经颅重复性低频磁刺激后大鼠海马δfosb阳性标记的变化论文

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1、经颅重复性低频磁刺激后大鼠海马ΔFosB阳性标记的变化论文.freelT的磁刺激（美国Magstim公司），每日一次，每次10min，共14d.最后一次刺激后24h，灌注动物并取脑，经海马冠状切片，免疫组织化学ABC法检测海马各区ΔFosB免疫阳性产物的表达.结果rTMS后.freelagicfields;hippocampi;FosB;ΔFosB;immunohistochemistryAbstract:AIMToobservetheeffectsofrepetitivetranscra-nialmagi

2、cstimulation（rTMS）onΔFosBexpressionsinrathippocampi.METHODSSDratsTeslatranscranialmagicstimula-tionfor14d，10minuteseachdayandthenΔFosBexpres-sionsinhippocampimunohistochemically.RESULTSHighanddeeplystainedΔFosBexpressionspiofexperimentalrats，mainlylocatedi

3、nthegranulecelllayerofdentategyrusandpyramidalcelllay-erofCA1area.NoΔFosBimmunoreactivenucleials，feulateinthehippocampientoftranscranialmagicstimulation，ayplaysomeimportantrolesintreatingneuropsy-chologicaldiseasesbymediatinglong-lastingneuralandbe-haviora

4、lplasticity.0引言经颅磁刺激（TMS）已被广泛应用于神经系统运动通路功能的检查，近年来发现经颅重复性磁刺激（rTMS）能够替代电刺激方法来治疗抑郁症患者［1，2］，还明显改善与帕金森氏病相伴随的情感、认知及睡眠等障碍［3-5］，但其对脑长时程影响的神经生物学基础尚不明了.Fos基因家族转录因子如c-fos，fosb，Δfosb（又称为fosb2），fra-1及fra-2等，在不同刺激作用于脑而引起的转录反应过程中发挥着重要的作用.实验表明，对慢性而非急性的刺激如应用可卡因、吗啡、尼古丁及抗抑郁和

5、抗精神类药物［6］，或予以慢性电刺激诱发惊厥（ECSs）［7］等，能引起35和37kuFos样蛋白，又被称为慢性Fos相关性抗原（FRAs）在脑内的特定区域不同程度的表达，较之急性刺激后诱发的其他Fos样蛋白相对稳定且在脑内存留时间较长，如在慢性ECS大鼠的纹状体及前额叶可存留至少2的圆形磁刺激探头下，予以1Hz，100mT的磁刺激（美国Magstim公司），每日一次，每次10min，共14d.对照组动物除不予磁刺激外，余处理方法同实验组动物.1.3组织固定与免疫组织化学步骤最后一次刺激24h后，动物腹腔内

6、注射戊巴比妥钠（40mgkg-1）麻醉并经左心室依次灌入生理盐水100mL，40gL-1多聚甲醛液（溶于pH7.4，0.1molL-1的磷酸缓冲液）500mL（1.5～2h），立即取脑并浸入200gL-1蔗糖液中过夜（4℃）.冰冻切30μm厚的纹状体冠状切片，每4张取一张，切片置于含有0.01molL-1，pH7.4的磷酸盐缓冲液（KPBS）的小瓶中，用ABC法进行免疫组化染色:将切片浸入兔抗FosB血清（11000，SantaCreuz;稀释于含有10gL-1小牛血清白蛋白，2.5gL-1TritonX-

7、100和1gL-1叠氮钠的KPBS中）48h，随后依次进入生物素化抗兔IgG（1500，Sigma）和ABC（1500，Sigma）中室温下各孵育2h，继之用葡萄糖氧化酶-DAB-镍法将免疫产物显为黑色.未在孵育过程中省略了一抗的空白对照切片上发现免疫阳性标记的细胞.免疫组织化学染色后，将切片裱于明胶处理的载玻片上，梯度酒精脱水，二甲苯透明，D.P.X树胶封片.2结果2.1动物行为实验组动物在摄食、饮水、睡眠及体质量等方面与对照组动物未见有何差别，磁刺激后未引出惊厥等异常.2.2海马ΔFosB的表达经颅重复

8、性磁刺激14d后，大鼠的海马齿状回（DG）及CA1区出现密集分布的染色较深的核性ΔFosB免疫阳性标记物，而CA2及CA3区则未见到免疫阳性标记物的出现（Fig1）.其中海马CA1区的阳性标记密集于锥体细胞层（pcl），多型细胞层（so）、透明层（sl）和放射层（sr）则无免疫阳性细胞（Fig3）;齿状回的免疫阳性标记物主要集中于颗粒细胞层（GL），而分子层（ML）和多型细胞层（PoDG）没有出现阳性的免疫标记物