第四章 dnaman使用方法

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1、第四章DNAMAN使用方法1.将待分析序列装入Channel2.以不同形式显示序列3.DNA序列的限制性酶切位点分析4.DNA序列比对分析5.序列同源性分析6.PCR引物设计7.质粒模式图绘制DNAMAN使用方法DNAMAN是一种常用的核酸序列分析软件。由于它功能强大,使用方便,已成为普遍使用的DNA序列分析工具。以DNAMAN5.2.9Demoversion为例,简单介绍其使用方法。打开DNAMAN,可以看到如下界面:第一栏为主菜单栏。除了帮助菜单外,有九个常用主菜单,第二栏为工具栏:第三栏为浏览器栏:在浏览器栏下方的工作区左侧,可见Channel工具条,

2、DNAMAN提供20个Channel,点击Channel工具条上相应的数字,即可击活相应的Channel。每个Channel可以装入一个序列。将要分析的序列(DNA序列或氨基酸序列)放入Channel中可以节约存取序列时间,加快分析速度。此版本DNAMAN提供自动载入功能,用户只需激活某个Channel,然后打开一个序列文件,则打开的序列自动载入被激活的Channel中。以具体使用DNAMAN的过程为例来说明如何使用DNAMAN分析序列。1.将待分析序列装入Channel(1)通过File/Open命令打开待分析序列文件,则打开的序列自动装入默认Channe

3、l。(2)通过Sequence/LoadSequence菜单的子菜单打开文件或将选定的部分序列装入Channel。通过Sequence/CurrentSequence/AnalysisDefination命令打开一个对话框,通过此对话框可以设定序列的性质(DNA或蛋白质),名称,和要分析的片段等参数。2.以不同形式显示序列通过Sequence//DisplaySequence命令打开对话框,如图所示:根据不同的需要,可以选择显示不同的序列转换形式。对话框选项说明如下:Sequence&Composition:显示序列和成分ReverseComplementS

4、equence:显示待分析序列的反向互补序列ReverseSequence:显示待分析序列的反向序列ComplementSequence:显示待分析序列的互补序列DoubleStrandedSequence:显示待分析序列的双链序列RNASequence:显示待分析序列的对应RNA序列3.DNA序列的限制性酶切位点分析将待分析的序列装入Channel,点击要分析的Channel,然后通过Restriction/Analysis命令打开对话框,如下所示:按扭,出现下列对话框:参数说明如下:Results分析结果显示其中包括:Showsummary:显示概要,S

5、howsitesonsequence:在结果中显示酶切位点Drawrestrictionmap:显示限制性酶切图,Drawrestrictionpattern:显示限制性酶切模式图Ignoreenzymeswithmorethan:忽略大于某设定值的酶切位点Ignoreenzymeswithlessthan:忽略小于某设定值的酶切位点TargetDNA:目标DNA特性Circular:环型DNA,dam/dcmmethylation:dam/dcm甲基化allDNAinSequenceChannel(选择此项,在SequenceChannel中的所有序列将被

6、分析,如果选择了Drawrestrictionpattern,那么当所有的channel中共有两条DNA时,则只能选择两个酶分析,如果共有三个以上DNA时,则只能用一个酶分析。选择所需的项目,然后按提示操作点击按扭,出现下列对话框:Enzyme:代表enzymedatafile,点击旁边的下拉按钮,出现两个默认选项,restrict.enz和dnamane.enz,如果添加过自制的酶列表,则附加显示自制酶列表文件名。其中restrict.enz数据文件包含180种限制酶,dnamane.enz数据文件包含2524种限制酶。选择其中一个数据文件,相应的酶在左边

7、的显示框中列出(按酶名称字母表顺序),鼠标双击酶名称,则对应的酶被选中,在右边空白框中列出。要自制酶切列表,可以从左边酶列表中双击鼠标选择多种酶(例如puc18multiplecloningsites),然后点击按钮出现下列对话框:按钮出现下列对话框:输入要保存酶列表的文件名,点击按钮即可保存。自制酶列表可以方便分析特定的酶切位点。Cutter酶切识别序列长度;End酶切产生的末端,其中包括,Blunt(平头末端),5’Overhang(5’突出粘性末端),3’Overhang(3’突出粘性末端),系统根据cutter和end的设定情况,在左边酶列表中显示符

8、合条件的酶。最后,点击按钮执行操作。4.DNA序列比

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