肿节风药材采收部位与最佳采收期的研究论文

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1、肿节风药材采收部位与最佳采收期的研究论文李成仁王园园李小艳宋晓虹韦琪生蒋林叶创兴【摘要】目的确定肿节风药材的采收部位与最佳采收期。方法分别将采得的不同季节肿节风药材分为根、茎、叶3部分，以60%乙醇为溶剂回流提取。采用高效液相色谱法测定不同季节肿节风药材各部位中反丁烯二酸和异嗪皮啶的含量；以紫外分光光度法测定其总黄酮的含量。结果肿节风药材叶中总黄酮含量最高，茎中反丁烯二酸含量最高，根中异嗪皮啶含量最高，综合考虑3种有效成分，以6月、8月含量最高。结论6月、8月份为肿节风药材的最佳采收期，以全株采收为宜。【关键词】肿节风药效成分采收期采收部位肿节风为金粟兰科植物草珊瑚Sarcan

2、draglabra(Thunb.)Nakai的干燥全草，又名九节茶、接骨木等.freelg，置于50ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为0.4mg/ml芦丁对照品溶液［5］。2.1.2反丁烯二酸与异嗪皮啶对照品溶液精确称取反丁烯二酸对照品7.5mg，异嗪皮啶对照品1.8mg，置25ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液(含反丁烯二酸0.3mg/ml，异嗪皮啶0.072mg/ml)。2.2供试品溶液的制备准确称取干燥，粉碎，过3号筛的肿节风药材根、茎、叶粉末各0.5g，置250ml烧瓶中，按1∶30的料液比分别加入60%乙醇回流提取1

3、h，过滤后重复提取2次，合并滤液，减压浓缩至干，以蒸馏水溶解残物，定容至25ml，备用。2.3总黄酮测定波长的选择取芦丁对照品溶液0.5ml，置10ml容量瓶中，用30%的乙醇补充至5ml，加入5%NaNO2溶液0.3ml，放置5min，加入10%Al(NO3)3溶液0.3ml，6min后加入4%NaOH溶液2.0ml，此时溶液显红色，混匀后以30%乙醇稀释至刻度，静置10min后于紫外分光光度计下进行全波长光谱扫描，在500nm处有最大吸收值，因此以500nm作为总黄酮的检测波长。2.4色谱条件色谱柱为AgilentHypersilODSC18柱（4.6mm×250mm，5μ

4、m）；流动相A为0.05%磷酸水溶液；流动相B为乙腈；检测波长210nm；柱温35℃。梯度条件0～8min流动相B5%；8～30minB5%～12%；30～45minB12%～19%。经测试，样品峰分离度在1.5以上，反丁烯二酸理论塔板数在5000以上，异嗪皮啶理论塔板数在10000以上。2.5标准曲线的绘制2.5.1总黄酮标准曲线分别取芦丁对照品溶液0，0.25，0.5，0.75，1.25，1.5ml于10ml的容量瓶中，按“2.3”项下方法处理后，于紫外分光光度计下测定吸光值，检测波长500nm。以标样浓度为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线，得到回归方程Y=9.4975X

5、+0.0413,r=0.9999，线性范围：0.01～0.06mg/ml。2.5.2反丁烯二酸与异嗪皮啶标准曲线精确吸取体积为0.04，0.2，0.4，2，4，6，8ml的反丁烯二酸与异嗪皮啶混合对照品溶液于25ml的容量瓶中，加水稀释至刻度，定容后以0.45μm微孔滤膜过滤，精确吸取20μl，注入高效液相色谱仪测定。以进样质量为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准曲线，分别得反丁烯二酸和异嗪皮啶的回归方程为：Y=6966848.6362X+702737.2867，r=0.9996；Y=14391526.5254X+221002.0133，r=0.9998；线性范围：反丁烯二酸0.

6、024～4.8μg；异嗪皮啶0.006～1.152μg。2.6方法学考察2.6.1总黄酮方法学考察精密度实验：取肿节风药材全株样品，按“2.2”项下所述方法制备样品溶液，按“2.3”项下方法处理并测定500nm处吸光值，连续测量5次，以总黄酮含量计算，RSD为2.49%，表明该法精密度良好。重复性实验：取同一批药材全株样品6份,按“2.2”项下所述方法法制备样品溶液，按“2.4”项下所述方法进行测定，以总黄酮含量计算，RSD=2.53%，表明方法的重复性良好。稳定性实验：取同一批药材全株样品，按“2.2”项下所述方法法制备样品溶液，3h内每隔30min以“2.3”项下方法进行测

7、定，其结果RSD=1.58%，表明样品在3h内稳定。加样回收率实验：取已知含量的肿节风样品，加入一定量对照品，按“2.2”项下方法制备样品溶液，按“2.3”项下方法处理后测定吸光值，得总黄酮的平均回收率为101.8%,RSD=3.44%。2.6.2反丁烯二酸与异嗪皮啶方法学考察精密度实验：取肿节风药材全株样品，按“2.2”项下所述方法制备样品溶液，重复进样5次，记录峰面积比值，反丁烯二酸和异嗪皮啶的RSD值分别为1.43%和2.35%，表明仪器的精密度好。重复性实验：取同一批肿节风药材样品6