现代生物技术导论复习总结

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1、生物技术:是以生命科学为基础,应用自然科学与工程学原理,设计构建新型物种体系,以提供产品和为社会服务的综合性社会体系。基因工程:按照人类的愿望对携带遗传信息的分子进行设计和改造的分子工程,包括基因重组,克隆和表达。候选基因策略:为确定某种遗传疾病确实是由于基因的缺陷造成的,研究人员要对患者的相应基因进行分析,若患者体内确实存在缺陷,那么肯定该病确实是由于这一基因的突变造成的,此称为候选基因策略。药物敏感基因:某些病毒中含有将无害的药物前提体转化为有毒物质的酶,这些没有自身编码,人们称之为自杀基因或药物敏感基因。SD序列:一般说在紧靠起始密码子的上游有

2、一段长约6-8个核酸的序列,是核糖体与MRNA的结合部位称为SD序列。结构域互换:为研究基因的调控及基因结构与蛋白质功能间的关系,人们常把相关基因的相类似,具功能的区域互换,然后检查互换后的蛋白质功能。表达图谱:是只可表达的基因在染色体或基因DNA片段上精确定位,并且确定各个表达基因之间的距离的一种物理图谱。生物农药:生物体产生的具有防病,防虫,防杂草虫等功能的一大类物质的总称。限制性片段多态性:由于限制性内切酶酶切位点的突变而造成的限制性内切酶酶解后产生的DNA片段长度的不同称为。生殖细胞疗法:以生殖细胞为对象的基因治疗方法。简答题1.质粒作为基因

3、工程的载体应具备哪些条件?(1)具有复制起始点(2)具有抗生素抗性基因(3)具有若干酶单一识别位点(4)具有较小的分子量和较高的分子数2.理想生物反应器应具备什么基本条件?(1)制造生物反应器的所采用的材料对细胞必须无毒(2)反应器必须具备良好的传热,传质和混合的功能。(3)密封性要好,可避免外界微生物污染。(4)对培养环境中多种物理化学参数能自动检测和控制调节,控制精度要高,而且保持环境质量均一。(5)可长期连续运转。(6)容器内部光滑,无死角奥,能耐高压蒸汽消毒,便于操作维修。(8)设备成本低(9)适合工艺要求,易获最大的生产效率。(10)反应器

4、必须携带各种监控系统。3.防治植物病害的微生物的主要作用机理有哪几种?(1)拮抗作用,对病原微生物产生拮抗作用的微生物能像环境中释放一些化学物质,抑制其他微生物的生长。(2)寄生作用。有些微生物可寄生在植物病原菌体内,从而干扰和抑制病微生物的正常生活。(3)竞争作用,两种微生物之间通过争夺营养物质和生从空间而相互抑制的现象。(4)共生微生物的保护作用,许多植物的共生真菌可形成外生菌根,保护与其共生的植物。4.如何构建调查文库,包含几步、(1)用酶切位点极不常见的限制性内切酶酶解纯化人类基因组。(2)分离约200bp左右的片段。(3)把这些片段连接到带

5、有大肠杆菌基因supFtRNA的小片段DNA上,然后环化。(4)用EcoRI处理上述样品,然后将其克隆到λ噬菌体载体中,该载体只能容纳约20kb大小的外援DNA.5.目前生物技术在医药领域的应用主要包含几个方面,具有哪些优越性?包括:(1)生产基因工程药物(2)生产发酵工程药物(3)生产核酸类药物(4)利用生物体系加工天然药物(5)从海洋生物中提取药物优越性:(1)药物的针对性强,疗效好,副作用小(2)能够将自然界含量极低有效生物活性物质利用生物体系进行大规模生产。(3)可以对蛋白质药物进行改造,提高疗效,降低毒性,提高稳定性。(4/)开发出新品种的

6、药物治疗过去无法治疗的疾病。(5)可以建立起高效,快速,准确,简便的分子诊断,促进疑难病的早期诊断和治疗。6.腺病毒载体是目前常用的基因治疗载体之一,期作为基因治疗载体具有那些优点即不足?优点:(1)腺病毒比较安全(2)腺病毒的宿主范围较广(3)可以在呼吸道和肠道中复制繁殖,所以可以通过静脉注射,口福,喷雾等方法进行基因治疗。(4)腺病毒载体中插入的外源基因可大7.5kb。(5)腺病毒容易制备,纯化,浓缩,能够满足基因治疗和临床需要。(6)腺病毒的基因结构与功能及生活史目前了解的比较清楚,用他作为载体进行基因治疗比较容易。不足:1,重组的病毒DNA是

7、以游离的附加体形式存在于细胞中,不能整合到细胞的染色体中,因而基因表达的时间短,不能满足基因承诺过期表达的需要(2)重组腺病毒载体反复使用时,可能诱发集体的免疫反应,从而影响外源基因的表达,进而影响治疗效果。7.简述改进型双引物诱变的过程?1.将目的基因克隆到M13噬菌体中,提取M13单链DNA作为PCR模板。2。设计两个引物。这两个引物分别与M13同一条单链的不同DNA片段互补,引物1与目的基因的一部分互补,但含有一个核苷酸的突变,引物2中含有一个酶切位点,而且有一个核苷酸被诱变,3。对引物1的5‘端进行磷酸化,然后再DNA聚合酶的作用下进行引物延

8、伸反应,引物2的新生链的3‘端与引物1的磷酸化后的5‘端相遇,两端DNA在T4DNA连接酶的作用下连接,这样

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