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《猪轮状病毒腹泻病的诊断方法研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、猪轮状病毒腹泻病的诊断方法研究i猪轮状病毒腹泻病的诊断方法研究陈元坤.周小平,周联(1.成都乾坤动物药业有限公司,四川成都6l1130;2.重庆市垫江县动物卫生监督所,重庆垫江408300)中图分类号:$854.4文献标识码:A文章编号:1001—8964(2011)04-0029-02摘要:猪轮状病毒性腹泻病主要引起猪的腹泻,对幼龄猪危害最大,以4周龄仔猪最易感.本文对猪轮状病毒腹泻病的临床诊断,电镜观察诊断,免疫学诊断以及基因分子诊断等方法的研究状况作了详细的论述.关键词:轮状病毒;腹泻;仔猪Research
2、advancesondiagnosticmethodsofrotavirusdiarrheainporcineCHENYuan—kun,ZHOUXiao—ping~,ZHOULian(1.QiankunAnimalMedicineCo.,Ltd.,SichuanChengdu6l1130,China;2.ChongqingDianjiangAnimalHealthSupervisionCenter,ChongqingDianjiang408300,China)Abstract:Porcinerotavirusdi
3、arrheacausesthediarrheaifipigs,especiallythepiglets,andthe4一weekpigletsarethemostsusceptibletothisdisease.Thisarticledescribedthediagnosticmethodsofporcinerotavirusdiarrhea,whichcontainingclinicaldiagnosis,electronmicroscopydiagnosis,immunologyandmoleculardia
4、gnosticmethods.Keywords:Rotavirus;Diarrhea;Piglet1临床诊断轮状病毒(RV)感染猪只以精神萎靡,厌食,呕吐,腹泻及脱水为特征,最后因脱水严重,水盐代谢失调而死亡.剖解发现病变只限于消化道,胃内充满乳凝块,小肠内有灰黄或灰黑粪便,有的小肠广泛出血,小肠淋巴结肿胀.电镜切片观察可见小肠绒毛萎缩,柱状上皮被鳞状或立方上皮所代替.2电镜观察诊断(EM)取腹泻粪汁或后段小肠内容物,制样,用磷钨酸负染后电镜观察.若发现轮状病毒形态的病毒颗粒,收稿日期:201l_O1一l6作者简
5、介:陈元坤(1982一),女,重庆荣昌人,硕士研究生,主要从事新兽药研究开发,兽医传染病病原及抗体检测方面的工作.即可判为阳性.此法操作简便,可以直接观察到猪轮状病毒颗粒,结果可靠.但电镜法在基层难以推广.3免疫学诊断3.1免疫抗体实验诊断取腹泻早期的仔猪十二指肠,空肠,回肠黏膜作涂片,用冷丙酮固定,然后用荧光素标记特异荧光抗体于室温下染色,冲洗后在荧光显微镜下检查,如见到阳性荧光细胞即可诊断为该病.本法是国内外最常用,也是最快速的常规检测方法.3.2ELISA诊断ELISA是世界卫生组织推荐使用的诊断轮状病毒的
6、标准方法,该方法灵敏度高,特异性好,便宜,操作简便,试剂保存时间长,且每次试验必须有阳性对照.近年发展了Dot—ELISA,快速ELISA等方法,也具有较高的灵敏度,且只需要很少的试剂,四川斋牧兽医?2011?4期?总第246期匮曩目目;,==.时间短,操作简单,可以检测粪便上清液中的病毒抗原.实验证明用ELISA检测粪便样品中的轮状病毒是有效的,而且该方法在流行病学调查中十分有用,但是还需要其他技术来进一步确实.RodakL等(2004)制备A组轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体,使用3种改良的阻断ELISA方法来
7、检测A组轮状病毒.使用竞争阻断EuSA(CB—ELISA)和电镜检测的方法检测194头感染痢疾的仔猪粪便.用CB—ELISA在43个样品中检测到轮状病毒的比例为22.2%,而用电镜检测的方法只在26个样品中检测到轮状病毒(比例占13.4%):用商用ELISA试剂盒和CB—ELISA作对比,检测了包含流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒的样品,以此证明CB—ELISA的特异性币晦感性.当被检测的样品中含有螯合剂时对CB—ELISA的敏感性有明显影响.3.3乳胶凝集试验(LA)诊断乳胶凝集试验通过抗轮状病毒抗原抗体包被的
8、乳胶颗粒与粪便中的病毒抗原发生抗原抗体反应,产生可见的乳胶颗粒凝集以检测轮状病毒抗原.该方法通常比较准确,操作时间短,不需要特殊的仪器设备,被广泛应用于常规的轮状病毒检测,但是该方法需要高度熟练的技术来判断凝集结果,特别当凝胶乳胶比较小时.为了提高LA的灵敏度,可以采用超声波来悬浮病毒颗粒.乳胶光密度免疫方法(LPIA)也是乳胶凝集试验的一种新方法,可以测量粪便中病毒的含
