芪丹通脉片预防大鼠急性心肌缺血及对vegf，bfgf表达的影响

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1、芪丹通脉片预防大鼠急性心肌缺血及对VEGF，bFGF表达的影响　　【Abstract】AIM:ToinvestigatethepreventiveeffectsofQiDanTongMaiTablet(QDTMT)onmouseacuteinfarctionanditspossiblemechanism.METHODS:SDmiceaxdosegroupandQDTMTmindosegrouprandomly.DifferentconcentrationsofQDTMTinisteredtothefourgroupsatsamedosagetalmodel.Immu

2、nohistochemistrymethodsproved.QDTMTenhancedtheexpressionofVEGFandbFGF.CONCLUSION:QiDanTongMaiTabletcanpreventacutemyocardialischemiaandenhancetheexpressionofVEGFandbFGF.　　【Keyaitablet;VEGF;bFGF　　【摘要】目的：研究芪丹通脉片(QDTMT)对大鼠急性心肌缺血预防作用及其可能作用机制.方法：采用SD大鼠为研究对象，随机分为假手术组、损伤组、QDTMT大剂量组、QDTMT小剂量组.

3、各组均用生理盐水配置等体积药液灌胃14d，每日2次.冠脉结扎方法制造心肌梗死动物模型，采用心肌酶谱、心梗面积来检测模型，免疫组织化学染色检测缺血心肌血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达.结果：与模型组相比，用药组大鼠血清肌酸激酶同工酶含量降低乳酸脱氢酶［LDH:（946±83）U・L-1,（754±75）U・L-1vs（1582±90）U・L-1,（P<0.01）;CPK:（1135±69）U・L-1,（960±39）U・L-1vs（1513±47）U

4、2539;L-1,（P<0.01)］，心肌梗死面积缩小，VEGF，bFGF表达增加.结论：QDTMT能够预防急性心肌缺血；刺激心肌分泌VEGF，bFGF可能是其重要的作用机制之一.　　【关键词】芪丹通脉片；血管内皮生长因子；碱性成纤维细胞生长因子　　0引言　　VEGF刺激内皮增殖、增强血管通透性，bFGF刺激内皮、SMC和成纤维细胞增生，二者可以协同刺激血管增生对抗组织缺血，也是基因治疗慢性心肌缺血的研究热点.芪丹通脉片(QDTMT)是我们根据祖国传统医学理论建立起来的方剂，具有活血生肌、行气通脉、促进冠状动脉血管生成的作用.但其机制尚不清楚.我们对SD大鼠实

5、施预防性给予QDTMT，观察血清心肌酶含量、心肌梗死面积以及bFGF,VEGF表达量，探讨QDTMT对急性心肌缺血的保护作用及其作用机制.　　1材料和方法　　1.1材料SD大鼠44只，雄性，体质量（220±30）g，第四军医大学实验动物中心提供.QDTMT：主要成分有黄芪、当归、丹参、红花、桂枝；提取清膏干粉，1g干粉相当于2.86g生药；西京医院提供.抗VEGF，bFGF及DAB染色剂购于武汉博士德公司.生物素标记羊抗兔抗体，ABC复合物(第四军医大学神经生物教研室提供).　　1.2方法动物随机分为4组，每组12只.各组体质量方差分析结果显示无差异.①手术对照组（

6、假手术组，生理盐水3mL・kg-1)；②损伤组（心肌缺血模型组，生理盐水3mL・kg-1)；③QDTMT大剂量组（2.0g・kg-1）；④QDTMT小剂量组（1.0g・kg-1）.用生理盐水配置等体积药液并分别灌胃，2次・d-1，连续14d.末次给药1h后，用戊巴比妥麻醉大鼠，气管插管，开胸，距冠状动脉出口5mm处结扎冠状动脉左前降支（LAD），呼吸机维持呼吸.2h后左颈总动脉取血，测定CPK、乳酸脱氢酶(LDH)含量；后断头处死大鼠，将1/2标本立即采用N―BT染色法测定心肌梗死区面积，以梗死区

7、占心室重量的百分比表示梗死面积（IS），观察心肌梗死程度.另一半标本（30只大鼠）取梗死区与非梗死区交界处心肌组织4mm×5mm大小，生理盐水冲洗，40g・L-1多聚甲醛中固定24h，常规石蜡包埋.石蜡切片梯度脱蜡，45mL・L-1的H2O2室温封闭15min；每张滴加1g・100mL-1胰蛋白酶50μL，37℃消化30min；20mL・L-1正常羊血清28℃封闭20min.PBS稀释一抗(bFGF1∶50,VEGF1∶100)，加一抗50μL，阴性对照片加入等量的PBS.湿盒孵育4℃过夜；滴加1∶200稀