中药天年饮对脾衰老的延缓作用研究

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1、中药天年饮对脾衰老的延缓作用研究作者：陈志宏程丽梅张宏凯谢利德高福禄【摘要】目的观察脾的衰老变化及中药天年饮延缓免疫器官衰老的作用。方法D半乳糖连续腹腔注射建立亚急性衰老的大鼠模型；待模型成功建立后，用药组大鼠给予天年饮灌胃。分别检测各组大鼠血脂和脾脏指数的变化，观察脾增殖细胞核抗原(PA)、p53和p16表达的变化。结果与正常组大鼠比较，模型组大鼠的血脂和脾p53、p16的表达明显升高，模型组的脾脏指数和脾PA的表达明显下降(P＜0.05，P＜0.01)。中药天年饮可明显改善模型大鼠脾的各种变化：与模型组大鼠比较，天年饮

2、用药组大鼠血脂和脾p53、p16的表达明显下降，而脾脏指数和脾PA的表达明显升高(P＜0.05，P＜0.01)。结论天年饮可通过阻止脾脏的萎缩、促进淋巴细胞的增殖能力，提高衰老机体的免疫功能，可能具有延缓衰老的作用。【关键词】衰老；脾；天年饮；PA；p53；p16【Abstract】ObjectiveToobservethesenescentchangesofspleenandtheantiagingeffectsoftraditionalChinesedrugTiannianyinonimmuneorgans.Metho

3、ds30SDratslydividedinto3groupsandeachgrouphad10rats:normal,agingmodelandTiannianyingroups.ThesubacutelyagingmodelratsadebyinjectingDgalintoabdominalcavitycontinually.AftertheagingmodelinistratedTiannianyinbyintragastricadministration.Thebloodlipidandthespleeninde

4、xofratsineachgroupeasured,andtheexpressionsofPA,p53andp16ofspleenalrats,thespleenindexandtheexpressionofPAinspleenofagingmodelratsdecreasedobviously;odelratsincreasedobviously(P＜0.05,P＜0.01).Tiannianyincouldimprovethesenescentchangesinspleenofagingratssignificantly

5、:paredodelrats,thespleenindexandtheexpressionofPAinspleenincreasedremarkablyandthebloodlipid,theexpressionsofp53andp16inspleendecreasedinTiannianyingroupremarkably(P＜0.05,P＜0.01).ConclusionsTiannianyincanimprovetheimmunefunctionofagedbypreventingatropyofspleenandfa

6、cilitatingthereproductiveactivityoflymphocytes,thushasbetterantiagingeffects.【Keyg/kg给药，每天1次，连续40d)制作亚急性衰老的动物模型；模型组大鼠造模成功后不再做任何处理，用药组大鼠造模成功后每天用天年饮灌胃，共30d。1.2药品与试剂天年饮由灸何首乌、怀牛膝、肉从蓉、淫羊藿、丹参、茯苓六味中药组成，煎制后每ml含生药1.5g，按16.2g/kg灌胃给药。检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDLC)含量的试剂

7、盒购自北京中法生物公司；增殖细胞核抗原(proliferatingcellneuclearantigen,PA)、p53、p16免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物工程公司。1.3血脂大鼠经内眦取血，离心后取上清，应用日本日立公司BoehringerMannhein/Hitachi717全自动生化分析仪分别采用酶法和直接法检测TC、TG和HDLC。1.4脾脏指数大鼠称重，断头处死，迅速取出脾脏后去除脂肪、筋膜后称重，计算脾脏指数，脾脏指数=脾脏重量/体重。1.5HE及免疫组化染色称重后的脾脏入Bouin液固定，常规石蜡包埋，连

8、续切片(片厚6μm)，贴于涂有APES的载玻片上。1.5.1HE染色苏木精伊红染色观察脾的组织结构。1.5.2免疫组化染色及定量分析采用SABC免疫组化染色观察大鼠脾PA、p53、p16的表达情况(PA一抗为小鼠抗体，p53、p16一抗均为兔抗体，一抗稀释比例均为1∶100)，以细胞核出