饲料原料中赭曲霉毒素的快速筛查胶体金快速定量法

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1、《饲料原料中赭曲霉毒素的快速筛查胶体金快速定量法》江西省地方标准编制说明一、标准制定意义（一）介绍赭曲霉毒素A是由多种生长在粮食（小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等）、花生、蔬菜（豆类）等农作物上的曲霉和青霉产生的。动物摄入霉变饲料后，这种毒素也可能出现在猪和母鸡等的肉中。赭曲霉毒素主要损害动物肝脏与肾脏，引起肝脏和肾脏损伤，大量毒素也可能引起动物肠黏膜炎症和坏死。有报道指出，食物中的OTA与一种致命的地方性肾脏疾病（balkanendemicnephropathy）有关，且有致癌、致畸作用，近年来

2、引起了人类营养学家的重视。正常条件下，小麦和玉米受OTA污染的机率较小，约1%～5%，其含量为0.01～5mg/kg；大麦和燕麦被污染的机率较高，约为10%，其含量一般在0.1mg/kg以下，个别样品高达27mg/kg。赭曲霉毒素包括3种类型，毒性强弱顺序是：OTA>OTC>OTB。OTB是OTA的脱氯衍生物，OTC是OTA的乙基酯，OTB和OTC的含量一般较低，毒性较OTA小。因此，饲料检测时可以主要分析OTA含量。目前，小麦、大麦、玉米等谷类作物中OTA的测定方法有薄层色谱法（TLC）、酶联免疫吸附法（

3、ELISA）、气相色谱法（GC）、高效液相色谱法（HPLC）、高效液相色谱-质谱法（HPLC-MS）。TLC法繁琐费时，且灵敏度、特异性较差，提取过程中所需有机溶剂品种多且量大，易污染环境，对人体有较大危害。ELISA法测定结果受试剂盒差异、实验温度、仪器灵敏度等条件影响较大。GC、GC-MS、HPLC和HPLC-MS8法普遍存在着样品前处理过程复杂，灵敏度易受样品的净化、浓缩等步骤的影响，耗时，检测设备昂贵，并要求有专业的技术人员及较长的分析周期。同时，这些检测方法无一例外要求在检测过程中使用毒素标准溶液

4、，给环境和检测人员的安全造成风险。本标准项目是通过化学合成法制备赭曲霉毒素A人工抗原，利用此抗原免疫实验动物制备赭曲霉毒素A单克隆抗体，基于此原料基础上开发赭曲霉毒素A快速检测试纸条，再通过胶体金读数仪进行大米、玉米、小麦等样品中赭曲霉毒素的定量分析。定量分析便于将检测结果与国家限量对比，有助于监管部门根据粮食的污染水平进行粮食分级管理，同时有助于企业内部更好地进行质量控制。本标准可提高粮食样品检测、监测效率，降低成本，保护环境，保障从业人员健康安全。（二）背景据联合国粮农组织（FAO）统计，全世界每年谷物

5、产量的25%受到真菌毒素不同程度的污染。随着饲料工业的快速发展，近年来，中国的饲料也受到霉菌污染的严重挑战。自2006年以来，玉米等饲料原料价格普遍上涨，致使很多饲料企业及养殖户使用低质饲料原料，加上近年来气候的变化，华北、东北地区降雨量增加，进一步加重了饲料原料中真菌毒素的污染。而由于饲料原料和配合饲料中多种真菌毒素同时存在，在食用油等产品及牛奶中真菌毒素污染也比较严重。在世界许多地方，目前真菌毒素已构成重要的食品安全问题。真菌毒素对人类和动物健康可产生严重的影响，这一认识导致了许多国家在近几十年来制定了

6、诸多有关食品和饲料中真菌毒素的法规，以保护人类的健康，并保障生产者和贸易商的经济利益。随着全球经济一体化的进程，类似真菌毒素等涉及安全卫生项目的限量标准，越来越多地被利用为贸易保护主义中非关税壁垒的重要手段。因此，为了保证食品安全，保障消费者的健康，为了打破国外的技术壁垒，同时在合理有利的前提下，更多地树立我国的技术性壁垒，开展饲料中真菌毒素的检测并建立标准方法是有效的方法之一。目前国内应用标准检测方法大多为仪器方法，所需仪器设备昂贵，不利于进行广泛推广，并且限制了很多检测单位高效、广泛地开展检测工作。建立

7、符合中国国情的快速检测方法标准，具有检测快速、简便、灵敏、成本低等优点，为打开市场并占领市场提供了先决条件。（三）限量标准、检测方法及研究现状1、限量标准世界各国均对食品中赭曲霉毒素A的含量做出了严格的规定。欧盟关于赭曲霉毒素A的限量标准分类最为详细，未加5工谷物为μg/kg，由未加工的谷物制备的所有产品，包括加工的谷物制品及直接供人食用的食物为3.0μg/kg，供婴幼儿食用的谷类加工食品和婴儿食品为0.5μg/kg。我国对食品中赭曲霉毒素A的限量标准（GB2761-2011）是：谷物及其制品≤5μg/kg

8、；豆类及其制品≤5μg/kg。我国对饲料中赭曲霉毒素A的限量标准（GB13078.2-2006）是：配合饲料和玉米≤100μg/kg。表1我国饲料中的赭曲霉毒素A限量标准8产品名称限量/(μg/kg)谷物及其加工产品≤100配合饲料≤1002、检测方法及研究现状真菌毒素的检测方法主要有两种，一是将色谱技术作为基础的物理化学检测方法，包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）等，而薄层层析法（TLC）由于操