微血管发生的扫描电镜观察

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1、微血管发生的扫描电镜观察【摘要】目的探讨胎生大鼠晶体后缘血管膜微血管生成及形成的各种方式,寻求研究血管生成及形成调节因素的最佳方法。方法使用胎生19日及生后3日、6日的Albino大鼠各20只,取出晶体,用H-500扫描电镜观察。结果大鼠晶体血管膜血管发生方式:(1)单向芽生方式;(2)双向芽生方式;(3)胶原及周皮细胞介导的芽生方式;(4)血管母细胞诱导的芽生方式;(5)芽生芽的方式。结论大鼠晶体血管膜是一极好的研究血管发生的实验材料。【关键词】微血管生成微血管形成芽生血管母细胞【Abstract】ObjectiveToexploretheicroangiogene

2、sisandcapillaryformationthatlieintunicavasculosaofcrystalposteriorborderofviviparitalrat.ethodsination;(2)bi-directionalgermination;(3)collagenandpericytemediatedgermination;(4)angioblastinductedgermination;(5)germgerminated.ConclusionThetunicavasculosaofrat’scrystalisagoodmaterialtostu

3、dyangiogenesis.【Keyicroangiogenesiscapillaryformationgerminationangioblast血管发生在许多生物过程中起着非常重要的作用,如生物体的生长发育、创伤愈合、肿瘤发生、浸润与转移等。血管生成与血管形成是两个不同概念。血管生成是指活体组织内原先存在的血管以内皮细胞芽生方式生成新生血管。血管形成是胚胎时期有内皮细胞前体,也称内皮祖细胞或血管母细胞逐渐增生为条索状,最后形成血管。肿瘤内血管形成两种方式都存在。肿瘤瘤体内有血管存在后,不仅是肿瘤生长突然加速,也开始了浸润和转移的生物学行为。因此抑制肿瘤血管形成已经

4、成为治疗恶性肿瘤新途径。研究肿瘤血管生成及形成过程,始终苦于没有连续观察的目的物。经典的方法是用鸡胚卵黄囊膜的血管进行研究,哺乳动物还没有发现有理想的可供连续观察的研究方法。胎生时期,哺乳动物由颈内动脉向眶内玻璃体发出分支,形成玻璃体动脉,抵达晶体后缘,开始了血管生成及血管形成,并形成血管膜来营养晶体[1]。从胎生的不同时期的晶体血管膜可以观察到血管形成的全过程,为肿瘤抑制血管形成研究提供最佳的研究途径。本研究利用描述电镜观察,旨在揭示血管生成及形成的全过程及形态学的不同特点。1材料和方法使用胎生19日及生后3日、6日的Albino大鼠各20只,戊巴比妥腹腔注射麻醉,

5、以PBS水经左心洗净心血管内的血液,当右心耳切口处流出清亮液体时,在灌注3%磷酸缓冲的戊二醛溶液,体视显微镜下取出眼球,稍经戊二醛固定后,用眼科剪仔细剖开并去除球后壁,注意勿伤及晶体后缘。然后投入6N盐酸并振荡加温水解片刻,充水水洗,利用叔丁醇冰冻干燥法干燥,白金镀膜,扫描电镜观察。2结果本研究从晶体血管膜上观察到了以下5种形态各异的生长方式:(1)单向芽生方式:是由原位的毛细血管内皮细胞增生,突破基板形成芽状。有的血管芽顶端形成依附于晶体的翼状基质,有的血管芽顶端有放射状排列的胶原并固定于晶体。(2)双向芽生方式:相邻的两血管相向生芽,在对接处可有玻璃体细胞及其衍生

6、的周皮细胞牵拉覆盖。(3)胶原及周皮细胞介导的芽生方式:相邻的两血管间先有粗大的胶原牵拉,周皮细胞再拉长胞体沿此胶原束向对侧攀缘移动,形成间桥,内皮细胞再在周皮细胞牵引下向对侧增生成芽。有时血管靠的太近,可直接由周皮细胞搭桥,对侧血管壁向下凹陷形成窝,以利于周皮细胞抵达后嵌入,形成稳固的周皮细胞性间桥,便于芽生。(4)血管母细胞参与的芽生方式:血管网间常见有多突的,星状的血管母细胞,它们伸出2个或2个以上的细胞长突搭在邻近和血管壁上。长突抵达处,立即有周皮细胞覆盖于抵达点,有时甚至可见该种细胞伸出超出本胞体十数倍的长突抵达远处的血管。胞体及其长突上亦有周皮细胞附着,新

7、生血管继而沿其长突和胞体形成。(5)芽生芽的方式:在众多血管源性细胞长突伸进原过程中,从其侧面又形成新芽伸向邻近的血管。有趣的是,先形成的芽尚未抵达彼端,周皮细胞已在彼端等待覆盖联接的空隙。上述种种方式交互存在。见图1~4。图110μm×1600单向芽生方式,顶端有翼状基质,新形成血管接头处有周皮样细胞及玻璃体细胞覆盖图210μm×1650对向芽生方式,并对接,并以周皮样细胞,牵拉覆盖图310μm×2000胶原及周皮样细胞介导的芽生方式图410μm×1600血管母细胞参与的芽生方式3讨论胎生时期颈内动脉所发出的血管分支有一支进入眶内形成玻璃体动脉,玻

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