瘦肉精三联快速检测卡的质量检测试验

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1、瘦肉精三联快速检测卡的质量检测试验　　瘦肉精是一类人工合成的β-受体激动剂，因其可以提高瘦肉率和促进动物生长，而被一些畜牧养殖户和养殖企业作为养殖促进剂使用[1].根据其结构差异可分为克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇。人食用了饲喂瘦肉精的禽畜产品后，会引起食物中毒[2,3],我国农业部公告第235号规定严禁在畜牧生产中使用各种β-受体激动剂类药物。目前，市售瘦肉精三联快速检测卡大多可同时测定猪尿中的克伦特罗（检测限为3.0μg/L）、莱克多巴胺（检测限为5.0μg/L）和沙丁胺醇（检测限为10.0μg/L）.本试验对市售6个不同厂家生产的瘦肉精三

2、联快速检测卡进行质量检测，以为评价和控制快速检测卡质量提供依据[4,5].　　1材料与方法　　1.1仪器与试药　　　　1.1.1仪器天平：感量0.01g;分析天平：感量0.00001g;超高效液相-串联质谱仪：RM）;离子源温度150℃;脱溶剂温度500℃;脱溶剂氮气流速1000L/h;毛细管电压3kV.测试药物定性、定量离子对及对应的锥孔电压和碰撞能量见表1.　　1.2.3样品制备　　　　①阴性样品的制备。取本实验室仪器方法确证为克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇阴性的猪尿，于5000r/min离心5min,取上清液，备用。　　②标准储备液的制备。分别精密称取盐酸克伦特罗、盐酸莱克多

3、巴胺和沙丁胺醇对照品10mg,加甲醇定容至10mL,配制成浓度各约为1mg/mL的标准储备液。【1】　　　　③混合对照品工作液的制备。分别吸取适量标准储备液，用0.2%甲酸水溶液稀释成浓度为1μg/mL的对照品工作液。　　④阳性添加样品的制备。分别准确吸取100ng/mL的克伦特罗工作液20、30、50μL于980、970、950μL的空白猪尿中，配置成浓度为2.0、3.0、5.0μg/L的盐酸克伦特罗阳性添加样品；分别准确吸取100ng/mL的莱克多巴胺工作液30、50、70μL于970、950、930μL的空白猪尿中，配置成浓度为3.0、5.

4、0、7.0μg/L的莱克多巴胺阳性添加样品；分别准确吸取100ng/mL的沙丁胺醇工作液70、100、120μL于930、900、880μL的空白猪尿中，配置成浓度为7.0、10.0、12.0μg/L的沙丁胺醇阳性添加样品。每种药物每个浓度配制20个样品。　　1.2.4样品前处理取澄清尿样待检，如尿样浑浊，可在室温4000r/min条件下离心5min处理后，取上清待检。共2页:12　　1.2.5检测步骤　　　　①从包装铝箔袋中取出检测卡，在1h内使用。　　②将所需检测卡放于平面，与对应样品编号，用吸管吸取清亮待检样品溶液缓慢垂直滴加3滴无气泡样品于加样孔，开

5、始计时。　　③反应3~5min,根据说明书示意图判定结果。　　④用肉眼观察判断结果。阳性：C线显红色条带，T线不显色，判为阳性；阴性：C线显红色条带，T线显红色条带，判为阴性；无效：C线不显色，判为无效。　　1.2.6检测限取不同厂家的三个批次（分别用A、B、C表示）检测卡对制备的阳性添加猪尿样品（低于检测限浓度、检测限浓度、高于检测限浓度）进行检测。　　1.2.7假阴性率试验取不同厂家的检测卡对50份分别添加克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇至检测限检浓度的样品进行测定。按照下列公式计算假阴性率：假阴性率（%）=假阴性数/50100.　　1.2.8假阳性率试验取不同厂家的检测卡对50

6、份不同的空白猪尿样品进行测定。按照下列公式计算假阳性率：假阳性率（%）=假阳性数/50100.　　1.2.9与仪器方法的比较取20份不同猪尿样品，按检测卡说明书和农业部1025号公告-11-2008猪尿中β-受体激动剂多残留检测液相色谱-串联质谱法分别进行测定，比较检测结果并计算两种检测方法的符合率。　　2结果与分析　　2.1检测限　　三批检测卡，按照检测步骤，每批分别检测克伦特罗添加样品（2.0、3.0、5.0μg/L）、莱克多巴胺添加样品（3.0、5.0、7.0μg/L）、沙丁胺醇添加样品（7.0、10.0、12.0μg/L）各20份，结果详见表2.

7、当检测卡的实际检测阈值与标示检测限一致时，该检测卡为合格；而当实际检阈值高于或低于标示的检测限时，就会导致较高的假阴性率或假阳性率，这样的检测卡是不合格的。由表2可见，大多数厂家生产的三联检测卡其实际检测阈值高于标示检测限，并且不仅不同厂家生产的检测卡检测限存在差异，同一厂家不同批号的检测卡检测限的差异也较大。因此建议，每批产品在使用前均需要进行验证。　　2.2假阴性率　　对50份分别添加克伦特罗浓度3.0μg/L、莱克多巴胺浓5.0μg/L、沙丁胺醇浓度