消毒灭菌、噬菌体.ppt

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1、第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全目的要求掌握：消毒、灭菌、抑菌、无菌、防腐、无菌操作的概念；熟悉：高压灭菌、紫外线及滤过除菌法的应用范围。1、灭菌（sterilization）：杀死物体上所有微生物（包括芽胞）的方法。2、消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。消毒剂：用于消毒的化学药品。常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。3、防腐（antisepsis）：防止或抑制微生物的生长的方法。防腐剂：用于防腐的化学药品。第一节消毒灭菌常用术语4、清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一切污秽以减

2、少微生物数量的过程。5、无菌（asepsis）和无菌操作：无菌是无活的M存在，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒灭菌法（一）热力灭菌法高温对细菌有明显的致死作用：蛋白质变性；核酸断裂。1、干热灭菌法杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性。（1）焚烧废弃物品或动物尸体等。（2）烧灼接种环、试管口等的灭菌。（3）干烤利用干烤箱灭菌（160~170ºC，2h），适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品（4）红外线是一种0.77~1000μm波长的电磁波，尤以1~10μm波长的热

3、效应最强。热效应只能在照射到的表面产生。与干烤相似，多用于医疗器械的灭菌。2、湿热灭菌法最常用，效果优于干热灭菌法。同样条件下湿热效果强于干热的原因：湿热的穿透力强热蒸汽有潜能蛋白质含水量越多越容易变性1、高压蒸汽灭菌法：103.42Kpa经121.3℃，维持15—30分钟，适用于耐高压和湿热的物品，如培养基、手术衣、手术器械等。高压蒸汽灭菌器2、巴氏消毒法：61.1—62.8℃持续30分钟或71.7℃持续30秒，用于酒类和乳制品的消毒。3、流通蒸汽消毒法：利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒。细菌繁殖体15~30min可被杀灭

4、。4、间歇蒸气灭菌法利用反复多次的流动蒸汽间歇加热以达到灭菌的目的。适用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基。5、煮沸法：100℃持续5—10分钟，可用于手术器械、食具的消毒。水中加入2%碳酸氢钠，既可提高沸点达105ºC，促进杀灭细菌的芽胞，又可防止金属器皿生锈。（二）辐射杀菌法1、紫外线：（1）原理：干扰DNA复制（使细菌DNA形成胸腺嘧啶二聚体），从而导致细菌死亡。（2）杀菌特点：265nm波长的紫外线杀菌力最强，但是穿透力较弱。（3）应用：物体表面和空气的消毒。（4）紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用。2、电离辐射：（1）原理：x射

5、线、γ射线、高速电子等产生游离基，破坏DNA。（2）应用：用于不耐热塑料、橡胶制品、中草药及食品的灭菌。3．微波波长为1~1000mm的电磁波。可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物质，但不能穿透金属表面。主要用于食品、非金属器械、检验室用品、无菌室和病室中食品用具、药杯及其他用品的消毒。（三）滤过除菌法用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌，达到无菌的目的。所用的器具是滤菌器（薄膜滤菌器、玻璃滤菌器、石棉滤菌器、素陶瓷滤菌器）。主要用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。滤器和生物洁净室（四）超声波消毒法不被人耳感受的高于

6、20kHz/s的声波，称为超声波。超声波可裂解多数细菌，尤其是G-菌。主要用于粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等。如超声振荡仪（五）干燥和低温抑菌法低温：保存菌种。1、冰箱2、液氮罐3、冷冻真空干燥法：为目前最好的保存菌种的方法，可保存数年至数十年。二、化学消毒灭菌法（一）常用消毒剂的杀菌机制：1、促进菌体蛋白质变性或凝固。2、使微生物细胞成分氧化、水解。3、干扰和破坏细菌酶的活性。4、损伤细菌的细胞膜。常用消毒剂的种类、浓度和用途－1类型名称浓度用途消毒剂氧化剂高锰酸钾0.1％~0.5%皮肤粘膜消毒过氧化氢3％～25％创口皮肤消

7、毒过氧乙酸0.1％～2％塑料玻璃器材醇类乙醇70%～80％皮肤消毒酚类石炭酸2％～5％地面器械来苏2％～5％表面醛类甲醛3％～8％室内空气熏蒸戊二醛2％内镜消毒常用消毒剂的种类、浓度和用途－2类型名称浓度用途卤素氯化合物100～1000ppm饮水、游泳池自由氯/L碘化物30～50ppm皮肤消毒烷基环氧乙烷450～1200mg/L手术器械敷料双氯苯双胍0.5％～4％皮肤粘膜己烷洗必泰表面新洁尔灭0.05％～0.1％皮肤粘膜器械活性剂杜灭酚0.05％～0.1％皮肤创口器械（二）化学消毒按杀菌能力剂分三类：1、高效消毒剂（high-lev

8、eldisinfectants）（1）含氯消毒剂；（2）过氧化物消毒剂；（3）醛类消毒剂；（4）环氧乙烷2、中效消毒剂（intermediate-leveldisinfectants）（1）含碘消毒剂；（2）醇类消毒剂3、低效消毒剂（