甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育上位抑制基因

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1、HUAZHONGAGRICULTURALUNIVERSITY博士学位论文PhDDISSERTATION甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育上位抑制基因ESP的遗传图谱定位MAPPINGOFTHEEPISTATICSUPPRESSORGENE(ESP)OFARECESSIVEGENICMALESTERILITYINRAPESEED(BRASSICANAPUSL.)研究生:徐正华CANDIDATE:XUZHENGHUA导师:杨光圣教授SUPERVISOR:PROFESSORYANGGUANGSHENG专业:作物遗传育种MAJOR:CROPGE

2、NETICS&BREEDING研究方向:FIELD:油菜遗传育种RAPESEEDGENETICSANDBREEDING中国武汉WUHAN，CHINA二○○九年九月SEPTEMBER，2009华中农业大学博士学位论文2009分类号：密级：华中农业大学博士学位论文甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育上位抑制基因Esp的遗传图谱定位MappingoftheEpistaticSuppressorGene(Esp)ofaRecessiveGenicMaleSterilityinRapeseed(BrassicanapusL.)专业:作物遗传育种Ma

3、jor:CropGenetics&Breeding研究方向:油菜遗传育种Researchregion:RapeseedGeneticsandBreeding研究生:徐正华PhD.Candidate:XuZhenghua导师:杨光圣教授Supervisor:Pro.YangGuangsheng华中农业大学植物科学与技术学院CollegeofPlantScienceandTechnology,HuazhongAgriculturalUniversity作物遗传改良国家重点实验室NationalKeyLaboratoryofCropGe

4、neticImprovement二○○九年九月September,200981华中农业大学博士学位论文2009目　　录摘要IABSTRACTIII缩略词表V1文献综述11.1油菜杂种优势与利用11.2油菜杂种优势利用的途径21.2.1细胞质雄性不育21.2.2细胞核雄性不育21.2.3细胞核+细胞质雄性不育31.2.4生态型雄性不育31.2.5自交不亲和31.2.6其他利用途径31.3油菜细胞核雄性不育的研究概况41.3.1油菜细胞核雄性不育的来源41.3.2油菜细胞核雄性不育的形态特征51.3.3油菜细胞核雄性不育的遗传分类61

5、.3.4油菜细胞核雄性不育的细胞学研究91.3.5油菜细胞核雄性不育的分子机理研究101.4质量性状遗传图谱定位的分子标记131.4.1常见的用于定位的分子标记131.4.2质量性状定位群体的选择及定位的方法161.4.3油菜细胞核雄性不育相关基因的定位171.4.3油菜质量性状基因精细定位的策略探讨201.5分子标记辅助选择在油菜育种中的应用221.5.1前景选择231.5.2背景选择241.5.3分子标记辅助选择在油菜育种中的应用252本研究的目的与意义273甘蓝型油菜隐性细胞核雄性不育上位抑制基因ESP的遗传图谱定位283.

6、1材料与方法283.1.1实验材料2881华中农业大学博士学位论文20093.1.2实验群体的构建283.1.3育性调查以及DNA的提取283.1.4DNA混合池的构建283.1.5AFLP分析293.1.6AFLP标记向SCAR标记的转化323.1.7侧翼序列的PCRwalking343.1.8连锁遗传分析353.1.9SCAR引物的大群体分析353.1.10各标记序列与拟南芥序列的同源性比较353.1.11比较图谱定位363.2结果与分析363.2.1定位群体的育性调查结果363.2.2AFLP引物的筛选363.2.3与上位抑

7、制基因Esp连锁的AFLP标记373.2.4连锁遗传分析403.2.5差异片断的回收与克隆413.2.6差异片段的序列分析及SCAR标记的转化423.2.7SCAR标记的大群体分析473.2.8大群体连锁遗传分析483.2.9各标记序列与拟南芥序列的同源性比较493.2.10比较图谱定位493.3讨论523.3.1AFLP技术及标记的筛选523.3.2AFLP标记及其向SCAR标记的转化533.3.3定位群体的选择553.3.4特异性分子标记的开发553.3.5与Esp连锁的分子标记的应用价值573.3.6上位抑制基因Esp的精细

8、定位与图位克隆策略57参考文献60作者简历80致谢8181华中农业大学博士学位论文2009摘要油菜隐性细胞核雄性不育具有不育性彻底、稳定、无不良胞质效应、恢复源广等优点，在国内已经成为杂种优势利用的一个重要途径，但由于得不到100%的不育系，在杂交