软坚消瘿汤对自身免疫性甲状腺炎大鼠细胞因子及凋亡蛋白fas、fasl表达的影响论文

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1、软坚消瘿汤对自身免疫性甲状腺炎大鼠细胞因子及凋亡蛋白Fas、Fasl表达的影响论文.freelentalautoimmunethyroiditis(EAT)fromthelevelsofautoantibodies,interleukin-1,tumornecrosisfactor-αandapoptosis-regulatedproteinsFas/FaslofEATrats,andinvestigatethemechanismfromtherelationbetaleratsofSPFlevelalgroupandmodel

2、group.AnanimalmodelofEATinratsixedmunizationanddrinkingperiodateodelededicinegroup,edicinegroupandmodelgroup.Thelevelsofautoantibodies,interleukin-1,.freelornecrosisfactor-αe-linkedimmunosorbentassay.ThelevelchangeofFas/Faslinthethyroidofratmunohistochemicalstaining.

3、ResultsRuanjianXiaoyingDecoctionsignificantlyreducedthelevelsofautoantibody,interleukin-1,tumornecrosisfactor-αandlolevels,entalautoimmunethyroiditis;cytokine;apoptosis-regulatedproteins;rat细胞凋亡在自身免疫性甲状腺炎(AITD)病程中发挥重要作用,Fas及其配体Fasl结合后可引起滤泡上皮细胞凋亡发生。淋巴细胞及甲状腺细胞释放的细胞因子白细

4、胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导了细胞凋亡。既往的研究表明,软坚消瘿汤在治疗AITD中疗效确切1。本实验旨在从细胞因子及细胞凋亡关联角度探讨其治疗AITD的机制。1材料与方法1.1动物SPF级SD雌性大鼠,体重(110±10)g,4~6周龄,购于沈阳医学院实验动物中心,合格证号:SCXK(辽)2003-0016。1.2主要仪器酶标仪(奥地利),型号:Anthos2010;37℃电热恒温培养箱(上海博讯医疗设备公司),型号:HXP-9052MBE;离心机(法国Jouan),型号:C4-12;微量移液器(美

5、国热电);电子秤(上海精密仪器有限公司),型号:JY5022。1.3主要药物及试剂甲状腺球蛋白(TG)、弗氏佐剂(美国Sigma公司),甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、IL-1及TNF-α等酶联免疫检测试剂盒(美国ADL公司),Fas抗体、Fasl抗体、SP试剂盒、DAB试剂盒等免疫组化试剂盒(北京博奥森有限公司)。雷公藤多甙片:江苏美通制药有限公司产品,购于辽宁中医药大学附属医院药局,批号080601;软坚消瘿汤中药饮片(当归、柴胡、生牡蛎、海藻、昆布等)购于辽宁中医药大学附属医院中草药局。1

6、.4造模与分组SPF级SD雌性大鼠60只,适应性喂养1周,按体重随机取15只为正常对照组,剩余为造模组。第2周起造模组饮用高碘水浓度为500g/L2,对照组予蒸馏水。第4周起造模组于双后足皮下多点注射由完全弗氏佐剂(CFA)充分乳化成油包水状的TG(TG∶CFA=1∶1),共2次,中间间隔2d,每次每只含TG100μg3,作为初次免疫。第5周于后背皮下多点注射由不完全弗氏佐剂(IFA)乳化的TG,每次每只含100μg,每周1次,连续4周,作为加强免疫。第8周结束时成模。将成模后的大鼠随机分为模型组(13只)、西药组(13只)、中

7、药组(14只)。1.5给药给药剂量按人和动物体表面积折算的等效剂量比值表计算出大鼠等效灌胃剂量。中药组予软坚消瘿汤,每只大鼠灌胃量为10mL/(kg·d),原药材含量为2.03g/mL。西药组予雷公藤多甙片,研磨,温开水配成悬浊液(2.37g/mL)等量灌胃。模型组及正常组灌服等量蒸馏水。各组均每日给药1次,连续6周。1.6指标检测与方法1.6.1抗体及细胞因子各组实验大鼠于治疗后第42日腹主动脉取血并处死,1500r/min离心获取血清,采用ELISA检测TGAb、TPOAb、IL-1及TNF-α。1.6.2凋亡蛋白处死大鼠,

8、取双侧甲状腺,按试剂说明常规免疫组化制片,双盲显微镜观察凋亡蛋白Fas、FasL阳性表达位置,Mias99病理图像分析系统,定标为μm,检测灰度值。1.7统计学方法采用SPSS17.0统计软件,数据满足正态性和方差齐性,组间采用方差分析,所列数据采用—x±s表示

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