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1、人类免疫缺陷病毒抗体初筛假阳性结果研究【摘要】目的通过对人类免疫缺陷病毒抗体初筛试验假阳性的原因分析,以减少假阳性结果的发生。方法对15例初筛试验阳性的标本用原有试剂加另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。结果15例初筛阳性标本经确证有9例呈阳性反应，4例呈阴性反应，2例为不确定。结论HIV抗体初筛假阳性与试剂的敏感性和特异性以及实验室质量管理相关。�【关键词】人类免疫缺陷病毒抗体;初筛试验;假阳性�作者单位：130021吉林省肿瘤医院检验科自1985年我国发现首例艾滋病(HIV)至今，国内HIV流行趋势日益严重，目前对艾滋病尚无有
2、效的治疗措施，因此，对艾滋病的预防显得尤为重要。HIV抗体检测是艾滋病早期诊断的主要依据,为了最大限度并及时地发现所有的HIV抗体阳性者,血液筛查HIV抗体已广泛开展。我院2008~2011年共有38790例进行了HIV初筛检测。共有15例初筛阳性的标本。经确认实验室确认其中9例阳性，4例阴性，2例不确定。现就HIV抗体假阳性影响因素及处理方法分析如下。6�1资料与方法�1.1标本来源2008~2011年两年内,我院共有38790例进行了HIV初筛检测。�1.2主要试剂酶联免疫吸附实验(ELISA)检测试剂(珠海丽珠试剂股份有限公司、上海科
3、华生物工程股份有限公司诊断试剂盒)；胶体金法检测试剂(上海科华生物工程股份有限公司诊断试剂盒)。经食品药品监督管理局注册批准,批检合格且在有效期内。�1.3仪器ELx800型酶标仪和ELx50型洗板机。酶标仪每年通过吉林省计量测试技术研究院的检定为合格。�1.4方法严格按厂家试剂说明书进行,根据《全国艾滋病检测技术规范》2009年修订版要求,对初筛检测阳性的标本,使用与初次检测相同的试剂及另外一种试剂或方法进行双孔复检,两孔阳性或一阴一阳,均送确认实验室确认。�2结果�2008~2011年我院共检测38790例,其中有15份标本初筛阳性,9
4、例标本经确认后为阳性,4例确认后为阴性,2例为不确定。�3讨论�抗体初筛试验假阳性原因及处理原则：�3.1受检者自身的原因6某些疾病的部分抗原性物质和某些自身免疫病患者的自身抗体与HIV的某些抗原决定簇有交叉反应性或非特异性反应［1-3］，如血液系统恶性病变、多发性胆汁型肝硬化、酒精性肝炎、多发性骨髓瘤、肾移植或慢性肾衰；恶性肿瘤、感染梅毒、结核、疟疾或丝虫病等或疫苗接种者；病毒感染如巨细胞病毒、EB病毒、乙型肝炎、丙型肝炎；系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎(抗链球菌溶血素“O”、C反应蛋白、类风湿因子、抗核抗体等)；特殊生理情况如过敏性体质
5、、怀孕都易出现假阳性结果。这4份筛查假阳性标本均为恶性肿瘤患者,其中一名患者有乙肝病史，分析原因与个体免疫差异有关,目前的初筛诊断试剂还不能完全避免这种假阳性结果。�3.2试剂的原因目前,国内外血源筛查仍主要使用ELISA(双抗原夹心法)试剂，筛选实验设计的目的尽可能检出所有的阳性标本，不能漏检,即敏感性要高。这样就可能出现一些假阳性反应。我们实验室主要用的是珠海丽珠生物试剂有限公司和上海科华有限公司生产的HIV(1/2型)抗体诊断试剂盒(双抗原夹心酶联免疫法),快速法用的是上海科华有限公司生产的胶体金试剂条。每年在吉林省临床检验中心组织的
6、室间质评活动中成绩优秀，4例假阳性标本经我们多次检测均为阳性反应表明该患6者体内存在某种能与试剂盒中反应的物质，可能和试剂包被的抗原特异性位点选择差异、标记抗原的纯度、试剂制作过程的污染有关。实验中严格按说明书操作,以降低由试剂的原因造成假阳性结果的比率。若应用某种试剂持续出现筛查假阳性结果,应考虑更换试剂。�3.3实验室操作的原因�3.3.1标本血清标本分离不完全,血清中混有纤维蛋白原或红细胞成份；标本量过多，手工操作时，在加样后放入孵箱前部分标本等待时间过长；溶血、黄疸、被细菌污染的标本中常含有过氧化物酶,使用辣根过氧化物酶为标志物的试
7、剂,就会出现非特异性显色,造成假阳性。标本避免溶血。�3.3.2加样加样时枪头没有对准相应的板孔,或者加样太快致试剂或标本的飞溅,出现污染假阳性结果。加样时枪头悬空,对准板孔,不能触及板孔底部;加样时应缓慢,避免标本飞溅及气溶胶的污染。�3.3.3洗板洗板机洗板时,由于血液中纤维蛋白,造成洗板针堵塞,抽吸不完全,直接影响本底;在洗板机洗板完毕后,拍板由人工操作,操作不当就可能使阳性标本孔的液体污染其他孔导致假阳性结果的出现。�3.3.4反应温度温箱孵育时密封不完全,稀释液蒸发较多,吸附于孔壁,不易清洗彻底，造成假阳性。�对HIV6抗体筛查检
8、测阳性标本，筛查实验室在条件允许时，建议尽量采集第2份血样标本后再送确证实验室检测［5］。对初筛试验呈阳性反应的样品用原有试剂和不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。如两种试剂复
