食物过敏原免疫学检测技术进展综述

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1、食物过敏原免疫学检测技术研究进展摘要：免疫学检测方法因特异性强、灵敏度高和操作简便的优点而备受青睐。该文介绍了部分国家和地区食物过敏原标签标注情况，食物过敏原免疫学检测技术，包括酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫层析技术、生物传感器技术的研究进展和应用。通过与质谱、链式聚合酶反应技术(PCR)对比，探讨了食物过敏原免疫学检测技术的发展方向。关键词：食物；过敏原；免疫学检测Abstract：Immunoassayshavebeenpaidextensiveattentionbyscientistsduetoitshighsensitivityandsimpleope

2、ration.Inthispaper，thesituationsofmajorfoodallergenslabelinginsomecountriesandareaswereintroduced，andtheresearchprogressesandapplicationsofimmunoassaytechniquesoffoodallergens，includingenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)，lateralflowimmunoassayandbiosensortechniqueweresummarized.Byco

3、ntrastwithmassspectrometryandPolymeraseChainReaction(PCR)technique，theprospectofimmunoassaysoffoodallergenswasfurtherdiscussed.Keywords：food；allergen；immunoassay；progress食物过敏是一个世界性公共卫生问题。调查显示世界上约4％的人口对食物过敏。目前，已确定的过敏性食物多达180种以上，联合国粮农组织(FoodandAgricultureOrganization，FAO)报告了90％以上食物过敏原存在

4、于牛奶、鸡蛋、鱼、甲壳类水产品、花生、大豆、坚果类及小麦8大类食物中。为保护易感者健康，部分国家和地区对食物过敏原的标签标注进行了严格规定(如表1所示)，并列入立法范围，因此食物过敏原的检测越来越重要。食物过敏原(Foodallergen)检测技术根据检测目标物的不同，以分析全蛋白或酶解后肽段氨基酸序列的质谱技术、检测编码过敏原DNA片段的聚合酶链式反应(Polymerasechainreaction，PCR)技术及分析过敏原性的免疫学检测技术为代表。J。而质谱存在操作费时、仪器昂贵、检测费用相对较高等缺点；PCR方法检测易因操作不当受到污染而产生假阳性结果，存在

5、操作要求技术性强、费时等缺陷。由于质谱技术和PCR方法在便捷程度、检测速度等方面的局限使其难以满足市场应用的需求，因此，建立快速、高效、精确的食物过敏原检测方法显得尤为重要。以酶联免疫吸附法(Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)、免疫层析技术(Lateralflowimmunoassay，LFIA)、生物传感器技术为代表的免疫学检测(Immunoassay)方法因其特异性强、灵敏度高及操作简便而备受青睐，目前在众多过敏原检测方法中应用最为广泛。1食物过敏原免疫学原理食物过敏原为食物中引发或激起过敏反应的物质，通常为在特定食物中

6、含有的含量丰富、天然存在的蛋白质。根据过敏原反应的速度及l临床特点等将致敏机制分为I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，其中大部分食物过敏是由IgE介导的I型超敏反应，包括致敏和发敏两个阶段。一定量的过敏原可诱导易感个体产生足够量的IgE，IgE通过血循环分布全身，并与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜表面特定的受体结合，从而使机体处于致敏状态。当再次接触含相同或相似过敏原成分的食品时，过敏原分子特异性识别致敏细胞膜表面的IgE，诱导细胞脱颗粒释放炎症介质而触发食物过敏症。一般症状包括呕吐、腹痛、腹泻等，也包括皮肤反应及呼吸道症状，甚至会出现系统性过敏性休克或者死亡l2J，目前尚无有效的治疗方法

7、。能引起过敏反应的食物蛋白部分可能是一些氨基酸在一级结构的简单延伸，或蛋白质的独特三维结构，分别称为线性和构象决定簇(构象表位)。食物过敏原免疫学检测技术的原理基于抗原决定簇和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，使得抗原与抗体能够特异性结合，而过敏原的分离、鉴定、纯化及抗体的制备是实现食物过敏原免疫学检测的前提。利用过敏原的物理化学性质，采用硫酸铵沉淀、磷酸盐抽提等方法得到粗致敏蛋白提取液；聚丙酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)可使粗提液中不同相对分子质量的蛋白质得到分离；利用对食物过敏原过敏患者的血清或特异性单克隆抗体，通过免疫印迹(Western—blotin

8、g)法鉴定