大豆粕碱性蛋白酶水解肽及ace抑制活性的研究

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1、大豆粕碱性蛋白酶水解肽及ACE抑制活性的研究作者简介：温雪琴（1989—），女，（汉），硕士研究生，研究方向：微生物应用及发酵工程。通信作者：冯欣（1981—），女，（汉），实验师，硕士研究生，微生物应用及发酵工程。温雪琴1，刘屾1，黄弢1，赵嘉希2，冯欣1*，孙建华1（1.天津市动植物抗性重点实验室，天津师范大学生命科学学院，天津300387；2.天津科技大学，天津300222)摘要：豆粕是大豆经浸提脱脂后得到的副产品，含有大量的大豆蛋白，其水解物对血管紧张素转移酶（ACE）具有明显的抑制作用和降压效果。结果表明：以食品级豆粕为原料，经碱性蛋白酶水解后得到的ACE抑制肽在pH8.0，温度5

2、0℃，豆粕底物浓度40g/L的条件下，酶解3h得到的产物ACE抑制活性最高，为64.21％，对应水解度14.86％；进一步对ACE抑制肽进行高效液相色谱（HPLC）以及超高压液相色谱/四极杆-飞行时间串联质谱联用仪(LC-MS)的分析结果显示：活性物质的主要组分为三肽化合物，分子量为359，分子式为C15H30N6O4，由异亮氨酸、精氨酸和丙氨酸构成；其HPLC检测条件为色谱柱：Zorbax300SB-C18，5µm，4.6×150mm；检测波长：228nm，流动相：50%甲醇-超纯水，各含0.1%三氟乙酸；流速：0.7mL/min；柱温：26℃；进样量：10µL。关键词：豆粕；碱性蛋白酶；

3、ACE抑制肽；高效液相色谱法HPLC；ACEinhibitoryActivityonHydrolyticPeptidesfromSoybeanMealhydrolyzedbyAlkalineProteaseWENXue-qin1，LIUShen1，HUANGTao1，ZHAOJia-xi2，FENGXin1*，SUNJian-hua1(1.TianjinKeyLaboratoryofAnimalsandPlantsResistance，CollegeofLifeSciences，TianjinNormalUniversity，Tianjin，300387，PRChina；2.TianjinU

4、niversityofScienceandTechnology，Tianjin300222，China)Abstract：Soybeanmeal,asabyproductofsoybeanoilmanufacture,containsmainlyofprotein.Peptidesderivedfromtheproteinhadbeenproventobeangiotensin-convertingenzyme(ACE)inhibitoryandantihypertensiveeffect.Food-gradesoybeanmealwashydrolyzedbyalcalaseforthep

5、reparationofACEinhibitorypeptides.TheoptimumenzymolyticconditionsforthepreparationwereatpH8.0,55℃for3handasubstrateconcentrationof40g/L.TheACEinhibitoryactivityandthedegreeofhydrolysis(DH)wereseparatelyhighupto64.21％and14.86%.Subsequentdetectionofhighperformanceliquidchromatographic(HPLC)andHighpre

6、ssureliquidchromatography/quadrupole-timeofflighttandemmassspectrometry(LC-MS)suggestedthattheactivefractionmightbetripeptidewithmolecularweightof359andthemolecularformulaofC15H30N6O4whichconstituteofIsoleucine,ArginineandAlanine.ItsHPLCconditionsweredeterminedasfollows:column,ZORBAXSB-C18(4.6mmid×

7、150mm,5um);detectionwavelength,228nm;mobilephase,methanol-ultra-purewater(50:50,v/v,bothcontaining0.1%(v/v)trifluoroaceticacid;flowrate,0.7mL/min;column;temperature,26℃;samplesize,10μl.Keywords：Soybeanmeal;