食管鳞癌组织中galectin3与mmp2表达的意义

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1、食管鳞癌组织中galectin3与MMP2表达的意义：石菲，彭贵勇，孙永刚，姚大鹏【摘要】目的：研究galectin3在食管癌组织中的表达及其与基质金属蛋白酶MMP2的表达间的关系.方法：用免疫组化SP法分别检测galectin3和MMP2在80例食管癌和22例正常食管组织中的表达情况.并对肿瘤病理分级、浸润深度及淋巴结转移情况进行统计学分析.结果：食管癌组织中Galectin3蛋白表达率为77.5%，显著高于正常食管组织（27.3%,P<0.05）.Galectin3高表达与食管癌的病理分级、浸润及淋巴结转移有关.Galectin3与MMP2表达呈正相关（

2、P<0.05）.结论：Galectin3在食管癌中表达增强，它的高表达对判断食管癌的恶性程度、浸润甚至转移有重要价值.MMP2的高表达使Galectin3上调.【关键词】食管肿瘤；半乳糖凝集素3；明胶酶A；免疫组织化学0引言Galectins(β半乳糖苷结合蛋白)是生物体内广泛存在的一大类结合蛋白，属于凝集素家族.Galectin3是该家族的重要成员之一，它广泛表达于上皮细胞和免疫细胞，存在于细胞质及胞核内，参与多种生物学过程，如：调节细胞—细胞、细胞—基质间的相互作用，参与细胞的增殖、分化、局部免疫调节和凋亡等，与肿瘤的转移、浸润、生长和黏附密切相关.目前，galec

3、tin3对恶性肿瘤演进的影响作用在前列腺癌、甲状腺癌、结肠癌、胃癌和乳腺癌中已有研究，而它与食管鳞癌的关系鲜有报道.我们探讨galectin3蛋白在食管鳞癌中的表达情况以及其与MMP2的关系.1材料和方法1.1材料第三军医大学西南医院200609/200705手术病理科证实为食管鳞癌标本80例，术前未行放化疗；男47例，女33例.年龄27~80（平均46.6）岁.病理Ⅰ级30例，Ⅱ级32例，Ⅲ级18例；有、无区域淋巴结转移分别为34和46例.取距病变组织5cm以上的食管正常组织22例作正常对照组.采取新鲜标本后，即置于40g/L甲醛液固定过夜，次日取材、脱水、包埋.石蜡连续切

4、片，片厚4μm，行常规HE染色.即用型鼠抗人galectin3mAb为福州迈新生物技术有限公司产品；即用型兔多抗MMP2,SP试剂盒、DAB显色试剂均由北京中杉公司提供.1.2方法免疫组织化学采用SP法，以间变型大细胞淋巴瘤作为阳性对照，PBS代替一抗作阴性空白对照.石蜡切片常规脱蜡至水，用30mL/LH2O2室温下孵育30min（以封闭内源性过氧化物酶），PBS漂洗5min×3次.将切片置于pH6.0的枸橼酸盐缓冲液中，微波炉加热修复抗原20min（温度控制在95～100℃）.取出自然冷却至室温后，用PBS漂洗5min×3次.滴加100mL/L山羊血清室温下孵育30min.倾去

5、血清，滴加一抗，置于湿盒内，4℃冰箱过夜.同法冲洗切片，滴加生物素化二抗工作液，置于湿盒中，37℃孵育25min，同法冲洗切片，滴加链酶亲和素过氧化物酶复合体（三抗），37℃孵育25min，再冲洗切片.滴加DAB显色剂，镜下观察控制反应时间，蒸馏水洗中止，切片苏木素复染，盐酸酒精分化返蓝，脱水封片.galectin3和MMP2均以胞质内出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性染色细胞，采用阳性染色强度结合阳性细胞所占百分比进行判断.在400倍视野下每张切片随机观察4个视野，将切片中平均阳性细胞比例及染色深浅分别计0～3分，切片中无阳性细胞，0分；阳性细胞＜25%，1分；26%～50%，2分；5

6、1%～75%，3分；>75%，4分.染色强度以多数细胞为准：无着色，0分；淡黄色，1分；黄或深黄色，2分；褐或棕褐色，3分.再按这两项指标的积分相加将结果分为4级：0分为“”；1~2分为“+”；3~4分为“”；5～6分为“”.其中“”“”为强阳性表达.统计学处理：运用SPSS11.0统计分析软件，率的比较采用χ2检验，galectin3表达与MMP2表达间的相关性分析采用Spearman秩相关.2结果2.1食管鳞癌组织中galectin3的分布Galectin3阳性信号呈棕黄色颗粒状或线网状染色，大多数病例定位于细胞质（图1A），少数位于间质.Galectin

7、3蛋白在肿瘤组织中呈异质性表达，即在肿瘤的不同区域表现出不同的特点，或弥散分布，或呈小片状、灶状分布，染色强度亦不一致.食管癌组织中galectin3阳性表达率77.5%(62/80)，正常食管黏膜组织中galectin372.7%(16/22)为阴性表达，少数为弱阳性表（27.3%），两者间差异有统计学意义（P<0.05），提示食管癌组织中galectin3高表达.2.3Galectin3表达与MMP2表达的关系MMP2定位