常规化验标准步骤

《常规化验标准步骤》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、饲料中粗蛋白测定方法（畜禽饲料与添加剂） 本标准参照采用ISO5983―1979《动物饲料——氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。1主题内容与适用范围 本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。2引用标准 GB601化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备3原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。4试剂4.1硫酸（GB625）：化学纯，含量为98％，无氮。4.2混合催化剂：0.

2、4g硫酸铜，5个结晶水（GB665），6g硫酸钾（HG3—920）或硫酸钠（HG3—908），均为化学纯，磨碎混匀。4.3氢氧化钠（GB629）：化学纯，40％水溶液（m／V）。4.4硼酸（GB628）：化学纯，2％水溶液（m／V）。4.5混合指示剂：甲基红（HG3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。4.6盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。4.6.1盐酸标准溶液：c（HCl）＝0.1mol／L。8.3mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。4.6.2盐酸标准溶

3、液：c（HCl）＝0.02mol／L。1.67mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。4.7蔗糖（HG3—1001）：分析纯。4.8硫酸铵（GB1396）：分析纯，干燥。4.9硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。5仪器设备5.1实验室用样品粉碎机或研钵。5.2分样筛：孔径0.45mm（40目）。5.3分析天平：感量0.0001g。5.4消煮炉或电炉。5.5滴定管：酸式，10、25mL。5.6凯氏烧瓶：250mL。

4、5.7凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式。5.8锥形瓶：150、250mL。5.9容量瓶：100mL。5.10消煮管：250mL。5.11定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动，全自动蛋白质测定仪。6试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。7分析步骤7.1仲裁法7.1.1试样的消煮称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶（5.6）中，加入6.4g混合催化剂（4.2），与试样混合均匀，再加入12mL硫酸（4.1）和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶（5.6）置于

5、电炉（5.4）上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。7.1.2氨的蒸馏（蒸馏步骤的检验见附录A）7.1.2.1常量蒸馏法 将试样消煮液（7.1.1）冷却，加入60～100mL蒸馏水，摇匀，冷却。将蒸馏装置（5.7）的冷凝管末端浸入装有25mL硼酸（4.4）吸收液和2滴混合指示剂（4.5）的锥形瓶内。然后小心地向凯氏烧瓶（5.6）中加入50mL氢氧化钠溶液（4.3），轻轻摇动凯氏烧瓶（5.6），使溶液混匀后再加热蒸馏，直至流出液体积为100mL。降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1～2min

6、，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。7.1.2.2半微量蒸馏法 将试样消煮液（7.1.1）冷却，加入20mL蒸馏水，转入100mL容量瓶中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，做为试样分解液。将半微量蒸馏装置（5.7）的冷凝管末端浸入装有20mL硼酸（4.4）吸收液和2滴混合指示剂（4.5）的锥形瓶（5.8）内。蒸汽发生器（5.7）的水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需补加硫酸。准确移取试样分解液10～20mL注入蒸馏装置（5.7）的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口玻璃塞，再加10mL氢氧化钠溶液（4.3）

7、，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口处加水密封，防止漏气。蒸馏4min降下锥形瓶（5.8）使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1min，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。 注：7.1.2.1和7.1.2.2蒸馏法测定结果相近，可任选一种。7.1.2.3蒸馏步骤的检验 精确称取0.2g硫酸铵（4.8），代替试样，按7.1.2或7.2.2步骤进行操作，测得硫酸铵含氮量为21.19±0.2％，否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。7.1.3滴定 用7.1.2.1或7.