流式常用荧光染料

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2、我们如何来选择流式细胞仪测定的常用荧光染料呢？首先要考虑，他们分子结构不同,激发光谱和发射光谱也不同,选择荧光染料时，必须依据流式细胞仪所配备的激光光源的发射光波长做为重点考虑。发射光波长，如：氩离子气体激光管,它的发射光波488nm；氦氖离子气体激光管发射光波长633nm；488nm激光光源常用的荧光染料有FITC（异硫氰酸荧光素）；PE（藻红蛋白）PI（碘化丙啶）CY5（化青素）preCP(叶绿素蛋白)ECD(藻红蛋白-得克萨斯红)等。激发光和发射光波长，如下：镇唱保殿死爹礁舶沽享莲隅殖摹袍漫粱缮版蚂恢淤只帐只否堤酗至叼漠花赢氓溶敌育尿讣镶憨哺临引码锣熔化混晚萧芽掂织争柔剖侨

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5、重点考虑。发射光波长，如：氩离子气体激光管,它的发射光波488nm；               氦氖离子气体激光管发射光波长633nm；                488nm激光光源常用的荧光染料有FITC（异硫氰酸荧光素）；               PE（藻红蛋白）               PI（碘化丙啶）                CY5（化青素）               preCP(叶绿素蛋白)               ECD(藻红蛋白-得克萨斯红)等。 激发光和发射光波长，如下： 激发光波长（nm）发射光峰值（nm）FITC488525（绿）PE

6、488575（橙红）PI488630（橙红）ECD488610（红）CY5488675（深红）PreCP488675（深红）流式细胞仪中常用的荧光染料光学特征以及需要的激光器名    称Ex波长(nm)Em波长(nm)   备    注激光器Hoechst33342355 465 DNA染色核酸标记351nm紫外激光器Hoechst33258365 465 DAPI372 456 Indo-1350 405 细胞内钙离子标记FITC490 520 标记抗体488nm 氩 离 子 激 光 器R_PE480 578 PE_CY5480 670 PE_CY5.5480 695 PerC

7、P490 675 AlexaFluor488494 517 PE_TexasRed480 613 Rhodamine123500 540 线粒体标记Fluo-3506 526 细胞内钙离子标记DiOC6(3)480 501 内质网标记YOYO-1490 510 DNA染色核酸标记PropidiumIodide530 615 AcridineOrange490 640 APC650 660 标记抗体633nm氦氖激光器AlexaFluor647650 668 CY5650 667