人肾透明细胞癌中egfrvⅲ的表达及意义

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1、人肾透明细胞癌中EGFRvⅢ的表达及意义：段小艺，王健生，张明鑫，夏鹏【摘要】目的检测表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在肾透明细胞癌组织中的表达，探讨其与肾透明细胞癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学染色和图像分析法检测80例肾透明细胞癌和24例正常肾组织中EGFRvⅢ的表达水平，进行统计学分析、比较。结果肾透明细胞癌组织和正常肾组织EGFRvⅢ的表达阳性率分别为46%、8%。通过半定量分析，二者EGFRvⅢ平均灰度值分别为148.49±13.05和155.65±14.86，其差异具有统计学意义(t=2.13,P=0.04)；男、女患者EGFRvⅢ

2、的平均灰度值分别为149.01±13.70和147.40±11.76，二者无显著性差异(t=0.54,P=0.59)；EGFRvⅢ表达与年龄无显著相关性(r=0.01,P=0.92)。结论EGFRvIII在肾透明细胞癌组织中存在高表达，与肾透明细胞癌的发生、发展有一定关系。【关键词】表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)；肾透明细胞癌；免疫组织化学；图像分析　　ABSTRACT:ObjectiveTodetectexpressionofepidermalgroansuprarenalepitheliomatoexploreitsrelationentofsu

3、prarenalepithelioma.MethodsImmunohistochemistryandpathologicimageanalysisiquantitativelydetecttheexpressionofEGFRvⅢproteinineightyhumansuprarenalepitheliomatissuesandtalrenaltissues.ResultsPositiveexpressionrateofEGFRvⅢansuprarenalepitheliomatissuesand8%innormalrenaltissues.Theiraver

4、agegrayscalevaluesalesandfemales(149.01±13.70and147.40±11.76,t=0.54,P=0.59).NosignificantassociationansuprarenalepitheliomatissuesexpressEGFRvⅢ.EGFRvⅢmayplaycertainroleinthegenesisanddevelopmentofhumansuprarenalepithelioma.　　KEYalgroa;immunohistochemistry;imageanalysis　　肾癌是目前泌尿外科中常见的

5、恶性肿瘤，而肾透明细胞癌占肾癌的70%-80%，它的发生与发展受到多种基因的调控。表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermalgroalgroed公司产品，1∶100稀释后作为Ⅰ抗(抗体效价为2×102)，生物素Ⅱ抗及DAB显色系统购自武汉博士德生物公司。采用免疫组织化学SABC法进行染色。利用LeicaQ570c真彩图像分析仪(德国)及NikonEclipseE1000采图摄像系统(日本)对染色组织进行图像分析。　　1.3免疫组化染色及图像分析　　免疫组化采用SABC法，石蜡切片常规脱蜡，梯度乙醇脱水，3%(体积分数)H2O2室温灭活30min，微波抗原修复

6、，正常山羊血清封闭30min，加入Ⅰ抗4℃过夜，滴加Ⅱ抗，DAB显色、脱水、透明、封片。用已知的阳性切片作为阳性对照，用PBS代替Ⅰ抗作为阴性对照。　　1.4结果判定　　显微镜下观察，以肿瘤细胞膜或胞质着色棕黄色或棕褐色者为阳性细胞。以每张切片中随机5个高倍镜(×40)视野阳性细胞数≥10%为阳性切片，<10%或未着色者为阴性。每例标本在光镜下随机选择3个高倍视野，采用病理图像分析系统测量每个视野灰度值，计算平均灰度值。灰度值越高表明相应蛋白表达越低，反之则表明相应蛋白表达越高。　　1.5统计学分析　　采用SPSS12.0统计软件中的t检验和Spearma

7、n相关分析对实验所得计数和计量结果进行分析，以P<0.05为差异有统计学意义。　　利用图像分析系统检测肾透明细胞癌和正常肾组织中EGFRvⅢ表达的平均灰度值，通过方差分析和t检验显示肾透明细胞癌EGFRvⅢ的表达较高，差异有统计学意义(P<0.05)。此外，依据性别分组，男、女患者EGFRvⅢ表达水平差异无统计学意义(P>0.05，表2)。表2肾癌和正常肾组织EGFRvⅢ表达的灰度值的比较（略）　　采用Spearman等级相关分析法分析肾透明细胞癌组织EGFRvⅢ表达水平与年龄的关系，结果显示二者无显著相关性(rs=0.01,P=0.92)。　

8、　3讨论EGFR是表皮生