2.3 分解纤维素的微生物的分离

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1、普通高中课程标准实验教科书——生物选修1[人教版]课题3分解纤维素的微生物的分离★课题目标（一）知识与技能简述纤维素酶的种类及作用，从土壤中分离出分解纤维素的微生物；掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术   （二）过程与方法分析分离分解纤维素的微生物的实验流程，弄懂实验操作的原理（三）情感、态度与价值观领悟科学探究的方法，发展科学思维和创新能力★课题重点从土壤中分离分解纤维素的微生物★课题难点从土壤中分离分解纤维素的微生物★教学方法启发式教学★教学工具多媒体课件★教学过程（一）引入新课上节课我们探讨学习了土壤中尿素分解菌的分离与计数，这节课我们以纤维素分解菌的分离与纯化为例，巩固加深对

2、这方面技术的理解和掌握。（二）进行新课1．基础知识活动1：阅读“纤维素与纤维素酶”，回答下列问题：1．1纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。7延伸：草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？肠胃中的共生物生物。1．2棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素的分解需要在纤维素酶的催化作用下完成，请完成下列过程：纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶〖思考1〗实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；尽管醋酸－醋酸钠缓冲液用量不同，但

3、都能维持相同的pH。〖思考2〗1个酶活力单位是指在温度为25℃，其它反应条件最适宜情况下，在1min内转化1mmol的底物所需要的酶量。活动2：阅读“纤维素分解菌的筛选”，回答下列问题：1．3筛选纤维素分解菌的方法是刚果红染色法。该方法可以通过颜色反应直接筛选。2．4其原理是：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。2．实验设计活动3：完成实验方案流程图，讨论回答问题：选择培养梯度稀释涂布到鉴别纤维素分解菌培养基上微生物培养土壤取样挑选产生透明圈的菌落纯化培养〖思考3〗实

4、验流程中“选择培养”的培养基类型是什么？该培养的目的是什么？液体选择培养基。其目的是使纤维素分解菌增殖，含量增多。〖思考4〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？尿素分解菌的分离实验流程是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上；本课题通过选择培养使细菌增殖后，再涂布在鉴别培养基上。其它操作基本基本共同。活动4：阅读资料一“土壤取样”，回答下列问题：2．1纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中。2．2为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌的含量才会高于其它普通环境，从而提高获得目的微生物的

5、几率。2．3将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。活动5：阅读资料二“选择培养基”，回答以下三个问题：2．4纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基，原因是没有添加琼脂成分。2．5培养基选择作用机制是以纤维素粉为唯一碳源，只有纤维素分解菌才能生存。2．6若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将纤维素粉改为葡萄糖。活动5：阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点：染色法优点缺点方法一颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐刚果红会使菌落之间发生混杂方法二操作简便不存在

6、菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。7〖思考5〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？在选择培养条件下，可使能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。3．结果分析与评价活动6：阅读“课题延伸”，回答：3．1为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵。3．2纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的葡萄糖含量进行定量测定。（三）课堂总结、点评纤维素分解微生物的分离纤维素酶种类、作用、最适pH、催化

7、活力刚果红染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含纤维素土壤增大分解菌含量染色鉴别分离出分解菌（四）实例探究例1．有关谷氨酸发酵的叙述中正确的是A．发酵中要不断通入空气B．培养条件不当将不能得到产品C．搅拌的唯一目的是使空气成为小泡D．冷却水可使酶活性下降解析：进行谷氨酸发酵的菌种是异养需氧型微生物，所以要在培养过程中不断通入空气，但是必须通入的是无菌空气，普通空气是不行的，容易造成杂