生化分离整理思考题

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1、1、全球十大生物技术公司：全球生物技术公司的领头羊--安进公司(Amgen)BiogenIdex(美国)；吉利德迷信（美国）；健赞（美国）；Celgene(美国)；KyowaHakkoKirin（日本）；Vertex(美)；生命科技（美）；CSL(澳大利亚)；Amylin(美)2、生物分离过程的一般流程？答：（1）若目标产物存在于细胞外，将细胞与培养液分离，对上清液粗分离、纯化、脱盐、浓缩、结晶干燥处理后得到成品。（2）若目标产物存在于细胞内，将细胞与培养液分离开来，利用细胞破碎等方法将目标产物释放到液相中，除去细胞碎片后进行一系列

2、粗分离和纯化操作，脱盐、浓缩、结晶干燥处理后得到成品。（3）若胞内目标产物是以包含体形式存在的蛋白质，将细胞与培养液分离开来，利用细胞破碎等方法将目标产物释放到液相中，除去细胞碎片后，利用盐酸胍等变性剂溶解包含体，然后进行蛋白质的体外折叠复性，获得具有活性的目标蛋白质，再经过粗分离、纯化、脱盐、浓缩、结晶干燥处理后得到成品。4、不同生物物质分离提取常用的单元操作？答：菌体：离心过滤、离心沉降、微滤；细胞碎片：离心过滤、离心沉降、泡沫分离细胞：离心沉降、泡沫分离、微滤；血球：离心沉降蛋白质：超离心、泡沫分离、超滤、透析、双水相萃取、反

3、胶团萃取、反相色谱、离子交换色谱、亲和色谱、疏水性色谱、色谱聚焦、凝胶电泳、等电点聚焦、等速电泳、二维电泳、色谱电泳、溶液结晶、盐析沉淀、等电点沉淀、有机溶剂沉淀核酸：超离心、双水相萃取、反胶团萃取、离子交换色谱、亲和色谱、疏水性色谱、凝胶电泳、色谱电泳、盐析沉淀、有机溶剂沉淀糖类：超离心、反渗透、色谱电泳、超滤（用于多糖）抗生素：超滤、有机溶剂萃取、双水相萃取、液膜萃取、离子交换色谱、溶液结晶水：反渗透、电渗析盐：反渗透、透析、电渗析氨基酸：反渗透、电渗析、有机溶剂萃取、液膜萃取、反胶团萃取、离子交换色谱、等电点聚焦、等速电泳、溶

4、液结晶、等电点沉淀有机酸：电渗析、有机溶剂萃取、液膜萃取、离子交换色谱、溶液结晶香料：超临界流体萃取脂质：超临界流体萃取、反相色谱生物碱：超临界流体萃取甾醇类：反相色谱乙醇：渗透汽化维生素：反相色谱尿素：透析1.工业常用吸附剂类型？可吸附的组分？活性炭：憎水性，脱色、脱臭、废气处理。多孔树脂：聚苯乙烯，聚丙烯酸树脂。硅胶、氧化铝等吸附剂：除水。分子筛：筛分作用，除水，混合物分离。 生物大分子层析专用：多孔性纤维素，琼脂糖凝胶，葡聚糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶和羟基磷灰石。2.离子交换树脂的分类、命名和性能。离子交换树脂以官能团的性质分类分

5、为强酸、弱酸、强碱、弱碱、螯合、两性及氧化还原树脂（又称电子交换树脂）性能评价：交换容量：单位质量的离子交换剂（mmol/g干树脂，或mmol/ml湿树脂）所吸附的一价离子的物质的量，是表征离子交换能力的主要参数3.6-4.5mmol/g干树脂。 交联度：与孔隙、机械强度有关。树脂基体聚合时所用二乙烯苯的百分数，对树脂的性质有很大影响。通常，交联度高的树脂聚合得比较紧密，坚牢而耐用，密度较高，内部空隙较少，对离子的选择性较强；而交联度低的树脂孔隙较大，脱色能力较强，反应速度较快，但在工作时的膨胀性较大，机械强度稍低，比较脆而易碎。

6、工业应用的离子树脂的交联度一般不低于4%；用于脱色的树脂的交联度一般不高于8%溶胀度：转型时某些树脂体积变化大，10-20％（Na+→H+），近70％弱丙烯酸系。 密度：真密度：干真密度和湿真密度（阳1.2-1.3，阴1.0-1.1） 视密度（堆积密度）：干视密度和湿视密度（阳：0.75-0.9，阴0.6-0.75） pH范围：弱酸：5-14；弱碱：1-9。3.离子交换树脂的预处理方法。1.层析法分类 （1）凝胶过滤层析法（Gelfiltrationchromatography,GFC）凝胶层析又称分子筛过滤、排阻层析等，是利用凝胶

7、过滤介质为固定相，根据料液中溶质相对分子量的差别进行分离的液相层析法。不同的化合物由于其大小差异，在流经GPC柱时，不同分子量的化合物流经体积不同（大分子不能或难以进入凝胶网格结构的内部，直接从凝胶颗粒之间穿过，保留时间短；而小分子恰恰相反，保留时间较长）而得以分离。GFC可分离洗脱体积介于V0和Vt之间的溶质，分离精度有限，料液的处理量也很小。（2）离子交换层析ionexchangechromatography;IEC）固定相是离子交换剂的层析分离技术。样品中待分离的溶质离子，与固定相上所结合的离子交换，不同的溶质离子与离子交换剂

8、上离子化的基团的亲和力和结合条件不同，洗脱液流过时，样品中的离子按结合力的弱强先后洗脱。（3）疏水性作用层析（Hydrophobicinteractionchromatography,HIC）琼脂糖上连接弱疏水性基团，如：苯基、短链烷