载脂蛋白b(apob) 免疫比浊法

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1、项目载脂蛋白B（APOB）方法免疫比浊法目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3.试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4.仪器5.操作6.计算7.操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8.参考值9.临床意义附录A:参数1.检测原理APOB与特异的抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm测定该不溶性复合物的浊度。通过测定标准品，建立一个吸光度对APOB浓度的标准曲线就可以测定出样品中的APOB浓度。2．标本采集与处理2.1受检者的准备

2、：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或中哺乳后3个月检验才能反应其基本血脂水平。注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止

3、血带。2.3抗凝剂：血浆使用EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。2.4标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。3．试剂3.1试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司APOB试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：组成混合后的浓度R1:聚乙二醇<4%氯化钠106mmol/LTris/HCL缓冲液15mmol/LR2:抗人APOB抗体表面活性剂3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次：空白定标：每日

4、需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色至浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。项血脂类标准液或APOA/B标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，2-8℃储存可稳定一周，参见校准血清说明书。4．仪器KONELAB30型号仪器。性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应

5、达到0.001ABS以上。5．操作样品为血清。本法为终点法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6．计算△A测定C=————×C0△A标准式中：c——测定血清载脂蛋白B浓度，g/L；△A测定——标本管吸光度；△A标准——标准管吸光度；CO——校准血清中载脂蛋白浓度，g/L；△A＝A2－A17．操作性能7.1精密度：批内CV<1.32%，批间CV<3.35。7.2准确度：检测结果的相对不准确度≤±10%。7.3灵敏度：载脂蛋白B浓度为：1g/L时，浊度吸光度A340nm约0.372~0.454。7.4可报告范围

6、：血清与试剂用量之比为3:250:50时，测定上限为2.24g/L。7.5特异性：测量值在给定值的90%-110％范围内。7.6干扰：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。8．参考值0.6-1.14g/L9．临床意义载脂蛋白B测定试剂盒用于定量测定血清中载脂蛋白B的含量。载脂蛋白B是低密度脂蛋白（LDL）的主要成份。APO-B的浓度与动脉硬化相关联，是评价冠心病的有效指标。目前的研究结果表明：冠心病患者一般具有比较低的APOA-1水平和比较高的APO-B水平。附录

7、A:参数