色谱法在名贵中药材研究及鉴别应用

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1、色谱法在名贵中药材研究及鉴别应用【摘要】:本文通过检索本领域国内外相关资料文献并经过深入分析整理和归纳,总结了薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、纸色谱、高效液相色谱(HPLC)、高效毛细管电泳(HPCE)、和凝胶电泳等色谱分析法,并系统的介绍了色普法自创立以来在中药材鉴别中的应用情况。因此,本文为色谱法在中药材鉴别中的进一步研究提供了全面的研究综述。【关键词】:中药材色谱法【中图分类号】R45;R96【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2008)4-0044-0

2、415我国中药材品种繁多、资源丰富药用动植物达1万余种,在当今世界“回归自然”思潮影响下,寻找天然药物的呼声日渐高涨,因而对于我国这样的中药材大国首要任务是建立一套切实可行的鉴别方法和质量保障体系。很多中药材形态相似,加工处理后形态结构易发生改变,目前采用的经典植物鉴定,性状鉴定和显微鉴定等研究方法由于鉴定标识建立在个体形态和客观观测水平上,因而存在主观性强、重现性和稳定性差等不足[1]。而分子标记技术又存在方法不够完善,资料不丰富,成本偏高无法推广到生产第一线的缺点[2]。相比之下,色普法已成为中药材鉴定中不可缺少的常规

3、而有效的方法,尤其是对成分复杂的中药材有分离分析鉴定的双重优势。随着化学分析色谱技术的成熟和广泛应用,20世纪70年代,人们将中药中的化学成分展开于由各种不同载体制成的薄层板、纸片、胶片等物体上,不同的生药成分显现出不形状,颜色的斑点或条纹等,人们可根据斑点或条纹的位置(Rf值)、颜色、数目等特征来鉴别生药真伪和质量,从而创立了色谱法。目前常用的色谱法有薄层色谱法、气相色谱法、纸色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳和凝胶电泳等。1薄层色谱法(

4、TLC)薄层色谱(TLC)由于操作简单、直观、经济、适用范围广阔,在中药鉴别中应用频率最高。目前,常用的薄层色谱法有高效薄层层析法、薄层扫描法和反相薄层色谱法等[3]。151.高效薄层层析法(HPTLC):HPTLC的薄板采用更加细致均匀的吸附剂用喷雾法制成,提高了分离效果,增强了重现性。张虹将榧属植物叶的提取物经TLC法初步分离,再用HPTLC法测定紫杉酸的含量,具有良好的回收率,可用于定量检测[4];米莉莉等用高效薄层色谱扫描法对天然虫草与人工虫草菌丝体中核苷类有效成分进行含量测定,同时建立

5、了不同虫草样品的荧光淬灭薄层色谱图谱[5];伍庆等用HPTLC法建立了快速测定知母药材中菝琪皂苷元的方法[6];曾长青等用高效硅胶薄层板对动物药不同蛇胆胆汁酸的14种组分进行测定,发现有相似组成[7]。1.薄层扫描法(TLCS):应用薄层扫描仪将薄层板转换成薄层图谱的方法叫做薄层扫描法(TLCS)[8]。TLCS所得到的图谱比目测的层析图谱更为客观准确。张尊听等以高效薄层色谱扫描法测定野葛根中游离葛根素和总葛根素含量[9];苏淑分等使用薄层扫描法测定不同品种和产地化甘草并建立了指纹图谱,可以快速的对药材品质作出评判[10];颜玉贞等完成了黄连的指纹图

6、谱研究[11];苏微微等完成了黄参的薄层扫描指纹图谱[12]。1.3反相薄层色谱(RPTLC):当薄层色谱中流动相的极性大于固定相极性时,就形成了反相薄层色谱(RPTLC),RPTLC主要用于极性成分复杂的药材样品。张子忠等对不同产地不同时间采收的蔓荆2种》荆素和对羟基苯甲酸进行了RPTLC定量分析比较考察了多种因素对结果的影响,同时优化了实验条件,用于蔓荆子中上述两种成分分析前者回收率93.9%,后者回收率91.2%[13]。2气相色谱法(GC)15气相色谱法(GC)以气体为流动相,适合于挥发性成分或通过衍生化后能汽化的成分的定性定量分析,有灵敏度

7、高、操作简便、样品无须化学前处理、提供信息量大等优点。目前使用频率较高的有裂解气相色谱(适用于不挥发成分)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)等。2.裂解气相色谱:该发将样品放入裂解器内,在一定条件下加热样品使其瞬间裂解,生成可挥发的小分子,立即被载气带入气相色谱系统分析拄上,分离后得到裂解气相色谱图。袁敏等用此法比较了不同产地连翅的气相色谱图,13种样品的色谱图近似,重叠率达89%以上[14]。2.气相色谱-质谱联用技术(GC-MS):将气相色谱与质谱联合使用的一项技术即为GC-MS。徐勤等GC-MS对前胡中

8、的白花前胡丙素,丁素和紫花前胡苷的含量进行研究,发现前胡两种标准药材的图谱差异显著,证实了药典前胡的2个品种

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