虎杖浓缩片对小鼠实验性肝损伤的保护作用论文

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1、虎杖浓缩片对小鼠实验性肝损伤的保护作用论文刘丹,汤海峰,张三奇,丁愉,孟瑾,王婧雯【摘要】目的研究虎杖浓缩片对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝损伤的影响。方法虎杖浓缩片连续给予小鼠7d(2.50,1.25,0.25mg/kg).freelcuspidatumonliverinjuryofmiceinducedbyCCl4.MethodsAfteradministratingconcentratedtabletofPolygonumcuspidatum(2.5mg/kg,1.25mg/kg,0.25mg/kg)for7

2、daysconsecutively,themiceALTandAST,asinedinallgroups.ResultsTheconcentratedtabletofPolygonumcuspidatuminhibitedtheriseofhepaticALT(P<0.01)andAST(P<0.01).DegenerationandnecrosisoflivertissuescuspidatummethodhasprotectiveeffectonliverinjuryofmiceinducedbyCCl4.K

3、eycuspidatum;Tablet;Liverinjury;Carbontetrachloride中药虎杖为蓼科植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.的干燥根茎及根,收载于《中国药典》2005年版Ⅰ部,具有祛风利湿、散瘀定痛、止咳化痰等功效。虎杖主要含二苯乙烯类和蒽醌类化合物[1],其中前者主要为白藜芦醇和白藜芦醇苷(虎杖苷),具有降血脂、保肝等多种药理作用[2];后者以大黄素、大黄素甲醚为代表,具有抗菌、保肝等功能[3]。临床上以虎杖为主药的制剂种类繁多,对虎杖制剂的提取工艺

4、也有较多报道[4,5],但多为粗提取液,成分复杂,制剂体积较大。为减少服用剂量、便于服用和携带,作者前期已对其有效成分进行了富集和分离,制备了总有效部位,并且经处方优化和制备工艺研究制备了总有效部位片剂(虎杖浓缩片,concentratedtabletofPolygonumcuspidatum,CTPC),现报道该片剂对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用,为开发廉价有效的治疗化学性肝损伤制剂提供实验依据。1器材1.1药物虎杖购于西安市药材公司(产地陕西),经第四军医大学西京医院副主任药师汤海峰鉴定;大黄素和大黄

5、素甲醚对照品(中国药品生物制品检定所,批号分别为0756-200110和758-9904);白藜芦醇对照品(Sigma公司,Prod.No.R5010,CASNo.501-36-0);白藜芦醇苷对照品(第四军医大学化学教研室自制,经面积归一化测定纯度在99%以上,批号0503047);D101大孔树脂(西安蓝深交换吸附材料有限公司);解毒降脂片(四川巴中普瑞制药有限公司,批准文号:国药准字Z51021201,批号050605,每片重0.58g,相当于原生药2g)。1.2动物昆明种小鼠,体重(18±2)g,♀♂各半

6、,由第四军医大学实验动物中心提供。实验动物合格证号:SCXK(军)2002-005。1.3试剂ALT试剂盒(批号060401)、AST试剂盒(批号060181),均为中生北控生物科技股份有限公司产品、四氯化碳(天津市化学试剂二厂,批号001018)。1.4仪器LC-10ATvp高效液相色谱仪(日本岛津);UV-265紫外分光光度计(日本岛津);电子分析天平(德国赛多利斯);电热鼓风干燥箱(上海华连医疗器械有限公司);超声波清洗器DL-360A(上海之信仪器有限公司);TGL-16C离心机(上海安亭科学仪器厂),光

7、学显微镜(OLYMPUS,HE20);生化自动分析仪(日本日立7170A型)。2方法2.1虎杖浓缩片的制备虎杖粗粉用5倍量70%乙醇在90℃下加热回流3次,2h/次,合并提取液,减压回收乙醇后加水至适宜浓度,即为虎杖粗提液,体积约为原药材的5~10倍量;粗提液1BV,加入处理好的D101树脂柱,吸附流速2.4BV/h,上样后静置30min,先用2BV水洗涤,再用20%,50%,70%,95%乙醇各2,5,2,5BV进行梯度洗脱,流速2BV/h,合并50%和95%乙醇洗脱液,浓缩,蒸干,即为总有效部位,作为主药备用

8、;主药195g,乳糖80g,微晶纤维素100g,羧甲基纤维素钠20g,分别过80目筛,混合均匀,加95%乙醇制软材,16目网制粒,在60℃温度下干燥,整粒后加入硬脂酸镁2g,混匀,压成1000片,即为虎杖浓缩片,每片重0.4g,相当于原生药2g。2.2给药方法小鼠60只,随机分为6组,正常对照组、造模组、阳性对照组[解毒降脂片给药折合成生药2.50g/(kg·d)]、CT

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