（全国）2018版高考生物大一轮复习 第十三单元 生物技术实践 第47讲 微生物的培养与应用学案

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1、第47讲　微生物的培养与应用　1.微生物的分离和培养　2.某种微生物数量的测定　3.培养基对微生物的选择作用　4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用　培养基及微生物的纯化培养技术1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。(3)分类2．无菌技术的主要方法及适用对象[连一连]3．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)计算(2)称量(3)溶化(4)灭菌(5)倒平板204．纯化大肠杆菌(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散

2、成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。(2)主要方法：图甲可表示用平板划线法接种获得的平板；图乙可表示用稀释涂布平板法接种获得的平板。(3)纯化原理：图甲菌体的分散是通过一系列的连续划线操作实现的；图乙菌体的分散是通过图丙梯度稀释和图丁涂布平板操作实现的。5．菌种的保存方法(1)对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。(2)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。1．培养基的配制原则(1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜：细菌为6.5～7.5，放线菌为

3、7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培养不同微生物所需pH不同。2.消毒和灭菌的辨析项目条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物煮沸消毒法日常用品20理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及容器的灭菌3.两种纯化细菌方法的比较项目优点缺点适用范围平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征操作复杂、需要涂布多个平板适用

4、于厌氧菌和兼性厌氧菌(1)认清不同生物需要的营养物质不同①微生物需要的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源，有些微生物还需要特殊营养物质，如生长因子。②在人和动物中，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。③在植物中，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳三类。(2)平板划线操作的注意事项①操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要对接种环进行火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧目的不同：a．第一次操作目的是杀死接种环上原有的微生物。b．每次划线之间操作目的是杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少。c

5、．划线结束操作目的是杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。②灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。④划线时最后一区不要与第一区相连。⑤划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。201．如图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：(1)图甲是利用________法进行微生物接种，图乙是利用________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是________和________；对这两种接种工具进行灭菌

6、和消毒的方法依次是________和酒精消毒。(2)接种操作为什么一定要在酒精灯火焰附近进行？________________________________________________________________________________________________________。(3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？________________________________。(4)如图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是________(填“图甲”或“图乙”)。解析：图甲和图乙分别是平板划线法和稀释涂布平板法，这两种方法

7、所用的接种工具分别是接种环和涂布器。由于在酒精灯火焰附近存在着无菌区域，因此接种常在火焰附近进行。在微生物培养过程中会产生水，对微生物的生长造成影响，故需要倒置培养。答案：(1)平板划线　稀释涂布平板　接种环　涂布器　灼烧灭菌(2)火焰附近存在着无菌区域(3)避免培养过程产生的水分影响微生物的生长(4)图乙2．(2016·高考全国卷丙，39)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生