｇ，Ｊｉｌｉｎ，１３６０００，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＤａｌｉａｎＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，１１６６００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｓｕｒｖｅｙｔｈｅｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎｇｅｎｏｔｙｐｅｓｏｆＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓＳＰ－３ｓｔｒａｉｎｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｒａｗｍｉｌｋｏｆｓｕｂｃｌｉｎｉｃａｌｍａｓｔｉｔｉｓｃｏｗ，ｗｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄｓｐｅｃｉｆｉｃＰＣＲｐｒｉｍｅｒｓｆｏｒｆｉｖｅｃｌａｓｓｉｃ

6、ａｌｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎｔｙｐｅｓＳＥＡｔｈｒｏｕｇｈＳＥＥａｎｄｔｏｘｉｎｓｈｏｃｋｓｙｎｄｒｏｍｅｔｏｘｉｎ１（ＴＳＳＴ－１）ｔｙｐｅｇｅｎｅｓ，ａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｗｉｔｈｔｈｅｆｅｍＡａｎｄｆｅｍＢｇｅｎｅｏｆＳ．ａｕｒｅｕｓ．Ｔｈｅｔｙｐｅｓｔｒａｉｎ（ＡＴＣＣ１２６０００）ａｎｄ８３４ｓｔｒａｉｎｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｔｒａｉｎｓ．ＧｅｎｏｍｉｃＤＮＡｏｆｔｈｅｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃＳ．ａｕｒｅｕｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｔｅｍｐｌａｔｅ，ｆｉｖｅｃｌａｓｓｉｃａｌｅｎｔｅｒｏｔｏｘ－ｉｎｓａｎｄＴＳＳＴ－１ｇｅｎｅｓｐｒｏｄ

7、ｕｃｅｄｂｙＳ．ａｕｒｅｕｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＰＣＲａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅＳＰ－３ｉｓｏｌａｔｅａｎｄｔｈｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｔｒａｉｎｓｈａｒｂｏｒｅｄｆｅｍＡａｎｄｆｅｍＢ，ａｎｄｔｈｅＳＰ－３ｉｓｏｌａｔｅｆｒｏｍｍｉｌｋｈａｒｂｏｒｅｄｓｅａ，ｓｅｃ，ｓｅｄａｎｄｔｓｔ－１ｓｕｐｅｒａｎｔｉｇｅｎｉｃｔｏｘｉｎｇｅｎｅｓ．Ｔｈｅｓｔｕｄｙｗｏｕｌｄｌａｙａｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｆｕｒｔｈｅ