薏苡非种仁部位甲醇提取物的指纹图谱研究

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1、薏苡非种仁部位甲醇提取物的指纹图谱研究【关键词】薏苡；高效液相色谱；指纹图谱　　Abstract：ObjectiveToestablishreversed-phasehighperformanceliquidchromatography(RP-HPLC)fordeterminationoffingerprintofC.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf.MethodsThesampleasilC18(4.6mm×250mm,5μm)columnobilephase

2、consistedofmetholandl·min-1;thetemperatureofcolumn,andrecordingtimein.ResultsHPLCchromatogrambyFingerprintofC.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)StapfonpeaksintheHPLCprofilea-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapfin10differentgroethodissimple,practicableandreliablea

3、ndcanbeusedforthequalitycontrolofC.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf.　　Keya-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf;RP-HPLC；Fingerprint　　薏苡为禾本科薏苡属植物薏苡C.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf和川谷C.lacryma-jobiL.的干燥全草、果实和种仁。　　《中国药典》从1963年版开始收载禾本科植物薏苡C.lacryma-jobi

4、L.var.mayuen(Roman.)Stapf的干燥成熟种仁；2005年版记载薏苡仁粉末的鉴别、油脂类成分的薄层鉴别和甘油三油酸酯的含量测定项；功效为健脾渗湿、除痹止泻、清热排脓；用于水肿、脚气、小便不利、湿痹拘挛、脾虚泄泻、肺痈、肠痈；扁平疣的治疗［1］。薏苡根收载于上海市中药材标准1994年版中，有清热、利尿和驱虫作用［2］。　　薏苡的根、茎、叶、果实、种仁等药用部位在中国的蒙古族、藏族、苗族、彝族、侗族、佤族、傈僳族、傣族、壮族、毛难族、瑶族、哈尼族、景颇族、水族、基诺族等民族中均有大量使用［

5、3］，而现有文献中关于薏苡根、茎、叶的研究涉及较少。　　有研究报道［4］表明薏苡抗肿瘤活性成分主要集中在甲醇部位，甲醇部位化学成分复杂，为更好地控制薏苡药材的质量，本文采用HPLC-DAD法建立了薏苡非种仁部位的指纹图谱，为薏苡非种仁部位（根、茎和叶）药材的质量控制提供新方法，为正确、科学和合理开发利用等方面提供一定的实验依据。　　1材料与仪器　　1.1试剂与材料甲醇为色谱纯（美国迪马公司）；水为重蒸水；其他试剂均为分析纯。实验所用药材，室温阴干，经刘圆教授、戴斌、彭朝忠副教授鉴定。见表1。表1薏苡药材

6、（略）　　1.2仪器poasilC18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为甲醇-水梯度洗脱，甲醇为A相，水为B相，梯度洗脱表见表2；流速1ml·min-1；柱温30℃；检测波长263nm；分析时间75min。表2梯度洗脱（略）　　2.2样品溶液的制备称取薏苡药材粉末约1g，过60目筛，精密称定，准确加入10ml的甲醇，称重，超声提取30min，放冷加甲醇补足损失重量摇匀，过滤，滤液蒸干，用10ml甲醇溶解并定容，吸取滤液，过微孔滤膜(0.45μm)，取续滤液备用。　　2.3方法学考察　　2

7、.3.1精密度实验取10号供试品溶液，连续进样5次，测定12个主要色谱峰(特征峰的保留时间和峰面积比值)，结果表明各主要色谱峰的相对保留时间RSD＜2%，峰面积RSD＜10%，表明精密度良好。　　2.3.2稳定性实验取10号供试品溶液，分别于2，8，16，24，48，72h检测指纹图谱，记录各主要色谱峰保留时间及峰面积比值。结果表明各色谱峰的相对保留时间RSD＜2%，在12个共有峰中有9个峰的峰面积RSD接近或超过10%，通过分析数据发现供试品溶液在48h内稳定。　　2.3.3重复性实验取五块石薏苡药材

8、根茎粉末5份，每份1.0g，精密秤定，按“2.2”项下样品溶液的制备方法制备供试液，检测指纹图谱，记录12个主要色谱峰的保留时间和峰面积比值，结果表明各主要色谱峰的相对保留时间RSD均在1%以内，说明重复性良好。　　将各样品的相对保留值均一一列出，可清楚的看到他们之间的共有峰情况，同时可计算出各批样品中峰的重叠率。色谱指纹图谱重叠率(Rateofoverlap:Rov)是从质的角度考虑待测样品与标准样品之间的相关性。其计算公式为:重叠率（%