竹节参总皂苷免疫调节作用论文

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1、竹节参总皂苷免疫调节作用论文【摘要】目的观察竹节参的有效成分竹节参总皂苷(totalsaponinsofPanaxjaponicus,TSPJ)的免疫调节作用。方法灌胃给TSPJ14d,测定小鼠巨噬细胞碳清除率、血清溶血值,二硝基氟苯诱导的小鼠迟发性超敏反应(DTH),放射免疫法检测血中IL2,TNFα含量,观察TSPJ对小鼠免疫功能的影响。结果与空白组比较,TSPJ对胸腺指数及碳清除率无明显影响;降低血清溶血素水平及抗体生成细胞数;能降低血中IL2.freelg·kg-1TSPJig对DTH反应有一定的增强作用,100mg·kg-1TSPJig则有抑制作

2、用。结论TSPJ能明显调节小鼠免疫功能,.freelmunologicalfunctioninmice.MethodsMiceinistratedg·kg-1for14days.Thephagocytosisabilityofmacrophage,serumhemolysinconcentration,theusandspleenofthemice,thelevelofIL-2,TNF-αproductsinserumeasured,andthedelayedtypehypersensitivity(DTH)acrophageandtheusofthemice,

3、TSPJdecreasedtheserumhemolysinconcentrationandhemocytolysisplanque,andreducedthecontentsofIL-2,TNF-αinserumsignificantly.TSPJ(25mg·kg-1)strengthenedDTH,butTSPJ(100mg·kg-1)inhibitedDTH.ConclusionTSPJcanregulateimmunologicalfunctionofmice,aybeanimportantmechanismoftreatingrheumaticdise

4、ases.Keymunologicalfunction;Serumhemolysinconcentration;Delayedtypehypersensitivity;Cytokine竹节参别名:竹根七、萝卜七、峨三七(四川)。PanaxjaponicumC.A.Mey.─五加科Araliaceae,以其根茎状如竹节而得名。有滋补强壮、散淤止痛、止血、祛痰功能。竹节参对动物机体的适应能力、抗炎、抗氧化能力都有一定的增强作用[1~3]。国内对竹节参具体成分的系统性研究还很少。笔者从药理学、生理生化、免疫学等多个角度系统研究竹节参皂苷对小鼠免疫功能的影响,为进一步了

5、解竹节参的药理作用及分子作用机理奠定基础,为利用竹节参这一宝贵资源提供一定的科学依据。1材料与方法1.1仪器与材料723分光光度计(上海仪器厂);CENTRIFUGETDL-5型离心机;SN-695B型放射免疫γ计数器(上海原子核研究所,日环仪器厂);竹节参为华中科技大学生命科学院天然产物实验室提供,通过标准品检测,TSPJ净含量33.32%;环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司,批号06060321);2,4-二硝基氟苯(DNFB,中国医药集团上海化学试剂公司);香菇多糖片(浙江普洛康裕天然药物有限公司);印度墨汁(欧瑞卡生物技术有限公司);IL-2试剂盒、TN

6、F-α试剂盒(北京福瑞生物工程有限公司,批号20061019,20061025);葡萄糖及其它试剂均为分析纯。1.2动物分组与处理实验用小鼠为昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄各半,湖北省动物实验中心,合格证号:SCXK(鄂)2003-0005;绵羊红细胞(SRBC)和豚鼠取自湖北省动物实验中心。1.3方法1.3.1分组小鼠随机分为6组,每组12只。Ⅰ组为正常对照组给等量蒸馏水,Ⅱ组为环磷酰胺(CTX)组,隔天ip40mg·kg-1,Ⅲ组为香菇多糖ig200mg·kg-1,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ组为竹节参总皂苷ig25,50,100mg·kg-1。1.3.2碳廓清实验[5]

7、印度墨汁以生理盐水10倍稀释备用。末次给药后24h,各鼠尾静脉注射墨汁0.1ml/10g体重;注射后第5min,第25min用毛细吸管分别从眶后静脉丛取血25μl;溶于2ml0.1%Na2CO3溶液中摇匀,置于721分光光度计在600nm下比色,测光密度(OD值);颈椎脱臼致死,并取肝、脾、胸腺进行各项指标测定。K=logOD1-logOD2/t2-t1a=3K×体重/(肝重+脾重)1.3.3血清血溶素实验[5]连续给药14d后取保存的绵羊红细胞,按每只鼠20%SRBC0.2ml腹腔注射致敏。免疫4d后摘除小鼠眼球取血约1ml。测定IgM时,上层血清用生理盐水稀

8、释600倍后,取1ml,

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