植物生理学实验自编讲义

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1、植物生理学实验目录实验01植物细胞渗透势的测定（质壁分离法）1实验02植物组织水势测定（小液流法）4实验03植株中硝态氮的测定（比色法）7实验04植物光合速率的测定（改良式半叶法）9实验05植物呼吸速率的测定（小篮子法）11实验06根系活力的测定（TTC法）13实验07叶绿素的提取、分离及性质15实验08叶绿素a和b的含量的测定18实验09植物溶液培养和缺素培养20实验10植物中淀粉含量的测定23实验11植物中粗纤维含量测定24实验12高温和低温对植物的伤害26实验13植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响28实验14过氧化氢酶活性测定（高锰酸钾滴定

2、法）30实验15温度和激素对果品采后生理的影响32实验16N素营养水平对植物体内代谢的影响34实验17植物组织中丙二醛含量的测定35实验18谷物淀粉含量的测定（旋光法）37参考文献39植物生理学实验讲义实验01植物细胞渗透势的测定（质壁分离法）植物细胞的渗透势主要取决于液泡的溶质浓度，因此又称溶质势。渗透势与植物水分代谢、生长及抗逆性等有密切关系。已知在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，而在一定程度上维持细胞膨压，保障细胞的生长和气孔的开放，这种现象叫做渗透调节作用。渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞

3、的渗透势的降低值来表示，在水分生理与抗逆性生理研究中经常需要测定。一、原理：植物细胞的渗透势主要取决于液泡的溶质浓度，因此又称溶质势。渗透势与植物水分代谢、生长及抗逆性等有密切关系。已知在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，而在一定程度上维持细胞膨压，保障细胞的生长和气孔的开放，这种现象叫做渗透调节作用。渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示，在水分生理与抗逆性生理研究中经常需要测定。二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：洋葱鳞茎、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等。（二）仪器设备：

4、显微镜，载玻片，盖玻片，温度计，尖头镊子，刀片，小培养皿（直径为6cm），试剂瓶，烧杯，容量瓶，量筒，吸管，吸水纸等。（三）试剂：1、1mol/kg蔗糖水溶液：称取预先在60-80℃下烘干的蔗糖34.2g溶于100g蒸馏水中，即为1质量摩尔浓度的蔗糖溶液。2、0.03％中性红溶液。3、蔗糖系列标准液：取干燥洁净的小试剂瓶9支编号，用1mol/kg蔗糖水溶液依据C1V1=C2V2公式配制0.30mol/kg、0.35mol/kg、0.40mol/kg、0.45mol/kg、0.50mol/kg、0.55mol/kg、0.60mol/kg、0.65mol/

5、kg、0.70mol/kg等一系列不同浓度的蔗糖水溶液（具体范围可根据材料不同而加以调整），贮于试剂瓶中，瓶口加塞以防蒸发浓缩。三、实验步骤1、取干燥、洁净的培养皿9套编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序加入各培养皿，使之成一薄层，盖好皿盖备用。-36-植物生理学实验讲义2、用镊子撕取（或用刀片刮取）供试材料的表皮，大小以0.5cm2为宜，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，每一浓度4-5片。同时记录室温。为了便于观察，可先将切片于0.03%中性红内染色5min左右，吸去水分，再浸入蔗糖溶液中，但如不染色即能区别质壁分离时，仍以不染色为

6、宜。3、5-10min后，取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。如果在两个相邻浓度的切片中，一个切片没有发生质壁分离，另一个切片发生质壁分离的细胞数超过50％，则这两个浓度的平均值为其等渗浓度。每一制片观察的细胞不应少于100个。检查时可先从中间浓度开始。在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次，直至有把握确定为止。在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。将结果记录于表下表中。表5-1植

7、物细胞渗透势测定记载表实验人日期材料名称实验室温度蔗糖浓度（mol/kg）渗透势（Mpa）质壁分离的相对程度（作图表示）0.30 0.35 0.40 0.45  0.50  0.55  0.60  0.65  0.70  -36-植物生理学实验讲义五、结果计算由所得到的等渗浓度和测定的室温，用下式计算供试溶液的渗透势（Ψs0），即为细胞的渗透势（Ψs）。Ψs（MPa）=Ψs0=-iCRT式中，Ψs0——供试溶液的渗透势，MPa。i——解离系数，蔗糖=1。C——供试溶液的浓度，mol/kg（以水作溶剂）。R——气体常数，0.008314[LMPa／（mo

8、l·K）]。T——绝对温度，（273+t℃），K。思考题某种植物叶片吸水饱和时的渗透势经测定为