单克隆抗体公开课教案

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1、文笔中学公开课教案2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体备课教师：陈青、吴桂兰、赵日开课教师：陈青开课时间、班级：2015/4/22星期四下午第2节高二（3）班教学重、难点（1）动物细胞融合技术与植物体细胞杂交的区别（2）单克隆抗体的制备过程、方法与原理与应用教学目标知识目标⑴掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。⑵简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。⑶了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。能力目标让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。情感目标通过向学

2、生介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果，使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展，认识到学无止境，形成终生学习的意识。教学媒体动物细胞融合、单克隆抗体制备过程的教学课件教学过程个人复备【导入新课】由遇蛇被蛇咬，寻医缺药引入，引导学生说出传统方法制备抗体的不足：生产难、周期长、产量低、纯度差、特异性低。且浆细胞的寿命只有2-3天，没有办法通过大规模浆细胞培养获得抗体，而动物细胞融合的发现及动物细胞融合技术的发展为抗体的大规模制备带来曙光。由此引入新课。一、动物细胞的融合师：大家通过自学，大了解了动物细胞融合的相关知

3、识，哪位同学到前面来讲解一下细胞融合的内容？一同学用自己的话讲解，其他同学做补充并提问：（1）动物细胞融合技术的概念？（2）动物细胞融合的理论基础是什么？(3)使用灭活病毒作为诱导剂的原理是什么？灭活的病毒能诱导植物原生质体融合吗？（4)哪种促融合方法效率较高且对细胞伤害小？(5)与植物体细胞杂交相比有何差别？（6）动物细胞融合技术的意义是什么？1、概念：是指（在一定的条件下）两个或多个细胞融合形成一个细胞的过程。[强调要点]“2个或多个动物细胞”→“1”、“杂交单核细胞”2、动物细胞融合的方法：物理法（如电场法）、化学法（如聚乙二醇法）、生物法（如仙台病毒法）注

4、意：应用物理法进行细胞融合的效率高，且对细胞伤害小，易操作、控制和观察。3、过程：师：当我们把2个动物细胞放到一起时，还需要做什么呢？生：诱导师：在诱导方法上，动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法是否相同？生：相类似，可以用物理法、化学法，但动物细胞融合时可用灭活的病毒作为诱导剂。细胞A细胞B物理法灭活的病毒化学法杂交细胞4、意义：打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能；广泛应用；制备单克隆抗体二、单克隆抗体的制备师：既然知道动物细胞融合技术可以实现异种细胞融合，获得具备两种亲代细胞优良性状的杂交细胞，而B淋巴细胞的特点是：能产生抗体但不能无限增殖，与之融合的细胞

5、应该具有什么特点？ 生：能无限增殖但不能产生抗体。师：什么细胞具有这样的特点？生：骨髓瘤细胞师：对。我们必须用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，得到杂交细胞称为杂交瘤细胞，经克隆化培养形成细胞群，就有能产生出化学性质单一、特异性强的抗体，即单克隆抗体，这就是单克隆抗体的概念。请阅读课本P58单克隆抗体制备的文字及图示，注意一下几个问题:1.细胞融合得到的一定是杂交瘤细胞？如果不是怎么解决？2.杂交瘤细胞一定能分泌单一种抗体？如果不是怎么解决？3.如何用杂交瘤细胞大规模生产单克隆抗体？师：如何获得用于融合的B淋巴细胞？生：用抗原（蛇毒）对小鼠进行免疫，刺激机体产生特意性免

6、疫反应，再从脾脏中获取B淋巴细胞，分离得到的B淋巴细胞必须经过培养后才具备融合的能力。师：进行细胞融合时，是一个B淋巴细胞与一个骨髓瘤细胞融合吗？生：为提高融合的成功率，应用一群B淋巴细胞与一群骨髓瘤细胞融合。师：那必然存在没有融合，或相同细胞融合的现象，而我们要得到的是杂交细胞?科学家是怎样解决这一困难的呢？生：用选择性培养基筛选杂交瘤细胞师：杂交瘤细胞一定能分泌单一种抗体吗？不一定。一种B淋巴细胞只能分泌一种抗体，机体中存在上百万种抗体，那就意味着存在上百万种B淋巴细胞，从脾脏获得的B淋巴细胞群，融合后的杂交细胞是多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的结果，必须进行

7、第二阶段筛选。怎么筛选？生：将细胞稀释后克隆化培养，得到单一性状的细胞群后进行抗体检测，检测为阳性的即为目标杂交瘤细胞。师：因为杂交瘤细胞在分裂过程中会死完、发生染色体丢失等现象，性状不稳定，分泌抗体的能力可能丧失。一次克隆化培养和抗体检测就够了吗？生：不够，必须进行多次克隆化培养和抗体检测，才能得到纯化的杂交瘤细胞群。师：如何用杂交瘤细胞大规模生产抗体：生：体内培养，将杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔中，从腹水里分离提取；体外培养，运动动物细胞培养技术，从培养液中分离提取。二、应用：1.诊断试剂早孕试纸：在基因工程中我们知道了鉴定某种特定的蛋白用抗原抗体杂交法。现在已知

8、在怀孕女性