重组人3型腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

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1、重组人3型腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的制备及鉴定?1008?南方医科大学学报fJSouthMedUniv)2008;28(6)重组人3型腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的制备及鉴定周荣~,盛慧英,田新贵,王长兵,龚四堂,陈俏连(中国科学院南海海洋研究所,广东广州510301;中国科学院研究生院,北京100049;广州市儿童医院,广东广州510120)摘要:目的制备抗人3型腺病毒六邻体蛋白的单克隆抗体并对单抗进行鉴定.方法用纯化的重组六邻体蛋白免疫BALB/cdx鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合.经ELISA间接法筛选和克隆化培养,获得4株分泌抗腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞.纯化其腹水

2、获得单抗.使用ELISA,Westernblot和中和实验等方法鉴定单抗的敏感性,特异性以及中和活性.结果ELISA和免疫印迹结果表明这4株单抗与腺病毒六邻体蛋白可以特异性结合.而且,4C6株单抗具有中和活性.结论获得了4个单抗为腺病毒六邻体蛋白的单克隆抗体,可用于3型腺病毒的早期诊断和药物治疗的研究.关键词:3型腺病毒;六邻体;单克隆抗体;中和抗体中图分类号:R392.116文献标识码:A文章编号:1673-4254(2008)06.1008—03Preparationandcharacterizationofspecificmonoclonalantibodiesagainsthe

3、xonofHAdV3ZHOURong,SHENGHui-ying~,TIANXin-gui,WANGChang-bing~,GONGSi—taIl,CHENQiao-lianSouthChinaInstituteofOceanology,Guangzhou510301,China;2Gr重组人3型腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的制备及鉴定?1008?南方医科大学学报fJSouthMedUniv)2008;28(6)重组人3型腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的制备及鉴定周荣~,盛慧英,田新贵,王长兵,龚四堂,陈俏连(中国科学院南海海洋研究所,广东广州510301;中国科学院研究生院,北京10004

4、9;广州市儿童医院,广东广州510120)摘要:目的制备抗人3型腺病毒六邻体蛋白的单克隆抗体并对单抗进行鉴定.方法用纯化的重组六邻体蛋白免疫BALB/cdx鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合.经ELISA间接法筛选和克隆化培养,获得4株分泌抗腺病毒六邻体蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞.纯化其腹水获得单抗.使用ELISA,Westernblot和中和实验等方法鉴定单抗的敏感性,特异性以及中和活性.结果ELISA和免疫印迹结果表明这4株单抗与腺病毒六邻体蛋白可以特异性结合.而且,4C6株单抗具有中和活性.结论获得了4个单抗为腺病毒六邻体蛋白的单克隆抗体,可用于3型腺病毒的早期诊断和药物治疗的研究.

5、关键词:3型腺病毒;六邻体;单克隆抗体;中和抗体中图分类号:R392.116文献标识码:A文章编号:1673-4254(2008)06.1008—03PreparationandcharacterizationofspecificmonoclonalantibodiesagainsthexonofHAdV3ZHOURong,SHENGHui-ying~,TIANXin-gui,WANGChang-bing~,GONGSi—taIl,CHENQiao-lianSouthChinaInstituteofOceanology,Guangzhou510301,China;2GraduateSc

6、hoolofChineseAcademyofSciences,Beijing100049,China;3GuangzhouChildren.SHo~ital,Guangzhou510120,ChinaAbstract:ObjectiveToobtainthemonocbnalantibodyagainsthexonproteinofhumanadenovims.MethodsBALB/cmicewereimmunizedwithpurifiedrecombinanthexonprotein,andthespleencellsofthemicewereisolatedandfusedwi

7、thmy~macells.FourhybridomacellstrainswerescreenedbyindirectELISAandcultured,andthesensitivity,specificityandvirusneutralizingactivitywereanalyzedwithELISA,Westernblottingandneutralizingtest.ResultsThemOUseascitesproducedbyth

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