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《地锦草不同萃取部位体外抗真菌作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、地锦草不同萃取部位体外抗真菌作用研究：安惠霞,斯拉甫?艾白,古力娜?达吾提,李治建【摘要】目的对地锦草不同萃取部位进行体外抗真菌实验,测定其最小抑菌浓度值(MIC)。方法采用溶剂萃取法分离地锦草乙醇提取液,得到水、石油醚、氯仿、正丁醇等4个萃取部位;根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的《产孢丝状真菌的液基稀释法抗真菌药物敏感性试验方案》(M38-A),测定地锦草各萃取部位对23株临床常见皮肤癣菌的MIC。结果由于地锦草萃取分离后的石油醚和氯仿部位在药敏试验中的溶解度甚小,影响结果的科学观察,本研究主
2、要针对正丁醇和水部位的体外药敏进行了检测,正丁醇和水部位对真菌有明显的抑制作用,并且正丁醇部位的作用优于水部位。结论地锦草萃取部位具有体外抗真菌作用。【关键词】地锦草;M38-A方案;体外试验;抗真菌作用;最低抑菌浓度 Abstract：Objective：ToexaminetheantifungaleffectofdifferentextractionpartsofEuphorbiahumifusainvitro,andmeasuretheminimuminhibitionconcentrations(MIC
3、s).MethodsSeparatedtheDijincaoextractandgotfourpartsbysolventextraction.AppliedthestandarditteeforClinicalLaboratoryStandards(NCCLS)：ReferenceMethodforBrothDilutionAntifungalSusceptibilityTestingofFilamentous,Fungi(M38-A).MICsofdifferentpartsofDijincaoextract
4、against23strainsofmonclinicaldermatophytesextractandpetroleumetherextractcouldnotgetclearanddefiniteMICbecausetheirsolubilitydisturbedthedeterminationofexperiment’sresults.Hoifusaextractpartshaveantifungnalactivityagainstdermatophytesinvitro.Keyifusaextractpa
5、rts;M38-A;antifungaleffect;invitro;MIC 地锦草,维吾尔名为夏塔热其尼(Xiahatereqini)、雅丽蔓(Yalmankulake),为大戟科植物地锦Euphorbiahumifusa38-A)[4],探讨其各部位的体外抗真菌活性。 1材料与方法 1.1药物 地锦草药材由新疆维吾尔医药研究所药剂室提供,经生药学鉴定为大戟科植物地锦草(EuphorbiahumifusaI-1640培养基,美国Sigma公司;三氮吗啡琳丙磺酸(MOPS),美国Sigma公司;沙堡氏琼脂
6、培养基(SDA),批号20080228,北京奥博星生物科技有限公司。 RPMI-1640培养基的配制：将10.4gRPMI-1640和34.53gMOPS粉末溶于900mL蒸馏水中,用1mol/LNaOH溶液调整其pH至7.0(25℃),加蒸馏水定容至1L,G-6漏斗滤过灭菌,存于4℃冰箱备用。 SDA培养基的配制：称取PDA粉末67g,加入1000mL蒸馏水,摇匀加热煮沸溶解,121℃高压灭菌20min,分装,4℃保存,备用。 1.4仪器 BHC-1300ⅡA型生物安全柜,苏州安泰空气技术有限公司;FM
7、spx-250B型生化培养箱,上海福玛试验设备有限公司;LeicaDM-2500型显微镜,德国。 1.5地锦草不同部位的提取分离方法 取地锦草全草10kg,粉碎,加70%乙醇回流提取2次(8、6倍),每次2h,药渣加水煎煮提取1次(10倍,2h),分别滤过,合并醇提液,减压回收至流浸膏状(相对密度1.1,热测),另水提液减压回收至流浸膏状(状态同上)。合并以上醇提及水提浸膏(体积约5～10L,若粘稠可加水稀释),依次用石油醚、氯仿、正丁醇萃取,每种有机溶剂萃取5次,合并有机溶剂萃取液,分别将各有机溶剂萃取液及
8、萃取后的水相减压回收至干,分别得到石油醚、氯仿、正丁醇及水相4个溶剂萃取部位,称重,粉碎,即得。 1.6最低抑菌浓度测定 根据NCCLS推荐的《产孢丝状真菌的液基稀释法抗真菌药物敏感性试验方案》(M38-A)[4],测定地锦草不同萃取部位对23株皮肤癣菌的最低抑菌浓度值(MIC)。 1.6.1抗真菌药物储备液、稀释液的制备称取地锦草各萃取部位分别为204.8mg,用
