膝关节退行性骨关节炎钙化层病理改变研究

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1、膝关节退行性骨关节炎钙化层病理改变研究：王华伟，杨柳，王富友，段小军，王丽，郭林，陈光兴【摘要】［目的］对骨性关节炎软骨钙化层病理结构进行形态学分析，为临床诊治及预防相关疾病提供理论依据。［方法］标本均于临床诊断为膝关节退行性骨关节炎患者，共21例，其中，男1例，女20例。股骨髁负重区取材、修剪、固定后，常规制备石蜡切片，番红O／固绿染色，显微镜观察。［结果］本研究收集的标本平均年龄（65.57±7.43）岁；平均身高（155.38±5.32）cm；体均体重（59.95±8.99）kg；平均病程（13.04±9.66）年。番红O／固绿染色示钙

2、化层病理改变主要为潮线复制、漂移，出现多条潮线结构，钙化层结构明显增厚，最厚处为900多微米；钙化层增厚伴血管长入；非钙化软骨及钙化层纤维样改变；潮线间隙增宽；钙化层及深层软骨缺损。［结论］膝关节退行性骨关节炎钙化层形态结构具有特异性的病理改变。【关键词】骨性关节炎；钙化层；病理学改变；组织染色Abstract：［Objective］StudyonthePathologyshapestructureofcalcifiedcartilageoneinOsteoarthritiskneejointandprovidethetheoryfordia

3、gnosisandtreatmentofcorrelateddisease.［Method］Osteoarthritiscondylesoffemur(n=21)kneejointreplacementandtheparaffinsectionsicroscope.［Result］Meanageofosteoarthritispatienteanstature;meaneanpathogenesisarkdriftandthickeningacpanyarkincreasedoidchangedordefect.［Conclusion］Cal

4、cifiedcartilagezoneinOsteoarthritiskneejointtakenplacespecificpathologicalchanges.Keyin;(4)年龄≥38岁；(5)膝检查示骨性肥大。膝骨关节炎存在：具备(1)，(2)，(3)，(4)或(1)，(2)，(5)或(1)，(4)，(5)项。临床及放射学：(1)前个月大多数日子膝痛；(2)X线示关节边缘骨赘；(3)关节炎实验室检查符合骨关节炎；(4)年龄≥40岁；(5)晨僵<30min；(6)关节活动时有骨响声。膝骨性关节炎存在：具备(1)，(2)或(1)，

5、(3)，(5)，(6)或(1)，(4)，(5)，(6)项。1.2主要试剂和配制方法1.2.1标本固定与脱钙(1)固定液：10％甲醛固定液；(2)Jenkins混合酸脱钙液：浓盐酸4ml，冰醋酸3ml，氯仿10ml，纯乙醇73ml，蒸馏水10ml。1.2.2番红O／固绿染色(1)0.02％固绿水溶液：固绿(Fastgreen)(Sigma公司，美国)0.02g，蒸馏水100ml;(2)0.1％番红水溶液：番红O染粉(SafraninO)(Sigma公司，美国)0.1g，蒸馏水100ml;(3)1％盐酸酒精分化液：浓HCl1份，95％乙醇99份。

6、1.3实验方法1.3.1组织切片制备取股骨髁负重区骨软骨标本6例，10％甲醛固定液固定24h，Jenkins混合酸脱钙液脱钙24h，常规石蜡包埋，然后进行纵切片，片厚5μm。1.3.2番红O/固绿染色[2](1)石蜡切片脱蜡至水；(2)苏木素染细胞核1～3min，显微镜观察视染色情况决定染色时间的长短；(3)自来水充分洗涤，去除残留苏木素；(4)1％盐酸酒精分化15～30s，分化时间视颜色深浅而定；(5)自来水充分洗涤，去除残留染液；(6)0.02％固绿水溶液染色3min，固绿是一种酸性染料，呈碱性细胞质或细胞外基质-绿色；(7)1％冰醋酸洗

7、涤切片，去除残留固绿；(8)1％番红O3min，番红是一种碱性染料，呈酸性细胞质或细胞外基质-橙黄／红色；(9)95％乙醇浸洗，洗去残留番红；(10)95％乙醇、无水乙醇脱水；(11)二甲苯透明，中性树胶封片，显微镜观察。2结果2.1病例资料统计所选标本均于临床诊断为膝关节退行性骨关节炎，并进行膝关节置换的患者。其中男1例，女20例；左膝9例、右膝12例；平均（65.57±7.43）岁（52～78岁）；平均身高（155.38±+5.32）cm(150～167cm);平均体重（59.95±8.99）kg（45～73kg）;平均病程（13.04±

8、9.66）年（1～30年）。2.2番红O/固绿染色观察正常骨软骨石蜡切片番红O／固绿染色，200倍镜下观察可见软骨呈红色，软骨下骨呈蓝色。纵切片上软骨中下部可见黑染