生物分离技术绪论小白

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1、生物分离技术主讲教师：白娣斯教学参考书第一节生物分离的概念和生物材料的来源第二节生物分离技术的特点第三节生物分离的一般工艺过程第四节生物分离技术方法选择原则第五节生物分离技术的发展绪论第一节生物分离纯化的概念及生物材料的来源生物分离：指从发酵液、酶反应液或动植物组织细胞培养液中分离、纯化生物产品的过程。一、生物物质及来源1.生物物质：来源于生物中天然的或利用现代生物工程技术以生物为载体合成的，从氨基酸、多肽等低相对分子质量化合物到病毒、微生物活体制剂等具有复杂结构和成分的一类物质。一、生物物质及来源氨基酸及其衍生物类活性多肽类蛋白质类酶类1234动物器官或组织制剂小

2、动物制剂菌体制剂核酸及其降解物糖类脂质2.生物物质来源：动物脏器；血液、分泌物和其他代谢产物海洋生物：主要是海藻动物、鱼类、软体动物等植物：生化成分众多微生物：主要有细菌、放线菌、真菌和酵母菌二、分离纯化技术上游：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程及组织工程。下游：生物产品的回收——生物分离与纯化技术，主要包括离心技术、细胞破碎技术、萃取技术、固相析出技术、色谱技术和膜分离技术等。三、分离纯化基本原理生物材料生物材料上游加工非均相混合物均相混合物有效识别混合物中不同组分间物理、化学和生物学性质的差别，利用能够识别这些差别的分离介质或扩大这些差别的分离设备来实现组分

3、间的分离或目标产物的纯化。分离纯化的本质：第二节生物分离技术的特点生物材料容易变质，保存困难终极产品质量标准高目标产物浓度低、分离纯化困难活性物质性质不稳定，操作过程容易失活生物材料中的生化组分数量大，分离困难1.2.3.4.5.按生产过程的性质划分，分离与纯化工艺过程可划分为四个阶段：①分离与纯化前的预处理②提取③精制④成品加工第三节生物分离的一般工艺过程发酵液的预处理颗粒性杂质的去除可溶性杂质的去除和初步纯化目标产物的精制成品加工生物分离的一般工艺过程加热；调pH；凝聚；絮凝离心分离；萃取；过滤沉淀；吸附；萃取；膜过滤吸附色谱；分配色谱；离子交换；凝胶色谱；亲和

4、色谱；液相色谱无菌过滤；超滤；冷冻干燥；真空干燥；喷雾干燥；结晶（沉淀、吸附、萃取、超滤、结晶）发酵液初步纯化细胞碎片分离细胞破碎细胞分离高度纯化成品加工预处理胞外产物（加热、调pH、絮凝）（过滤、离心分离、膜分离)（匀浆、研磨、酶解）（离心分离、双水相萃取、膜分离）（重结晶、离子交换、色谱分离、膜分离）（浓缩、无菌过滤、干燥、成型）胞内产物提取精制下游加工过程的一般流程1.分离纯化前的预处理预处理是分离纯化操作的第一步。利用凝聚、絮凝、沉淀等技术，除去部分杂质，改变流体特性，以利于固-液分离；经离心分离、膜分离等固-液分离操作后，分别获得固相和液相。2.提取提取为

5、分离纯化操作的主要步骤。利用超滤、萃取、吸附、离子交换等分离技术进行提取操作，除去与产物性质差异较大的杂质，提高目标物浓度。3.精制采用结晶、色谱分离、冷冻干燥等对产物有较高选择性的纯化技术，除去与目标物性质相近的杂质。4.成品加工精制后进行无菌过滤和去热源、干燥、造粒、分离过筛等成品加工操作，经检验合格后包装。上述分离与纯化过程可划分为两部分：初步分离和高度纯化。其中包含多种分离纯化技术，其中一些分离纯化技术既可用于初步分离过程，又可用于高度纯化过程。第四节分离纯化方法选择的原则技术路线、工艺流程尽量简单化；尽可能采用低成本的材料与设备；将完整工艺流程划分为不同的

6、工序；注意时效性；采用成熟技术和可靠设备；做好准备工作；检测纯化过程中产物产量和活性SeneciovulgarisL浸渍浓缩萃取层析结构鉴定三.实验步骤三、分离纯化的原材料选择与成品保存1.原材料的选择(1)来源(2)与目标产物含量相关的因素①合适的生物品种②合适的组织器官③生物材料的种属特异性④合适的生长发育阶段⑤合适的生理状态2.天然生物材料的采后处理处理原因：3.成品的保存空气温度保存期pH水分光线影响因素保存方法：①低温下保存②制成干粉或结晶保存四、分离纯化的准备工作1.软件材料的准备2.硬件材料的准备六、分离纯化技术的综合运用与工艺放大1.建立在制品、半制

7、品成品上的检测方法是工艺优化的前提。在线检测数据检测放行检测2.明确优化工艺的评判标准，处理好收率、纯度、经济性之间的平衡收率和纯度之间、经济性的平衡色谱纯99.9（％）分析纯99.5（％）七、分离纯化的中试放大1.原料确定3.收率重复性好2.工艺路线、操作条件确定4.检测、处理方法确定小试中试工业化生产八、生物药品生产工艺的验证1.药品生产验证2.生产工艺验证第五节生物分离纯化技术的发展一、生物分离纯化技术的发展历史1.古代传统制造业每500克藏红花粉的最高售价达到5500美元2.原始分离纯化时期（第一代生物技术产品）3.传统分离纯化方法推广使用时期(传统第二