实验诊断学实习指导

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1、实验诊断学实习指导主编张丽霞吴健民人民卫生出版社96前言实验诊断学（LaboatotyDiagnosis）是诊断学的一部分，是基础医学向临床医学过渡的一门桥梁学科。实验诊断学教材是高等医学院校教材体系中一门重要课程，是五年制和七年制学生的必修课。全国高等医药教材研究会组织全国有关专家和教授，于2000年编写并出版了以五年制学生为对象的第五版诊断学（其中含实验诊断学）及七年制学生为对象的实验诊断学。这两部教材编写适应了我国高等医药教育的改革和发展，以培养面向21世纪高级医学人才为着眼点，内容上做了大量的除陈推新，做到了继承性与先进性、现代性相结合。实验诊断学实习指导由七年制实验诊断学教材的编委所

2、编写，其编写原则和指导思想同2000年版实验诊断学。本实习指导是实验诊断学规化教材的配套教材，可供高等医学院校五年制和七年制学生实习时使用。编写中强调了理论与实践结合，实验与临床结合，注重培养学生实践能力和思维能力。因而，本实习指导中突出了实践性、实用性、启发性和先进性。在内容上分为上篇与下篇两部分，上篇为实验部分，分为九章，即“血液一般检查”、“骨髓细胞学检查”、“血栓与止血检查”、“尿液与肾功检查”、“体液、分泌物和排泄物检查”、“临床化学检查”、“临床免疫学检查”、“临床细胞遗传学检查”、“临床病原学检查”；下篇为练习部分，包括：选择题、简答题、病例及病例分析等。因为目前我国各高等医学院

3、校实验诊断学尚没有统一的教学大纲，总授课时数、理论课与实习课时数也很不一致，故对实验诊断学实习指导的应用，可以根据各院校的实际情况，自行组织，灵活安排，对其内容可做适当取舍和组合。96编者2002.1.12上篇实验部分第一章血液一般检查一、红细胞检查㈠红细胞计数（目视计数法）【要求】熟悉血细胞计数方法，掌握红细胞计数参考值及临床意义。【原理】用红细胞稀释液将定量血液稀释一定倍数，置于血细胞计数板内，于显微镜下计数一定容积内的红细胞数，然后再计算出每升血液内的红细胞数。【试剂】红细胞稀释液[赫姆（Hayem）稀释液]氯化钠1.0g硫酸钠（Na2SO4·10H2O）5.0g（或无水硫酸钠2.5g）

4、氯化高汞0.5g蒸馏水加至200.0ml，过滤后备用。【器材与仪器】1．试管、玻棒、2ml玻璃吸管、显微镜。2．一次性微量吸管：上有10μｌ及20μｌ的刻度线。3．血细胞计数板：血细胞计数板中央有两个刻度平台（即血细胞计数池），每个平台划分为9个大方格，每个大方格长宽各为1mm，其面积为1mm2，加盖玻片后的深度为0.1mm，故每一大方格的容积为0.1mm3(0.1μｌ)。四角的四个大方格等分为16个中方格，作为白细胞计数用(见图1)；中央一大方格用双线等分为25个中方格，每个中方格又等分为16个小方格，作为红细胞和血小板计数之用(见图1-2)。96【操作】1．取试管一支，准确加入红细胞稀释液

5、2ml。2．消毒皮肤，用采血针刺破皮肤，使血液自动流出，拭去第一滴血，用一次性微量吸管准确取血10μl。3．擦去管尖外面多余的血液，将吸管插入稀释液底部，轻轻将血全部排出，然后吸取其上清液清洗吸管内残余血液2～3次。4．混匀后用玻棒沾取红细胞悬液，充入血细胞计数池内，注意充池的液量要适宜，使之恰好充满，无气泡及多余液体溢出。静置2～3min，待红细胞下沉后进行计数。5．将血细胞计数板置于显微镜下，用低倍镜观察计数池内红细胞分布状况是否均匀，如红细胞分布均匀，即可用高倍镜进行计数。计数中央大方格中的四个角上和中心的中方格（共5个中方格）的红细胞。为准确计数，对于压在线上的细胞计数可采用压在相邻的

6、两侧线者计入（如左侧及上侧），压在另相邻的两侧（如右侧及下侧）线者不计数的原则进行计数(即数上不数下，数左不数右)。6．计算：将5个中方格所得的红细胞数的总和(N)乘以10,000即为每微升(μl)血液内的红细胞数，再乘106换算为每升（L）血液内的红细胞数。100N525计算公式为：96红细胞/L=N××10×200×106=R×1010=×1012525式中：N：5个中方格内数得的红细胞数。×：将5个中方格换算成一个大方格,即0.1μl的红细胞数。×10：将一个大方格的容积（0.1μl）换算成1μl内的红细胞数。×200：为血液稀释倍数。×106：将μl换算成L。7．计数完毕后,用清水将计

7、数盘和盖玻片冲洗干净，待干后备用。【注意事项】1．显微镜物镜接近计数板时应注意，勿损坏计数板及镜头。2．计数时进入显微镜的光线要适中，否则不易找到方格。计数池内的细胞分布要均匀，各中方格的细胞相差不应超过±10%，否则重新计数。3．计数不准确的常见原因：（1）采血不符合要求，如局部皮肤水肿、炎症、穿刺过浅、过度挤压等。（2）稀释液量不准，特别在夏季，稀释液放置过久，水份蒸发。（3）操作太慢，血液凝