vegf和mmp9在宫颈癌组织中的表达

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1、VEGF和MMP9在宫颈癌组织中的表达作者:李素文,朱宝申,郝惠英,黄卫平单位:河北省石家庄市第五医院妇产科【关键词】宫颈肿瘤;免疫组织化学;血管内皮生长因子;基质金属蛋白酶9宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,探讨宫颈癌的分子标志物与临床、病理及预后的关系,有助于更好地了解宫颈癌发病的生物学行为。本课题通过检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在宫颈癌组织中的表达,为探讨改进、提高宫颈癌的防治措施提供理论依据。  1资料与方法  1.1一般资料收集我院2006年10月至2008年10月手术切除的宫

2、颈癌石蜡包埋组织49例,均无术前放疗、化疗史。按组织病理分级Ⅰ~Ⅱ期28例,Ⅲ~Ⅳ期21例,伴淋巴结转移31例。20例对照均为同期因良性子宫疾病行子宫切除术时切除之正常宫颈和宫颈炎组织。所有标本均经病理证实。  1.2方法鼠抗人MMP9、VEGF单克隆抗体、通用型SP试剂盒均购于福州迈新公司。所有新鲜标本均经10%甲醛固定,石蜡包埋,连续4μm厚度切片,脱蜡、脱水,采用SP法分别行MMP9、VEGF染色(染色步骤严格按说明书进行)。以PBS代替一抗作阴性对照,用已知阳性切片作阳性对照。  1.3结果判断标准VEGF阳性

3、表达为棕黄色颗粒样物质定位于细胞质中,MMP9蛋白阳性信号呈棕黄色颗粒样物质,位于细胞浆和细胞膜中,高倍镜下随机取5个视野(每视野细胞数≥200个),计算阳性细胞所占的百分率,按阳性细胞所占百分比及着色程度进行结果判定[1]。将每张切片平均着色程度得分与着色细胞所占百分率得分相乘为其最后得分,≤2分为阴性(-),>2分为阳性(+)。  1.4统计学分析应用SPSS11.0统计软件,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。  2结果  2.1VEGF、MMP9表达VEGF阳性染色位

4、于细胞质中,阳性信号呈棕黄色颗粒样物质。VEGF在正常宫颈黏膜、宫颈癌组织中的表达率分别为10.0%(2/20)、67.3%(33/49)。差异有统计学意义(P<0.05)。MMP9位于细胞浆和细胞膜中,蛋白阳性信号呈棕黄色颗粒样物质,MMP9在正常宫颈黏膜、宫颈癌组织中的表达率分别为5.0%(1/20),71.4%(35/49)。差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。  2.2MMP9、VEGF在宫颈癌组织中表达的相关性宫颈癌组织中VEGF阳性表达的33例中,MMP9阳性26例,阴性7例;MMP9阴性

5、表达的16例中,VEGF阳性6例,阴性10例;两者表达呈正相关(r=0.185,P<0.05)。表1不同临床病理特征宫颈癌组织中VEGF及MMP9的表达临床病理  3讨论  在肿瘤细胞生长、转移和复发中,肿瘤血管生成起重要作用。VEGF具有强烈的促血管内皮细胞增殖及增加血管通透性的作用。在肿瘤血管形成过程中,VEGF不仅可诱导血管形成,而且有利于肿瘤细胞脱落进入血管或向邻组织扩散,为肿瘤的浸润、转移创造条件。本研究显示,VEGF在宫颈癌中的表达与正常宫颈组织比较差异有统计学意义(P<0.05),与临床分期、分化程度

6、及淋巴结转移均相关(P<0.05)。提示VEGF可诱导宫颈癌肿瘤血管形成,促使肿瘤细胞浸润转移、恶性程度增加。  肿瘤的浸润转移是一个多步骤、多阶段的复杂过程,涉及到肿瘤细胞穿过细胞外基质(ECM)屏障、血管基底膜及穿过血管壁进入宿主微环境等多个环节。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌离子依赖性内肽酶,是ECM降解过程中最重要的蛋白水解酶,能降解ECM中的所有成分,并被发现还具有促进肿瘤血管形成的功能,在肿瘤的生长、侵袭与转移中起着重要的作用。基质金属蛋白酶(MMP)是一类最重要的降解基质的蛋白水解酶,基质金属蛋白酶组织抑

7、制剂(TIMP)是其活性的特异抑制剂,可终止MMP家族所有成员的水解活性,还可抑制肿瘤血管形成,被认为是转移抑制基因之一[2]。MMP9的主要功能是降解Ⅳ、Ⅴ型胶原和明胶,破坏细胞基底膜,使肿瘤细胞易于穿透基底膜。本研究表明MMP9在Ⅲ~Ⅳ期宫颈癌中的表达明显高于Ⅰ~Ⅱ期,在有淋巴结转移癌中明显高于无淋巴结转移癌。表明MMP9与宫颈癌的浸润、转移有关。  血管生成与肿瘤的侵袭转移密不可分,VEGF和MMP9在肿瘤血管生成与侵袭中发挥作用,肿瘤细胞能分泌促血管生成因子如VEGF等,可诱导血管内皮细胞产生MMPs[3]。两者

8、协同表达可作为血管生成与肿瘤侵袭转移的标志[4]。本实验证实VEGF与MMP9在宫颈癌血管生成中起协同作用。本研究显示,VEGF与MMP9在宫颈癌侵袭和转移过程中起重要作用,VEGF是诱导肿瘤血管发生的重要调节因子,MMP9使肿瘤的转移屏障易于破坏,两者协

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